阴离子交换树脂固定化果糖基转移酶的研究

从13种离子交换树脂和吸附树脂中,筛选出固定化效果较好的大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂D380为载体,以戊二醛为交联剂,通过先吸附后交联的方法对果糖基转移酶的固定化进行分析,并对固定化条件进行了优化。结果表明,最佳固定化条件为:加酶量为200U/g树脂,吸附pH为6.0,吸附时间为6h,吸附温度为30℃,交联剂戊二醛浓度为0.01%,交联时间为6h,交联温度为4℃,固定化酶活回收率最高可达87.6%以上。      

阴离子交换树脂固定化果糖基转移酶的研究

从13种离子交换树脂和吸附树脂中,筛选出固定化效果较好的大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂D380为载体,以戊二醛为交联剂,通过先吸附后交联的方法对果糖基转移酶的固定化进行分析,并对固定化条件进行了优化。结果表明,最佳固定化条件为:加酶量为200U/g树脂,吸附pH为6.0,吸附时间为6h,吸附温度为30℃,交联剂戊二醛浓度为0.01%,交联时间为6h,交联温度为4℃,固定化酶活回收率最高可达87.6%以上。     

黑曲霉VVTP84生产果糖转移酶

从产果糖转移酶的 11株菌株中筛选出一株黑曲霉VVTP84菌 .该菌株在含蔗糖的培养基中 ,最佳摇瓶发酵时间为 30h ,pH值为 7.0 ;当蔗糖质量浓度在 2 5 0g/L以内时 ,产酶与蔗糖质量浓度呈正相关 ;MgSO4 ·7H2 O和KH2 PO4 的添加量分别以控制在 1.5 g/L和 1.0 g/L为宜     

黑曲霉AS0023果糖转移酶和转化酶的酶学特性

研究了从黑曲霉AS0 0 2 3分离和纯化的果糖转移酶 (FTS)和转化酶 (INV)的酶学特性 .FTS专一催化果糖转移反应 ,INV专一催化水解反应 ;FTS和INV的最适 pH和温度分别是 5.8和 50℃ ,4 .4和 55℃ ;用 1mmol/L的Hg2 处理 ,FTS完全失活而INV仍维持 72 %的活性 ;这两种酶的酶动力学常数明显不同 ,以蔗糖为底物时 ,FTS和INV的Km 值分别为 4 4 .3 8mmol/L和 3 5.67mmol/L ;果糖是FTS和INV的竞争性抑制剂 ,其Ki 值分别为 3 5.4 4mmol/L和 1 0 5mmol/L ,而葡萄糖只是FTS的竞争性抑制剂 .     

黑曲霉AS0023果糖转移酶和转化酶催化特性的研究

研究了在不同蔗糖浓度下从黑曲霉AS0 0 2 3纯化的转化酶 (INV)和果糖转移酶 (FTS)的酶催化活力 ,结果表明 :INV只有水解活性 ,且随着蔗糖浓度的增加酶活力显著下降 ,相反 ,FTS酶活随着蔗糖浓度的增加而增加 ,并且仅催化转果糖基反应 ;用纯化的FTS生产低聚果糖产量可达 6 3% ,应用粗酶制品产量只有 51%。     

低聚果糖制备的研究进展

对近年来国内外生产低聚果糖所用的酶和产酶菌种 ,酶、细胞和菌丝体的固定化技术 ,固定化载体及高纯度低聚果糖制备的研究进展进行了综述 .在此基础上指出 :在低聚果糖的制备过程中 ,主要应考虑降低生产低聚果糖时的葡萄糖生成量、寻找高酶活力菌株、研究简便的固定化方法、寻找更加适宜且廉价的固定化载体 .     

低聚果糖合成酶──果糖转移酶的部分酶学性质研究

研究从土壤中筛选得到的黑曲霉ＡＳ００２３菌株所产的β－果糖转移酶的一些酶学性质。该酶的最适ｐＨ为５．０,最适温度为５０℃,有较好的热稳定性和较宽的ｐＨ（３．５～１０）适宜范围;并研究了１２种化学物质对酶活的影响和底物的特异性。结果显示,钴离子对该酶有一定的激活作用;底物分子越大其反应速度越慢。该酶的米氏常数Ｋ＿ｍ＝４７ｍｍｏｌ,葡萄糖是酶反应的竞争性抑制剂,其Ｋ＿ｉ＝３３０ｍｍｏｌ．当５０％（Ｗ／ｖ）蔗糖与酶在ｐＨ５．０和５０℃作用１６ｈ时,得到５２％（产物／总糖）低聚果糖。     

环保型离子交换树脂再生新技术

提出一种新的离子交换剂再生理论，即吸附物的脱附依靠离子交换和络合的协同效应完成。以二价钙离子为再生剂，对糖液脱色用的阴离子交换树脂和阴离子交换纤维进行再生，并与传统的碱性钠盐相比较，提出新的树脂再生理论。再生试剂和再生用水100％回收，使用国产树脂中间试验的白糖色值降低75％以上，产业化应用白糖色值平均降低50％，再生成本降低70％。实践证明该技术经济、可行、具有低成本、无污染的特点。     

果糖基转移酶的固定化及其性质研究

果糖基转移酶的固定化可以很方便地实现酶的回收和再利用。以HPA25L树脂为固定化载体,对果糖基转移酶进行了固定化初步研究。结果表明,其最优固定化条件为:采用先交联后固定化方法,以戊二醛为交联剂,固定化温度20℃,pH5.0,加酶量10mL/g树脂,戊二醛浓度为0.15%,得到固定化酶酶活达120U/g,酶活回收率达81%,其最适反应温度和pH分别为55℃和7.0,利用固定化酶连续反应12个批次后,酶活仍然保留达20%以上。      

雪莲果低聚果糖粗提液的脱色工艺的研究

采用树脂脱色法对低聚果糖粗提取液进行脱色处理,试验结果表明,201×7(717)强碱性阴离子交换树脂对雪莲果低聚果糖提取液中色素的脱除效果最好.最佳脱色条件:上柱流速2mL/min,吸附温度30℃,低聚果糖浓度1.72%.在最佳条件下进行验证试验,脱色率可达90.8%.     

利用酵母提高低聚果糖纯度

将黑曲霉AS0023生产的果糖转移酶作用于底物蔗糖,可制备含量为55%的低聚果糖,但该产品中亦含有30%的副产物葡萄糖.利用酵母消化低聚果糖产品中的葡萄糖,可生产高纯度低聚果糖.将筛选得到具有较弱转化酶活性的酵母SK2.003,经培养后添加于总糖浓度为20%的低聚果糖中,经30℃、250r/min反应24h,制得纯度为80.24%的低聚果糖.     

油莎豆水溶性糖提取工艺及生物转化低聚果糖的研究

以油莎豆粕为原料,分离碳水化合物后采用酶法制备低聚果糖。结果表明,超声时间、提取温度和提取时间对提取效果的影响均呈显著水平且影响程度依次递减。优化工艺条件经调整为超声时间16 min、提取温度75℃、提取时间3 h,在此优化条件下具有较高的提取率(52.61±0.51)%。纯化工艺创新性的使用了等电点沉淀法与膜分离技术相结合对油莎豆粕水溶性糖进行脱蛋白,蛋白质清除率达到了51.35%,糖保留率为64.91%。利用果糖基转移酶转化生产低聚果糖,质量分数达到30.25%。     

蔗果低聚糖的研究和生产应用

蔗果低聚糖是一类天然存在的碳水化合物。研究证明蔗果低聚糖在消化道不被破坏而直达大肠被双歧杆菌等有益菌群选择性利用 ,从而对人体健康产生有益的作用。利用果糖基转移酶 ,可以从蔗糖工业化规模地生产蔗果低聚糖 ,本文对其合成的酶学研究、酶制剂、生产工艺、产品的应用和市场开发等方面进行了综述。     

利用弱碱性阴离子交换树脂从脱脂米糠中制取植酸的研究

以脱脂米糠为原料,通过酸浸、离子交换吸附、洗脱、精制、浓缩过程利用D318型弱碱性阴离子交换树脂制得植酸。试验结果表明,D318型阴离子交换树脂从脱脂米糠植酸粗溶液中吸脱植酸的最佳工艺条件为:吸附液浓度为10 mg/ml,吸附液流速为1.0 ml/min,NaOH洗脱液的流速为2.0 ml/min,NaOH洗脱液浓度为1.5 mol/L,操作温度为45℃,pH值为2.5左右。