毛细管电泳法对乳及乳制品中乳源蛋白的研究

采用毛细管电泳方法对原料乳、市售鲜奶、不同厂家的巴氏灭菌乳、不同厂家和产地超高温灭菌乳（UHT）、调味乳、乳酸饮料、复原乳、酸奶、奶粉中蛋白成分进行检测。选择聚乙烯醇涂层毛细管,采用柠檬酸缓冲体系,在紫外检测214nm、分离电压20kV条件下对乳及乳制品中的α一乳白蛋白（α-La）、β一乳球蛋白（β-Lg）、α-酪蛋白（α-CN）、β-酪蛋白（β-CN）和k-酪蛋白（k-CN）进行分离测定。结果表明:五种蛋白的含量在原料乳（巴氏灭菌乳、市售鲜奶）、UHT乳、酸奶、调味乳、乳酸饮料、复原乳中依次降低,而UHT乳含量随保质期的增加而减少,奶粉中蛋白质含量因其适应人群而有差异。乳及乳制品中蛋白质的含量与其存在形式、产地及加工工艺相关。      

毛细管电泳法对乳及乳制品中乳源蛋白的研究

采用毛细管电泳方法对原料乳、市售鲜奶、不同厂家的巴氏灭菌乳、不同厂家和产地超高温灭菌乳(UHT)、调味乳、乳酸饮料、复原乳、酸奶、奶粉中蛋白成分进行检测。选择聚乙烯醇涂层毛细管,采用柠檬酸缓冲体系,在紫外检测214nm、分离电压20kV条件下对乳及乳制品中的α一乳白蛋白(α-La)、β一乳球蛋白(β-Lg)、α-酪蛋白(α-CN)、β-酪蛋白(β-CN)和k-酪蛋白(k-CN)进行分离测定。结果表明:五种蛋白的含量在原料乳(巴氏灭菌乳、市售鲜奶)、UHT乳、酸奶、调味乳、乳酸饮料、复原乳中依次降低,而UHT乳含量随保质期的增加而减少,奶粉中蛋白质含量因其适应人群而有差异。乳及乳制品中蛋白质的含量与其存在形式、产地及加工工艺相关。     

高效毛细管电泳法快速测定乳制品中三聚氰胺

建立高效毛细管电泳快速测定乳制品中三聚氰胺含量的方法。样品用100mmol/L 醋酸提取,以150mmol/L磷酸二氢钠为分离缓冲液,以未涂敷石英毛细管(20cm(有效长度)× 50μm)为分离柱,于235nm 波长处检测,采用峰面积外标法定量。实验研究缓冲溶液的浓度、分离溶液pH 值及样品前处理条件对三聚氰胺准确定量的影响。方法检出限为0.06mg/L,定量限为0.2mg/L,线性范围为0.2～200mg/L,线性相关系数r=0.9998。1.0、10mg/L 添加水平的平均加标回收率分别为93.0% 及84.3%。该方法简单快速,6min 之内即可完成一次样品分析(预清洗2min,分离4min)且试剂消耗少、环境友好及检测准确,适合于各类乳制品中三聚氰胺的常规测定。     

毛细管电泳法对乳及乳制品中真蛋白的测定

利用毛细管电泳法对市售乳清蛋白粉、采自当地奶牛场的牛初乳及原料奶、同一品牌不同阶段或同一阶段内不同厂家、不同国别的婴儿配方奶粉、不同保质期的液态奶、不同国别的超高温灭菌(UHT)奶和酸奶、国产复原乳中α- 乳白蛋白(α-Lac)、β- 乳球蛋白A (β-LgA)及β- 乳球蛋白B (β-LgB)的质量分数进行测定。结果表明：α-Lac、β-LgA 及β-LgB 的质量分数在乳清蛋白粉、牛初乳及原料奶中依次降低。液态奶中上述3 种蛋白的质量分数与保质期有关,一般保质期越久的产品,上述3 种蛋白的质量分数越低。大多数酸奶中α-Lac 的质量分数均高于UHT 奶。婴儿配方奶粉中α-Lac 质量分数随着阶段数的增加而增加,而且同一阶段内不同厂家不同国别配方奶粉中α-Lac 质量分数差异也较大,并非进口奶粉中α-Lac 质量分数均比国产奶粉高。     

利用毛细管电泳法测定乳品中乳铁蛋白含量

将样品经样品缓冲液处理,毛细管柱选择为直径50 μm,有效长度400 mm的涂层中性毛细管柱;柱温为40℃;缓冲溶液为柠檬酸缓冲液(pH为3.0±0.2);工作电压为21 kV;检测波长为214nm;进样时间为5s,进行检测.结果乳铁蛋白平均回收率为75%～91%;相对标准偏差(RSD)为1.1%～2.8%;最低检出限位0.003mg/mL.该方法简便,准确,灵敏度高,能快速检测乳品中乳铁蛋白含量.     

利用毛细管电泳法测定乳品中乳铁蛋白方法的研究

将样品经样品缓冲液处理,毛细管柱选择为直径50μm、有效长度400mm的涂层中性毛细管柱;柱温为40℃;缓冲溶液为柠檬酸缓冲液(pH为3.0±0.2);工作电压为21kV;检测波长为214nm;进样时间为5s,进行检测。结果乳铁蛋白平均回收率为75%～91%;相对标准偏差(RSD)为1.1%～2.8%;最低检出限为0.003mg/mL。该方法简便,准确,灵敏度高,是快速检测乳品中乳铁蛋白含量的最适合的分析方法。      

一种利用毛细管电泳间接测定生鲜乳中添加大豆分离蛋白的方法

运用高效区带毛细管电泳法以pH2.7浓度配制为15mmol/L柠檬酸-20mmol/L柠檬酸三钠作电泳缓冲液同时测定了生鲜乳蛋白和大豆分离蛋白。结果显示β-CN峰面积和迁移时间的相对标准偏差(RSD)分别为3.01%和0.62%,κ-CN峰面积和迁移时间的RSD分别为2.03%和0.49%,大豆分离蛋白峰面积和迁移时间的RSD分别小于5.12%和0.48%,均满足定性和定量分析的要求。建立了利用蛋白峰面积比例关系间接测定生鲜乳中大豆分离蛋白的分析方法,其中β-CN和κ-CN检测限分别为0.17mg/L和0.23mg/L,回收率为99.37%和99.23%,大豆分离蛋白检测限和回收率分别为5.73mg/L和87.44%.     

高效毛细管电泳测定液态乳中乳糖

针对常用乳糖测定方法存在的局限性和不便性,结合高效毛细管电泳(HPCE)法简单快速、高效低耗的特点,探索出了高效毛细管电泳仪配合紫外检测器测定乳糖的实验条件:熔融石英毛细管(50μm×34 cm);缓冲液为50 mmol/L硼砂/NaOH,pH值为10.0;电泳为10 kV,温度为60℃;检测波长为195 nm;进样为5000 Pa;时间3 s。此方法操作简便、准确度高、精密度好。该方法的测定结果与高效液相色谱法的结果较一致,样品中其他糖类对该方法不存在干扰,克服了莱因-埃农氏法测定乳糖不具专一性的缺点。     

利用毛细管电泳法测定乳品中β-乳球蛋白含量的研究

目的用毛细管电泳技术检测乳品中β-乳球蛋白含量。方法将样品经缓冲液处理,选择直径为70μm,有效长度600mm的未涂层石英毛细管柱;柱温为40℃;缓冲溶液为柠檬酸缓冲液(pH为3.0±0.2);工作电压为27kV;检测波长为214nm;进样时间为5s,进行检测。结果β-乳球蛋白回收率为75.2%～105.2%,相对标准偏差(RSD)为1.09%～3.10%;最低检出限为0.001mg/ml。结论该方法简便、准确、灵敏度高,是快速检测乳品中β-乳球蛋白含量较适合的分析方法。     

3种电泳方法定量分析牛奶蛋白的比较

通过实验比较了毛细管区带电泳（CZE），毛细管凝胶电泳（CGE）及聚丙烯酰胺平板凝胶电泳（SDS-PAGE）在分离、定量牛奶蛋白上的效果比较。结果表明，在分离的效果及重现性上，CZE，尤其是用带有聚乙烯醇（PVA）涂层的毛细管，酸性的电泳缓冲液和低离子强度的样品缓冲液要优于其他方法，可用于快速分离、定量牛奶蛋白。     

高效毛细管电泳检测植物蛋白食品中的特征蛋白质

植物蛋白广泛应用于食品加工中,相关食品标准迫切需要建立蛋白质定性、定量的检测方法保证食品质量和安全。采用高效毛细管电泳法,对4 种样品中的蛋白质进行检测,并利用指纹图谱软件对样品中所含蛋白种类进行比对,找出同类样品中共有特征峰,以及对不同植物蛋白互相掺假谱图进行比对,通过特征峰及保留时间对掺假物质进行鉴别,为植物蛋白掺假鉴别实验提供科学依据。     

Matrix Solid-Phase Dispersion Extraction and Capillary Electrophoresis Determination of Tetracycline Residues in Milk

A capillary zone electrophoresis method was proposed for simultaneous detection and quantification of three tetracycline antibiotics in commercial milk samples, i.e., tetracycline, oxytetracycline, and doxycycline. The influences of the electrolyte composition, pH, as well as temperature and applied voltage on separation were investigated. The optimal running buffer was 30 mM Na₂HPO₄ and 1 mM EDTA at pH 11.5, with 3 s hydrodynamic injection, 25 kV applied voltage, and UV detection at 268 nm. Matrix solid-phase dispersion procedure was used for sample pretreatment. Several solid support materials were investigated, and silica with bonded C₁₈ chains (C₁₈) was used as sorbent. Electrophoretic analysis was completed in less than 6 min, with LODs ranging from 0.0745 μg/mL for oxytetracycline to 0.0808 μg/mL for doxycycline. The recoveries obtained were between 93.4% and 102%.     

高效毛细管电泳法测定奶制品中三聚氰胺含量

目的：建立奶制品中三聚氰胺的含量测定方法。方法：采用高效毛细管电泳法测定,以30mmol/L 磷酸盐缓冲液(pH5.0)为电泳介质,未涂层石英毛细管(75μm× 78cm,有效长度70cm)为分离通道,紫外检测波长240nm,分离电压10kV。结果：三聚氰胺在10.0～50.0μg/mL 范围内线性关系良好,r=0.9992。平均加标回收率为97.04%,平均RSD 为1.24%(n=3)。结论：该方法快速简便、灵敏度高、重现性好,可用于奶制品中三聚氰胺含量的测定。     

HPCE法同时检测果蔬及肉制品中硝酸盐和亚硝酸盐含量

为了能够同时、快速检测果蔬及肉制品中的硝酸盐和亚硝酸盐,利用高效毛细管电泳对其进行检测,重点研究检测条件的筛选和干扰离子的排除。使用内径50?μm、总长40?cm、有效长度30?cm的毛细管柱,在214?nm条件下,采用毛细管区带电泳-直接紫外法,研究分离缓冲液的pH值、浓度、电渗流改性剂十六烷基三甲基溴化铵的添加量、排除Cl－干扰方式以及分离电压对分离效果的影响,同时进行方法学检验,以确定其回收率、线性、检出限和精密度。结果表明：对于含盐量500?mmol/L以下的样品在6?min内NO3－和NO2－能够达到很好分离,该方法的加标回收率在81.82%～100.91%之间,线性范围较宽,相关系数均在0.99以上,检出限分别为0.69?μg/mL和0.50?μg/mL,精密度均不高于3.2%,具有简便、快速、准确、环保等优点,也为生产中快速监控硝酸盐和亚硝酸盐残留量提供了科学依据。     

毛细管电泳在牛乳中酪蛋白含量测定及掺假检测方面的应用

运用毛细管电泳技术可以快速分析牛乳中的蛋白组分 ,检测牛乳中添加杂蛋白的掺假情况。实验中获得了原料乳、巴氏乳和超高温乳的毛细管区带电泳图谱 ,通过 32KaratSoftware软件计算了乳中酪蛋白的含量 ,检测了乳粉中添加大豆蛋白的毛细管凝胶电泳图谱。该方法具有快速、高效、样品用量少、经济等优点。     

双向电泳技术鉴别牛羊乳品真实性

采用双向电泳技术对牛羊乳品的蛋白质指纹进行分析。首先通过全乳图谱分析牛羊乳的差异蛋白,然后针对婴幼儿配方粉、乳清粉等开展方法特异性研究,通过婴幼儿配方粉添加实验开展方法灵敏度研究,最后对市售配方粉、液态乳、酸乳等进行检测。总体上,双向电泳技术信息丰度高,信息直观,重复性良好,能准确分辨牛羊乳及乳清,灵敏度达到5%。通过检测,8 份市售样品中有1 份酸羊乳实际为牛乳,图谱蛋白指纹信息清晰,直观反映产品真实性。     

Capillary Zone Electrophoresis of Fish Muscle Sarcoplasmic Proteins

A capillary zone electrophoresis (CZE) method for rapid separation of fish muscle sarcoplasmic proteins (SAJR) was developed using a highionic-strength phosphate buffer and an untreated, fused silica capillary (20 μm i.d. X 20 cm). Changes in pH between 6.6-7.5 resulted in differences in mobility, separation factors, and number of SAR moieties. An optimal SAR profile was obtained at pH 7.4. When used to monitor frozen storage changes in SAR from cod (Atlantic, Ling, Pacific) and pollock fillets, the procedure indicated both species differences and low-and high- molecular-weight frozen storage changes. CZE is an effective screening/quantification alternative to conventional electrophoresis and/ or HPLC because it is fast (<10 min), simple, sensitive, precise, and readily automated.     

毛细管电泳测定乳酸发酵液中有机酸

运用毛细管区带电泳模式,在磷酸缓冲液中成功地分离了苹果酸、甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、草酸9种有机酸。研究了缓冲液浓度、pH值、电泳电压、检测波长等因素对分离的影响,并对实际发酵液进行分析测定,加标回收率为97.5%～107.1%。该方法简便、快速、准确,适于整个发酵过程条件的优化及发酵产物的监控工作。