食品中沙门氏菌检测方法研究进展

沙门氏菌病是一种在自然界广泛存在的人畜共患病,可以引起人类败血症、胃肠炎等疾病,还能导致动物伤寒、副伤寒,严重者会危及人、畜的生命。因此,建立沙门氏菌的快速检测方法对预防和控制沙门氏菌感染至关重要。目前沙门氏菌的检测技术有传统培养法、免疫学检测技术、分子生物学检测技术和近年来发展起来的如生物传感器检测技术、纳米技术、基于适配体检测技术等新型技术。该文总结了沙门氏菌各种检测方法的原理、优点和缺点及研究情况,并对沙门氏菌的检测方法及应用前景进行了展望。     

食品中沙门氏菌检测现状分析

随着社会的发展,人们的生活水平在不断提升,其对于相关食品的需求也在逐渐提高,食品可以提升人们的生活舒适度。如果食品存在有关问题,会直接导致人们出现身体疾病,因此,要保证食品的安全和卫生。目前的食品检测中沙门氏菌是较为严重的致病细菌之一,所以,需要对食品进行沙门氏菌检测,检测方法主要为传统方法、ELISA法、免疫荧光标记法、PCR法、电阻抗测定法以及生物发光法等,全面对其进行系统化分析,可为食品中沙门氏菌的检测提供依据。     

IQ-Check Salmonella II Kit方法对食品中沙门氏菌检测的评价

通过对标准菌株和人工污染沙门氏菌的食品样品进行检测,评价IQ-Check Salmonella Ⅱ试剂盒方法。该研究采用试剂盒方法对50株不同血清型的沙门氏菌和50株非沙门氏菌进行检测,分析该方法的灵敏性和特异性;通过对人工污染沙门氏菌食品样品(包括液体奶、婴幼儿配方乳粉、肉及肉类制品)的检测,评价试剂盒方法与GB 4789.4-2016方法的一致性。实验结果表明:当菌浓度在10³ CFU/mL及以上,试剂盒方法对50株沙门氏菌实现全部检出,其对不同血清型沙门氏菌检出限的平均值为6.98×10² CFU/mL。试剂盒方法对50株非沙门检测结果均为阴性,说明试剂盒特异性较好。试剂盒方法与GB方法对人工污染沙门氏菌的食品样品阳性检出率分别为98.77%(161/163)和96.32%(157/163);相对准确度为:96%、99%、97%,总体准确度为97.33%;相对灵敏度为:96.22%、100%、100%,总体灵敏度为98.73%;相对特异性为:95.74%、98.15%、92.86%,总体特异性为95.80%。参照ISO 16140进行方法一致性分析,结果表明两方法在统计学上无显著性差异。该研究表明该试剂盒方法具有高灵敏性和特异性强的特点,在人工染菌食品样品检测中与GB方法呈高度一致性,值得在食品沙门氏菌快速检测中推广应用。     

电阻抗法检测食品中沙门氏菌

介绍电阻抗法快速检测食品中沙门氏菌方法,通过对沙门氏菌选择培养基四硫磺酸盐煌绿增菌培养基（TTB）的改进,加入氧化三甲氨以增加培养基的电阻抗变化灵敏度,连续检测沙门氏菌代谢所引起培养基的电阻抗变化值,通过培养机电阻抗的百分比判定沙门氏菌的存在。经与常规培养法进行比较,对加入食品中的21种已知沙门氏菌属的检测,电阻抗法19个为阳性,检出率在90%以上,常规法检出18个,检测结果与常规培养法相一致,对于阴性结果能在48h内出具结果。结果表明电阻抗法能够快速,可靠地检测食品中的沙门氏菌。     

肉制品中沙门氏菌检测方法的研究进展

系统介绍了各种检测肉制品中沙门氏菌的方法,综述其在肉制品检测中的应用及进展。近年来分子生物学技术与免疫学技术以其敏感、快速、特异性等特点在沙门氏菌检测中得到广泛应用,尤其是PCR与ELISA技术已应用于实际检测中。最后展望了其检测方法应用于前景和存在的问题,为进一步开展基础研究提供了思路。     

食品沙门氏菌实时荧光PCR快速检测方法建立

根据Genbank提供的沙门氏菌ttrBCA基因序列设计引物和探针,建立了食品沙门氏菌实时荧光PCR快速检测方法。结果显示,该方法只对沙门氏菌基因呈阳性反应,而对其它常见非阳性菌株(志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、单增李斯特氏菌、阴沟肠杆菌、副溶血性弧菌)基因组DNA均呈阴性反应,对模拟添加沙门氏菌样品检测,检测低限为240cfu/mL沙门氏菌的DNA,检测食品样品增菌液,仅需约3h,结果表明,该方法适用于食品样品的快速检测。     

非预包装食品中沙门氏菌快速检测方法的建立

当前沙门氏菌传统的国家标准检测方法不能满足食品安全监管高效性的需求,尤其是针对非预包装食品这种较易腐败变质的食品。研究针对非预包装食品利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）分子层析方法得出一个快速、简单、准确的沙门氏菌检测方法。通过对60批普通基质食品（面食制品、乳制品、肉制品）和40批复杂基质食品（凉菜类、生鲜蛋类）模拟不同程度被沙门氏菌污染的实验,采用国标法和PCR分子层析法对比检测。结果显示：普通基质食品PCR分子层析法检测灵敏度更高,可达1 CFU/mL～10 CFU/mL的阳性菌添加浓度;复杂基质食品尤其对生鲜蛋类食品,两种检测方法的灵敏度均较低。故对沙门氏菌的增菌液进行了优化,在沙门氏菌的增菌液缓冲蛋白胨水（buffered peptone water,BPW）中添加一定比例六水氯化镁,即利用提高增菌液渗透压和降低pH值抑制其他肠道菌群的生长的原理,使其检测灵敏度提高,由104CFU/mL的阳性菌添加浓度降低至102CFU/mL的添加浓度,灵敏度提高了100倍;经特异性试验验证,PCR分子层析法具有较强的抗干扰能力,样本体系中存在其他干扰菌株的脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid,DNA）亦不会影响沙门氏菌的检测。PCR分子层析法检测时间只需22 h,对比需要6 d检测时间的传统国标方法的检测效率提高6倍。     

沙门氏菌快速检测板在食品检测中的应用研究

目的研究沙门氏菌快速检测板在食品检测中的应用。方法以标准菌株为测试样本,参照GB4789.4-2010验证沙门氏菌快速检测板的灵敏度、特异性、假阳性率、假阴性率、准确度,同时利用卡方检验分析阳性率显著性差异。结果沙门氏菌快速检测板最低检测限能达到10~0 CFU/m L,灵敏度为100%,不存在假阴性,特异性为92%,假阳性率为8%,准确度为95%,显著性差异卡方值卡Χ~2为0.5,均达到定性方法验证的相关指标。结论沙门氏菌检测板技术方法具有快速准确、灵敏度高、操作简单的特点,可以作为一种快速筛查方法广泛运用在食品安全微生物检测领域。     

食品中大肠杆菌检测方法研究进展

大肠杆菌是人及各种动物肠道中的正常菌群,食品中检出大肠杆菌意味着食品己经被污染。大肠杆菌作为各种食品的粪源性污染卫生细菌学指标,是国际上公认的卫生监测指示菌,因此大肠杆菌的检测技术显得十分重要,并相应出现了大量的大肠杆菌的各种检测方法。本研究阐述了大肠杆菌的几种检测方法,并与传统的检测技术进行了对比。     

食品中重金属检测方法研究进展

镉、铬、铅、砷和汞等重金属元素在人体内蓄积到一定浓度时,可危害中枢神经、血液及各器官,导致各种疾病,甚至癌症。食品安全直接关系人民健康,食品中重金属含量超标事件时有发生,对人们的身体健康有潜在的威胁,因此对于食品中重金属含量的检测十分必要。本文综述了常用的检测食品中重金属含量的方法,包括:原子荧光光谱法、X射线荧光光谱法、电感耦合等离子体-质谱法、电感耦合等离子体-原子发射光谱法、原子吸收光谱法等,简述其优缺点,并介绍各种检测方法检测食品中重金属含量的应用实例,以期对检测重金属的发展提供一定的参考价值,以更好地做好食品安全和维护人民健康,并且对重金属检测方法的发展作出展望。     

Evaluation of a polymerase chain reaction-based test for detecting Salmonella spp. in food samples: Probelia Salmonella spp

A commercially available polymerase chain reaction (PCR) kit was evaluated for the detection of Salmonella spp. in food samples. The test combines PCR amplification and sandwich hybridization of the amplified DNA in microtiter plates. The sensitivity and specificity was evaluated with 52 Salmonella strains and 51 non-Salmonella strains and showed that the test was entirely reliable. The threshold sensitivity was 10(2) CFU/ml. The limit of detection of dead cells that determines the minimum detection level of dead cells in food samples was superior to 10(6) CFU/25 g, a level rarely achieved in naturally contaminated samples. After an 18-h pre-enrichment step, the test could detect viable Salmonella in artificially contaminated food samples, even for the lower contamination level (3 CFU/25 g). There was complete agreement between the PCR test and the ISO 6579 bacteriological reference method with artificially contaminated samples. Regarding the accuracy of the results obtained from 253 naturally or noncontaminated foods and from 32 artificially contaminated foods, the agreement percentage was 99.6%. The fidelity of the technique was evaluated in a collaborative study with eight European laboratories and showed a correlation of 98.4%.     

中红外光谱在食品掺假检测中的应用

中红外光谱 (MIR)以其在 40 0 0 - 40 0cm-1处的指纹吸收特性广泛应用于机电、医药等领域。随着计算机技术和化学计量学方法的发展 ,MIR在食品领域的应用研究也已展开。本文仅就其在食品掺假检测中的应用加以概述     

mini-MPN-STE-qPCR法快速定量检测食品中沙门氏菌

目的 建立一种快速、简易、可定量检测食源性沙门氏菌定量PCR(quantitative PCR, qPCR)方法。方法 依据沙门菌属invA基因序列设计染料法qPCR引物, 建立基于嵌合荧光法的沙门氏菌qPCR检测方法, 并通过短时间增菌(short time enrichment, STE)的5管微型多管发酵计数法（mini-most probable number, mini-MPN）进行定量检测, 构建mini-MPN-STE-qPCR法。使用人工污染的鸡肉混合液进行定量检测, 检测结果与传统MPN计数法和平板计数法进行比较分析。结果 建立的 qPCR法特异性良好, 方法灵敏度为50 CFU/mL, 结合48孔板min-MPN和4h 短时间增菌建立的mini-MPN-STE-qPCR法可将整个检测流程缩短至7 h。人工添加沙门氏菌的鸡肉混合液检测结果表明方法检出限为-0.347 log MPN/mL, Bland-Altman分析结果显示, 此法与传统MPN计数法相关系数R2=0.994, 与平板计数法相关系数R2=0.992。结论 该方法准确、简单易行、成本低、灵敏度高, 可用于食品中沙门菌的快速定量检测。     

食品中速灭威农药残留检测方法研究进展

速灭威是目前使用较为广泛的氨基甲酸酯类农药,主要用于水稻、棉花和果树的虫害防治。如果长期或不正当用药,极易在食品中残留损害人体健康,速灭威农药残留问题引起人们的极度关注。本文综述了毛细管电泳、高效液相色谱、气相色谱、色谱-质谱联用、免疫分析方法等速灭威农药残留检测方法的研究进展,并对检测方法进行了展望,以期为保证食品安全和提高我国速灭威农药残留的检测能力提供技术支持。     

饮料中食用色素的检测方法研究

在饮料生产加工过程中需要添加食用色素以改善其颜色,提升其感官质量与风味。介绍了检测饮料中合成食用色素的最新方法及其研究状况,并对其特点进行了说明。     

食品中沙门氏菌快速检测技术方法对比结果分析

目的比较VITEK2COMPACT、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrixassistedlaser desorption ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)、实时荧光PCR法(real-time PCR)、环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)4类方法,分析其对沙门氏菌的快速检测效果。方法挑取12株阳性野生菌株复苏,配以1株标准菌株作为对照,分别用VIKEK2COMPACT、MALDI-TOF-MS、Real-timePCR、LAMP四类方法对其进行检测,并比较4类方法的结果差异。结果 Real-time PCR与LAMP单对通用引物能鉴定到属水平,此外, LAMP测定沙门氏菌时会有假阴性的情况出现;VITEK2生化鉴定能将少数沙门菌株鉴定到种的水平;质谱方法能鉴定到亚种水平,同时会出现鉴定不准确的情况。结论基于沙门氏菌属水平上, 4类方法都能快速准确鉴定沙门氏菌,但在使用快速检测技术时均应考量该方法的优点对实际工作的帮助以及缺点对检验结果的影响,才能提高检测效率。     

沙门氏菌检测生物传感器研究进展

沙门氏菌(Salmonella)是最常见的食源性致病菌之一,传统的沙门氏菌检测方法包括分离培养和生化鉴定、免疫分析法、核酸分析法等,其可靠性高,但检测限低、繁琐且费时.传感器是整合生物学、化学、光学等技术的新型快速检测技术.本文对比了沙门氏菌的传统检测方法,重点分析了近几年来基于纳米材料、适配体的光学或电化学沙门氏菌生...     

实时荧光PCR法检测食品中亚利桑那沙门氏菌

沙门氏菌（Salmonella）是食品检测过程中最常见的致病菌之一,亚利桑那沙门氏菌（Salmonella arizonae）又是沙门氏菌中比 较难鉴定的亚种。该实验通过实时荧光聚合酶链式反应（PCR）方法快速准确的检测亚利桑那沙门氏菌和其他沙门氏菌。根据GenBank 公布的亚利桑那沙门氏菌和其他沙门氏菌gud D基因序列, 分别设计引物和Taqman探针。 使用10株不同血清型的沙门氏菌标准菌 株、88株沙门氏菌分离株和29株食品中常见食源性致病菌进行实时荧光PCR特异性实验。结果显示,该实验所设计的引物探针特异 性非常好。 实时荧光PCR灵敏性试验结果表明,检测灵敏度可达到1～10 CFU/mL的添加浓度。 经模拟污染样品验证,所建立的实时 荧光PCR方法与传统方法的检测结果相一致,具有检测周期短、操作简便的优势。     

Salmonella in food animals and humans in northern Thailand

A study was conducted to describe the epidemiology of Salmonella spp. in chickens, pigs, dairy cows, farm workers with and without livestock contact, and children with diarrhea. Samples were collected in the Chiangmai and Lampoon provinces of northern Thailand during 2000-2003. A total of 2141 samples were processed. The prevalences of Salmonella in chickens at the farm, slaughterhouse and chicken meat at the market were 4%, 9% and 57%, respectively. In pigs, the prevalence at the farm, slaughterhouse and pork at the market were 6%, 28% and 29%, respectively. The prevalence of Salmonella in dairy cows was 3%. Salmonella was isolated from 36% of farm workers with livestock contact and 33% of those with no livestock contact, and from 7% of diarrheal children at the hospital. The longitudinal study of Salmonella in pigs showed that the incidences of Salmonella isolation at the farm, slaughterhouse, and market were 7%, 50% and 20%, respectively. The most frequently isolated serotypes of Salmonella were Weltevreden in chickens and humans, and Rissen in pigs. Serotypes varied between farm, slaughterhouse and market for isolates from chickens and pigs. Antimicrobial resistance was present in isolates from all types of animals and humans in the study, with widespread resistance to tetracycline and nalidixic acid. The proportions of resistant organisms among Salmonella from diarrheal children were high, and higher proportions of multi-drug resistant organisms were observed among Salmonella isolates from farm workers with livestock contact than among isolates from workers with no livestock contact.