SYBR Green实时荧光PCR检测食品中鲨鱼源性成分真实性方法的建立

为确保鲨鱼产品的真实性,作者研究建立了食品中鲨鱼源性成分的SYBR Green实时荧光PCR鉴定方法.运用建立的SYBR Green实时荧光PCR方法对9种鲨鱼及48种常见非鲨鱼类动植物样品进行检测,9种鲨鱼样品均出现扩增曲线,且熔解曲线在(84±1.5)℃内出现峰值;其他非鲨鱼样品中均未出现扩增曲线,熔解曲线在(84±1.5)℃也未出现峰值.该检测方法的检测限为0.0001 ng/μL鲨鱼DNA和质量分数0.01％狗鲨肉粉.运用建立的方法对20种常见的鲨鱼产品进行PCR检测,除仿鱼翅和鲨鱼肝油外所有产品中均能检测出鲨鱼成分.结果表明,该检测方法特异性强,灵敏度高,能够用于食品中鲨鱼源性成分的真实性鉴别.     

Taqman探针荧光PCR检测鲨鱼源性成分

针对鲨鱼产品掺杂造假增多而缺乏有效鉴定技术的情况,作者根据Gen Bank中鲨鱼基因的线粒体DNA(mt DNA)序列,使用分子生物学软件Primer Express 2.0设计了一套特异性引物和探针,用来建立Taqman探针荧光PCR检测鲨鱼源性成分的方法。结果表明,对13份已鉴定为鲨鱼鱼翅的样品进行检测,全部出现特异性扩增曲线,阴性对照没有荧光增长。方法特异性强,对市场购买的12份鲨鱼源性样品及9份其他鱼类样品进行检测,12份鲨鱼样品均出现荧光扩增曲线,而非鲨鱼样品均未出现荧光增长;方法灵敏度较高,可检测到的最低质粒拷贝数量级为10拷贝/μL;方法快速准确,操作简便,重复性好,稳定可靠,可应用于市场上鱼翅等常见鲨鱼源性产品的真假鉴定。     

鸡精调味料中鸡源性成分真实性鉴别研究

研究建立鸡精调味料中鸡源性成分的PCR检测方法,该方法特异、灵敏,检测限为0.1%。运用建立的方法对市场上的7个鸡精样品和2个鸡味调味料样品进行检测,在4个名牌鸡精样品中检出鸡源性成分,而在其它3个鸡精样品和2个鸡味调味料中未检出鸡源性成分。该检测方法能够用于鸡精调味料中鸡源性成分真实性鉴别。     

食品中若干植物源性成分的PCR检测

采用CTAB法提取豆奶粉、马铃薯、玉米、番茄及其制品样品中的总DNA,通过PCR方法检测大豆lectin、马铃薯patatin、玉米IVR、番茄PG等特异性内源基因,判断食品中是否含有大豆、马铃薯、玉米、番茄等植物源性成分。同时还进行了这些内源基因分别与核糖体18SrDNA或叶绿体rbcL基因之间的二重PCR分析。结果表明单PCR与二重PCR分析方法可靠稳定,可应用于食品中的植物源性成分的鉴定。     

鱼翅制品中鲨鱼源性成分的实时荧光PCR检测方法Key words:

本研究通过鲨鱼线粒体基因组的部分序列,设计了鲨鱼的特异性引物和探针,建立了鱼翅制品中鲨鱼源性成分检测的一种新方法,据此可鉴别鱼翅制品的品质。通过物种特异性实验和灵敏度测试,表明所设计的引物和探针具有较好的物种特异性,所建立的方法具有较高的灵敏度：DNA浓度的检测灵敏度可达0.01 ng/?L,重量检测灵敏度可达0.1%（m/m）。采用该方法并结合植物源性基因检测方法对市场上随机抽取的25份鱼翅制品进行检测,其中18份样品检出鲨鱼源性成分而未检出植物源性成分,7份样品未检出鲨鱼源性成分而检出植物源性成分,表明这7份样品不是真鱼翅制品,而是采用了植物成分仿制而成。本研究所建立的方法快速、灵敏、简单,适用于市场上鱼翅制品中鲨鱼源性成分的快速检测。     

海狸鼠源性成分的PCR鉴别研究

以海狸鼠和其他物种的细胞色素b基因为目标基因,通过序列比对在碱基差异明显的区域设计海狸鼠的特异性引物,并通过退火温度、反应循环数、方法检出限和特异性等参数的考察建立海狸鼠源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴别方法.结果显示:该PCR方法对海狸鼠能够扩增出约599 bp...     

食品中鱼源性成分PCR的检测方法

研究建立了食品中鱼源性成分的普通PCR检测方法,该方法特异、灵敏。应用鱼源性引物对35种鱼类、24种非鱼类动物和10种植物样品进行PCR检测,只在35种鱼类中出现224bp特异扩增条带,在其他的非鱼类动植物DNA中未出现扩增条带,实验表明,该PCR检测方法具有特异性。该检测方法的检测限为0.1ngDNA和0.1%(W/W)。运用建立的方法对市场上的80个不同类别的食品样品进行检测,其中有13个样品错误标识了鱼源性成分。该检测方法能够用于食品中鱼源性成分的鉴别。     

动物源性食品PCR检测方法的应用研究

动物源性食品的成分检测已成为当前食品质量检测工作的一个重要环节,PCR检测方法在该检测中得到了较为广泛的应用.基于此,本文对PCR在动物源性食品检测中的应用进行了探讨,通过对市售多种肉制品进行PCR检测实验,对PCR检测方法的流程和要点进行详细阐述,以期为今后的相关检测工作提供参考.     

荧光定量PCR方法鉴别肉制品中羊源性成分

根据羊线粒体DNA细胞色素b基因序列,设计特异性引物和Taqman探针。通过反应条件的优化筛选,构建标准曲线,建立灵敏、可靠的肉制品中羊源性成分的实时荧光PCR鉴别方法。结果表明,所设计的引物可有效地进行肉制品中羊肉成分的鉴别,特异性强,灵敏度高达16pg/μL;标准曲线扩增效率达98.561%,R2=1,符合《实时荧光定量国际化标准-MIQE指南》要求;本研究建立的方法检测结果与国标GB/T 20190-2006方法结果符合率达100%,且不需电泳、酶切和测序等步骤。通过对市售肉制品样本的鉴别验证了方法的实用价值,为肉制品质量的有效控制提供了新的途径。      

荧光定量PCR方法鉴别肉制品中羊源性成分

根据羊线粒体DNA细胞色素b基因序列,设计特异性引物和Taqman探针。通过反应条件的优化筛选,构建标准曲线,建立灵敏、可靠的肉制品中羊源性成分的实时荧光PCR鉴别方法。结果表明,所设计的引物可有效地进行肉制品中羊肉成分的鉴别,特异性强,灵敏度高达16pg/μL;标准曲线扩增效率达98.561%,R2=1,符合《实时荧光定量国际化标准-MIQE指南》要求;本研究建立的方法检测结果与国标GB/T 20190-2006方法结果符合率达100%,且不需电泳、酶切和测序等步骤。通过对市售肉制品样本的鉴别验证了方法的实用价值,为肉制品质量的有效控制提供了新的途径。     

保健品中牛羊源性成分的PCR检测

本文根据牛、羊线粒体mtDNA中的保守序列,设计了针对牛羊源性成分检测的特异性扩增引物,通过聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction,PCR)建立了保健品中牛羊源性成分的快速检测方法。通过内切酶DpnⅡ和SspⅠ可分别对牛羊成分的扩增结果进行进一步验证,该方法对牛源性成分的检测低限为0．05％,对山羊和绵羊源性成分的检测低限分别为0．005％和和0．5％,可作为保健品中牛羊源性成分检测有效方法,也可作为保健品及动物源性产品中成分真伪鉴别的准确、可靠方法。     

食品和饲料中火鸡源性成分的实时荧光PCR检测方法

为对产品真实性提供技术支撑,作者建立了食品和饲料中火鸡源性成分的检测方法。采用TaqMan探针实时荧光PCR方法,对火鸡源性成分特异性、灵敏度进行检测并进行实际应用。实验表明,建立的检测方法具有特异性和高灵敏度,检测限为0.001%。通过对市售食品和饲料样品的检测,建立的方法适用于食品和饲料中火鸡源性成分的检测。     

实时荧光PCR方法在食品真伪辨别中的应用

实时荧光PCR技术以其特异性、灵敏性、简便、快速的优点,广泛应用于食品鉴伪检测。本文阐述了实时荧光PCR的原理以及其在肉制品、高价值食品、乳制品、果汁、水产品和油脂鉴伪检测方面的应用情况。      

鲨鱼肉猫用食品的试制

主要研究了鲨鱼肉猫用食品制作工艺,通过多种试验确定了最佳生产工艺和配方,并对产品烘干和添加剂的选择进行了讨论。