多指标评价核桃蛋白及多肽的抗氧化活性

多指标评价药食两用核桃蛋白及多肽的抗氧化活性。利用DPPH·﹑O_2~-·﹑总还原能力和·OH 4种常用体外抗氧化活性模型,以谷胱甘肽(GSH)为对照,测定核桃蛋白及多肽抗氧化活性。在实验范围内,核桃蛋白及多肽的抗氧化活性与浓度呈量效关系,且核桃多肽对DPPH·和O_2~-·清除能力显著,抗氧化活性达到GSH的80%以上,对·OH清除能力亦达到GSH的50%以上。核桃蛋白及多肽均具有一定的抗氧化能力,且核桃多肽的抗氧化活性较蛋白更为显著。     

体外模拟消化芝麻蛋白产生多肽的抗氧化性分析

为证实芝麻蛋白在人体内消化可产生抗氧化肽,采用体外模拟消化芝麻蛋白,分析芝麻蛋白水解产生多肽的组成与抗氧化活性。结果显示:在体外模拟消化模型中,芝麻蛋白在1 h内丧失原有亚基结构,最终水解为相对分子质量在15 kDa以下的多肽;水解产生的多肽具有抗氧化性,其中胃蛋白酶水解产生的多肽具有较强的DPPH自由基清除能力,而胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的水解有助于提升多肽的ABTS自由基清除能力。上述结果表明,芝麻蛋白在人体内消化会产生抗氧化肽,不同消化阶段的芝麻多肽组成有差异,从而造成抗氧化活性的差别。     

杏鲍菇多肽的制备及体外活性研究

目的制备杏鲍菇多肽,并研究其体外活性。方法以杏鲍菇菇脚为原料,采用超声辅助的碱提酸沉法提取出杏鲍菇蛋白,比较3种蛋白酶酶解后的多肽得率,选定水解酶。基于单因素实验、正交实验确定多肽最优酶解工艺,并依托体外抗氧化活性实验实现对多肽体外活性的测定。结果杏鲍菇多肽液在分子量为5~10 kD、1~5 kD及低于1 kD的3种情况下均可成功还原铁离子,具备抗氧化能力,同时可清除·OH与DPPH·自由基,多肽溶液浓度越高、清除效果越好。结论本研究可充分利用杏鲍菇菇脚,形成高效的杏鲍菇蛋白提取、酶解以及多肽制备工艺,有助于进一步提升杏鲍菇的利用价值与经济效益,并且能够为多肽保健品的制备工艺研究提供重要借鉴意义。     

不同杀菌工艺对泥鳅多肽抗氧化活性的影响

研究了巴氏杀菌、煮沸灭菌和高压蒸汽灭菌3种杀菌工艺对泥鳅多肽抗氧化活性的影响.结果表明,泥鳅多肽经100℃/20 min煮沸灭菌和121℃/15 min高压蒸汽灭菌后,在420 nm处吸光值显著增大,且在此条件下能保持较高的氧自由基吸收能力(ORAC值);3种杀菌工艺均使泥鳅多肽清除DPPH自由基能力及还原力有所下降,其中高压蒸汽灭菌对其影响最小;而巴氏杀菌及高压蒸汽灭菌却使泥鳅多肽螯合Cu2+的能力有所提高.综合这4个指标可以得出:泥鳅多肽具有良好的耐热性,经高压蒸汽灭菌后能保持较强的抗氧化活性,这可能与其发生了美拉德反应有关.     

桃仁多肽的酶法制备及其抗氧化活性分析

以桃仁蛋白为原料,对响应面法优化多肽制备条件和酶解多肽各组分的抗氧化活性进行了研究。结果表明:以底物浓度3.5%、pH 10.4、加酶量4 200 U/g、酶解时间4.9 h条件下进行碱性蛋白酶酶解,可获得桃仁蛋白的最高水解度(61.12±0.7)%和多肽得率(67.91±0.5)%。桃仁蛋白及其酶解物的SDS-PAGE凝胶电泳图表明,酶解后的多肽分子质量大部分小于12 000 u。酶解液(PPH)及其超滤分离所得4组分分别采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、亚硝酸根离子清除能力和总抗氧化能力4个体外抗氧化活性测试,结果显示不同分子质量组分间的抗氧化活性存在显著性差异(P0.05),分子质量越小,其抗氧活性越强。RP-HPLC分析表明,抗氧化活性最强的P-IV组主要由9种具有一定疏水性的多肽组成。     

龙须菜ACE抑制肽的体外稳定性和抗氧化活性研究

以龙须菜为原料,通过酶解法制备分子量<1 kDa的龙须菜蛋白,分别以冷冻干燥和喷雾干燥收集多肽组分(GLP-F、GLP-S),研究其在体外环境的活性保留率和抗氧化能力。通过血管紧张素转化酶(Angiotensin Ⅰ converting enzyme, ACE)活性抑制、总抗氧化能力、DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力等实验测定多肽抗氧化能力及体外稳定性。结果表明,通过ACE抑制活性为指标,两多肽在ACE抑制活性均有较好的IC₅₀值(0.62、0.70 mg/mL),金属离子Zn2+和Cu2+促进两个多肽ACE活性的保留,Al3+、K+、Fe3+等离子均能较好保留两多肽的ACE抑制活性,Ca2+的加入则降低了多肽的ACE抑制活性。随着NaCl浓度的升高,GLP-F和GLP-S的ACE抑制活性降低;高糖浓度下GLP-F的ACE抑制活性较好保留,GLP-S的ACE抑制活性显著增加（P<0.05）。GLP-F在强酸强碱环境下ACE抑制活性略降低5%,GLP-S的ACE抑制活性不受酸碱pH环境的影响;在低于40 ℃的温度条件下,GLP-F和GLP-S的ACE抑制活性得到保留。在模拟体外胃肠消化系统可知:GLP-F为前体型抑制肽,GLP-S为真抑制型抑制肽。?20 ℃条件下两者活性都能保持稳定,而GLP-F在4 ℃贮藏至14 d活性保留降至40.67%。体外抗氧化试验表明,GLP-S在总抗氧化能力、DPPH·、·OH和O₂?·清除能力方面均优于GLP-F。因此,GLP-F多肽体外降血压活性稳定性上更优于较GLP-S,而GLP-S在抗氧化方面效用高于GLP-F,此为龙须菜多肽开发为天然降血压肽和抗氧化肽提供理论参考。     

青钱柳多糖抗氧化活性的研究

目的:研究青钱柳多糖的抗氧化活性.方法:采用水提醇沉方法,Sevage法除蛋白,用D301R型大孔树脂纯化制备多糖;通过Fenton体系,DPPH·两种分析方法测定体外清除自由基能力;用青钱柳多糖对高脂小鼠进行干预后,测定肝脏SOD、MDA、GSH-Px、NEFA的含量,以此评定其体内抗氧化功能.结果:青钱柳多糖对羟基自由基、DPPH自由基清除效果显著,并且清除DPPH的效果优于羟基自由基;体内实验显示:青钱柳多糖能显著提高肝脏SOD和GSH-Px的活性,降低肝脏MDA及NEFA的含量.结论:体内及体外实验都显示青钱柳多糖具有显著的抗氧化活性.     

不同分子质量米糠多肽的抗氧化活性

采用截留分子质量为10000、3000D超滤膜对碱性蛋白酶水解米糠蛋白的水解液进行分离,获得不同分子质量(Mw)的米糠多肽混合物组分,以6种抗氧化活性指标对米糠多肽混合物组分的抗氧化活性进行评价。结果表明:米糠多肽的抗氧化活性与蛋白分子质量大小密切相关。Mw>10kD的米糠多肽对.OH的清除能力最强,属于活性氧自由基清除的抗氧化机制;Mw3～10kD的米糠多肽对Fe3+螯合能力最强,属于金属离子螯合的抗氧化机制;Mw<3kD的米糠多肽对O-2.的清除能力、DPPH自由基的清除能力、ABTS+.清除能力和Fe3+还原能力最强,属于电子转移(SET)的抗氧化机制。不同分子质量的米糠多肽抗氧化活性随多肽质量浓度的增加而增加。     

乌骨鸡活性肽组成成分及体外抗氧化活性研究

本实验对乌骨鸡活性肽的蛋白质含量、多肽含量、游离氨基酸含量和多肽的分子量分布进行了研究,并通过测定乌骨鸡活性肽对Fenton反应产生的羟自由基、邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子的清除率,考察乌骨鸡活性肽的体外抗氧化能力。乌骨鸡活性肽组成分析表明:活性肽中蛋白质含量为90.53%,其中主要成分为小分子多肽(51.46%)和氨基酸(36.17%)。乌骨鸡活性肽分子量分布的凝胶色谱法测定结果显示其分子量集中在1900Da以下,其中小肽所占相对比例较大。体外抗氧化实验结果表明:乌骨鸡活性肽具有较强的清除羟自由基的能力,其清除率与浓度呈剂量关系;并能明显降低邻苯三酚自氧化速率,抑制率与浓度呈正相关,但与肌肽比较,乌骨鸡活性肽的体外抗氧化能力相对要弱。     

苦荞蛋白模拟消化产物抗氧化活性及组成研究

目的:通过体外模拟部分胃、肠道消化过程,考察苦荞蛋白经胃、肠道消化后生成肽的组成和抗氧化活性;揭示苦荞蛋白质体内消化与抗氧化活性的关系.方法:采用胃蛋白酶、胰蛋白酶,模拟人体胃、肠道消化过程酶解苦荞蛋白质,确定产生最强的抗氧化肽的时间;经凝胶分离,确定抗氧化肽分子质量范围.结果:苦荞蛋白质经模拟消化过程10 h产生最高抗氧化活性多肽,凝胶分离出5个组分,其中分子质量为900 Da的肽具有最强的抗氧化活性.     

麦苗中超氧化物歧化酶(SOD)抗氧化活性研究

本研究探讨麦苗中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)在动物体内和体外的抗氧化活性。体外抗氧化试验中将麦苗中经过提取、纯化、干燥制成的SOD成品经蒸馏水配制成溶液,分别采用DPPH·清除法、Fenton反应法和Fe~(3+)还原法测定其对DPPH和羟自由基的清除率及其还原能力。通过饲养昆明种小鼠,经口灌胃受试物SOD酶液以及生理盐水、番茄红素,考察丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(Catalase,CAT)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果表明,体外试验中SOD酶液具有良好的抗氧化能力,SOD(1 mg/mL)酶液在1 mL水平下对DPPH、羟基自由基的清除率分别可达到96.95%、98%,还原能力随剂量的增加呈递增趋势;体内试验中SOD剂量组与对照组相比,小鼠肝组织中MDA差异显著(P0.05),且各个剂量组下MDA含量都有减少。与对照组比较,SOD高剂量组能提高小鼠肝组织中GSH-Px和CAT活力(P0.05)。麦苗中SOD在体外和体内均表现出良好的抗氧化作用。     

松茸多糖的体外抗氧化性及对乙醇氧化损伤小鼠作用的研究

本文以超氧阴离子自由基（Superoxide anion radicals,O₂－ · ）、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（2,2'-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS）自由基清除能力、总还原能力为指标研究松茸多糖（Tricholoma matsutake polysaccharide,TMP）体外抗氧化能力;建立乙醇氧化损伤小鼠模型,通过测定小鼠血清中谷丙转氨酶（Alanine transaminase,ALT）、谷草转氨酶（Aspartate transaminase,AST）和碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,AKP）的活力以及肝脏中过氧化氢酶（Catalase,CAT）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）的水平研究松茸多糖的体内抗氧化活性。体外抗氧化结果表明,松茸多糖对超氧阴离子自由基和ABTS自由基有较好的清除能力,当浓度为1 mg/mL时,清除率分别为56.67%和96.60%,而松茸多糖的总还原能力较低,当浓度为1 mg/mL,吸光值为0.163;动物实验结果表明,连续灌胃四周后,与模型对照组相比,松茸多糖可以使小鼠血清中的ALT、AST和AKP活力显著降低（P<0.05）,使肝脏中CAT、SOD和GSH-Px的水平显著升高（P<0.05）,MDA的含量显著降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。研究表明松茸多糖有一定的抗氧化活性,可为松茸多糖的后续开发应用提供思路。     

辣木多肽对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化功能的影响

探讨辣木多肽(MOPP)对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影响。小鼠腹腔注射D-半乳糖(120mg/kg)建立衰老模型。建模成功后,分设正常组,D-半乳糖衰老组,维生素C组,MOPP低剂量(10 mg/kg)和高剂量(100 mg/kg)组。连续给药6周后,依试剂盒说明分别测定血清总抗氧化力(T-AOC),脑、心脏和肝脏及血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase,CAT),谷胱甘肽过氧化酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)和丙二醛(malondiadehycle,MDA)水平。q RT-PCR法测定肝内Mn-SOD、Gu/Zn-SOD和CAT的m RNA表达。与衰老对照组相比,MOPP能分别有效提高衰老小鼠血清T-AOC能力(至13.73～17.98U/m L),及血清SOD(8.04～11.65 U/mg protein)、CAT(4.56～6.45 U/mg protein)和GSH-Px(7.28～10.65 U/mg protein)活性,并显著提升脑、心脏及肝组织中抗氧化物酶(SOD、CAT、GSH-Px)活力(p0.05)。同时,高浓度MOPP还能使血清、脑、心脏和肝组织中MDA水平显著降低43.6%,44.7%,31.4%和56.0%(p0.05)。此外,MOPP干预还能增强肝脏中SOD、CAT和GSH-Px的m RNA转录。本研究结果提示MOPP能明显提高D-半乳糖致老龄小鼠体内的抗氧化状态。     

硒化米胚多糖的抗氧化性

采用醋酸和硝酸作为催化剂对米胚多糖进行硒化修饰,并对不同方法制备的硒化米胚多糖的抗氧化性进行研究。体外抗氧化活性研究:采用O_2~-·、·OH、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除实验以及还原力实验比较了米胚多糖(rice embryo polysaccharide,REP)、醋酸催化制备的硒化米胚多糖(selenium-containing rice embryo polysaccharide,Se-REP)1、硝酸催化制备的硒化米胚多糖(Se-REP2)抗氧化活性。体内抗氧化活性研究:主要考察米胚多糖及两种制备方法所得的硒化米胚多糖法体内抗氧化能力,测定小鼠血清、肝脏、肾脏、心脏组织中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)。结果表明:REP、Se-REP1、Se-REP2的5个不同浓度对O_2~-·、·OH、DPPH自由基清均有不同程度的清除能力,其还原力随浓度的增加而增强。体内抗氧化活性研究发现:Se-REP1、Se-REP2可提高组织及血清中SOD、GSH-Px活力及T-AOC,且作用效果均强于REP,但在心脏中T-AOC的提高不显著。MDA含量在肝脏及肾脏中虽低于空白对照组,但效果不显著,而在血清和心脏中表现出较强的显著性,Se-REP2组的抗氧化酶活力最高。     

传统明目中药材复配对视网膜损伤小鼠抗氧化的影响

目的探讨各复配组方对视网膜损伤小鼠的影响。方法将小鼠分为正常对照组、模型组、熟地黄+枸杞子组、熟地黄+菊花组、熟地黄+铁皮石斛组、熟地黄+枸杞子+菊花组共6组,分别对小鼠连续干预8周后进行强光造模,光照结束后用采集晶状体及肝脏组织进行抗氧化的指标检测。观察晶状体中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),肝组织中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、及GSH-Px的活力。结果模型组晶状体GSH-Px与T-AOC值均显著低于正常对照组(P0.05);各复配组GSH-Px和T-AOC值与模型组比较均显著升高(P0.05)。在肝脏抗氧化指标中,模型组与正常组比较,MDA含量升高,SOD活力、CAT活力和GSH-Px活力下降;与模型组比较,各复配组均可降低MDA含量,升高SOD活力、CAT活力和GSH-Px活力,且均具有显著性差异(P0.05)。结论各复配组均对光损伤造成的氧化损伤具有缓解作用。     

黑豆多肽对超负荷训练小鼠肝细胞损伤影响的研究

为探究黑豆多肽对超负荷运动小鼠肝脏细胞的保护机制,实验以黑豆为原料采用酶解法联合超滤萃取法制取了分子量区间分别为<3、3~5、5~10 kDa的黑豆多肽,以上述黑豆多肽饲喂小鼠并建立超负荷运动模型,以探究不同分子量区间黑豆多肽对运动性肝细胞损伤的保护作用。结果显示:经超负荷训练后模型组小鼠肝功能出现异常,表现为肝指数水平上升,血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性下降,而饲喂黑豆多肽的剂量组肝功能得到了不同程度缓解;实验进一步对肝脏组织T-SOD、GSH-Px酶活测定的数据分析得出,黑豆多肽通过提高抗氧化物酶的活性从而降低机体氧化应激水平,达到抗过氧化损伤的功效并表现为MDA含量显著下降;为明晰黑豆多肽对小鼠肝脏细胞的保护机制,对血清中TNF-α含量以及NF-κB相对表达量进行了测定,其中分子量<3 kDa能够显著降低血清TNF-α的分泌以及NF-κB的相对表达量。结论:黑豆多肽能够有效缓解由超负荷运动导致的肝脏功能异常,并提高抗氧化物酶活性,减弱肝脏氧化应激水平,降低TNF-α的释放以及NF-κB的表达,从而防止由过氧化损伤致使细胞膜裂变而引起的肝细胞损伤。     

植酸的体内抗氧化活性研究

将Specific pathogen free(SPF)级昆明小鼠随机分为药物组和正常对照组,分别灌胃植酸和生理盐水,30 d后经眼球职血和颈椎脱臼法处死,制取血清和肝组织匀浆,并测定其中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA...     

灵芝发酵小麦的营养特性与抗氧化能力

采用灵芝对小麦进行固态发酵,并对发酵前后小麦的营养成分和抗氧化能力进行了测定与比较。结果表明,小麦发酵后,蛋白质、粗脂肪、总可溶性物质、可溶性蛋白和可溶性糖的质量分数分别比发酵前提高8.1%、14.9%、837%、197%和537%,氨基酸组成与矿物质含量也发生了改变。小麦发酵后抗氧化能力显著提高。灵芝发酵小麦水提物的DPPH·清除能力、羟基自由基清除率、铁氰化钾还原力和超氧阴离子自由基清除率均显著高于小麦水提物(P 0.05)。灌胃灵芝发酵小麦水提物,可以提高D-半乳糖致衰小鼠血清和肝脏中的SOD、GSH-Px等抗氧化酶活力,降低MDA含量,说明灵芝发酵小麦可提高小鼠对氧自由基的抵抗能力,降低氧自由基过氧化损伤,延缓D-半乳糖的致衰作用。     

美拉德反应对金带细鲹鱼肉蛋白酶解物体内抗氧化性的影响

本文研究了金带细鲹鱼肉蛋白酶解物及其美拉德反应修饰物在动物体内的抗氧化性,通过检测灌胃30 d的对照组和各剂量组小鼠血清和肝脏中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)含量等指标的变化来研究修饰产物在动物体内的抗氧化活性。结果表明:酶解物及其美拉德反应修饰产物均能降低小鼠血清和肝脏中MDA的形成,增加小鼠血清及肝脏中SOD、GSH-Px的活力和GSH的含量,尤其是高剂量组的抗氧化效果明显,抗氧化活性随剂量的增加而增强,美拉德反应修饰产物能够显著增强小鼠血清及肝脏中SOD、GSH-Px的活力和GSH的含量(p0.05)。这表明,美拉德修饰反应可提高金带细鲹鱼肉蛋白酶解物在小鼠体内的抗氧化活性,修饰产物在小鼠体内的抗氧化性可能与其清除自由基能力有关。     

鹿皮胶多糖对酒精性肝损伤的保护作用

目的:探究鹿皮胶多糖对急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:采用浸提法提取鹿皮胶粗多糖,使用柱色谱分离纯化得到鹿皮胶纯多糖,应用柱色谱、红外光谱及理化学反应实验对其理化性质进行鉴定。通过测定小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶 (ALT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量及肝匀浆上清液中GSH-Px、SOD活性和MDA含量,观察小鼠肝组织切片,以探究其对急性酒精性肝损伤的保护作用。结果:鹿皮胶多糖属于吡喃糖结构的酸性多糖,其形态为白色絮状,分子量为41.2 kDa,含量达86.71%,无淀粉、酚类、蛋白质、氨基酸及还原糖残基。动物实验结果显示,与模型组比较,鹿皮胶多糖中、高剂量组可显著提高小鼠血清中SOD、GSH-Px活性(P<0.05),降低ALT、AST活性和MDA含量(P<0.05);同时可显著提高肝组织匀浆上清液中SOD、GSH-Px活性(P<0.05),显著降低MDA含量(P<0.05)。结论:鹿皮胶多糖对急性酒精性肝损伤小鼠表现出明显的保护作用。