嗜酸乳杆菌NX2-6冻干发酵剂的研究

为制备嗜酸乳杆菌NX2-6高活性发酵剂,研究了其高密度发酵后真空冷冻干燥时不同冷冻保护剂对其存活率的影响。通过离心条件的选择,获得了最大浓度的嗜酸乳杆菌NX2-6。进而采用单因素实验和正交实验设计,以冻干后的菌体存活率为指标,考察了10种冻干保护剂对嗜酸乳杆菌NX2-6冷冻干燥的保护效果,以获得对嗜酸乳杆菌NX2-6真空冷冻干燥的最佳保护剂配方。实验结果表明,嗜酸乳杆菌NX2-6在8000r/min的条件下离心10min(4℃),所得的活菌数最多。实验确定嗜酸乳杆菌NX2-6的最佳保护剂配方为以15%麦芽浸粉,3%谷氨酸钠和7%菊糖作为复合保护剂,在此条件下嗜酸乳杆菌NX2-6的冻干存活率高达82.43%。     

热休克预处理结合保护剂对嗜酸乳杆菌的冻干保护作用

研究热休克预处理结合添加保护剂对嗜酸乳杆菌冻干存活率的影响。结果表明:结合冷冻干燥之前的热休克处理,能显著提高单独使用冻干保护剂的嗜酸乳杆菌的存活率。比较热休克处理结合12种冻干保护剂,有10种能增加冻干菌体的存活率,其中以结合脱脂乳的冻干存活率最高,达71.98%;以葡萄糖为保护剂结合热休克处理的正向叠加效果最显著,菌株的存活率从34.42%提高到76.28%(P0.01)。对结合热休克处理保护效果较好的4种保护剂交互作用条件进行优化,得到嗜酸乳杆菌冻干存活率最高的试验条件为:菌培养18 h后,经45℃热休克处理30 min,加入10%脱脂乳,10%葡萄糖,1.5%甘油以及2.5%山梨糖醇为冻干保护剂,在此条件下嗜酸乳杆菌ATCC 4356的冻干存活率高达92.8%。     

嗜酸乳杆菌H0606冻干保护剂配方优化

研究单一保护剂和组合保护剂对嗜酸乳杆菌冻干的影响。结果表明,海藻糖、脱脂乳、蔗糖、抗坏血酸钠、乳糖、葡萄糖和谷氨酸钠对嗜酸乳杆菌的保护效果较好;优选嗜酸乳杆菌的冻干保护剂的配方组合为:脱脂奶粉、蔗糖、海藻糖、葡萄糖和抗坏血酸钠。     

嗜酸乳杆菌冻干菌粉保护剂选择的研究

为了开发以嗜酸乳杆菌为基础的各类制品,本文以嗜酸乳杆菌存活率为指标,对保护剂进行了单一和复合的筛选及配方的研究,并进行了验证实验。结果表明,单一及复合保护剂均对菌体存活率具有一定的保护作用,但复合保护剂的效果明显高于单一保护剂。最终确定出配方:脱脂乳(16.0%)、麦芽糊精(10.0%)、海藻糖(10.0%)、L-谷氨酸(1.0%)、维生素C(2.0%)、甘油(2.0%)、MnSO4(0.8%)对嗜酸乳杆菌的保护效果最佳;保护剂与细胞悬浮液最佳比例是2∶1,利用此保护剂,经真空冷冻技术可制得活菌水平在1010cfu/g的嗜酸乳杆菌冻干菌粉。     

冷诱导胡萝卜粗提物对嗜酸乳杆菌的保护作用

为了检测冷诱导的胡萝卜蛋白质粗提物对嗜酸乳杆菌的冻干保护作用,从冷诱导的胡萝卜中制备蛋白质粗提物,设计6组冻干保护剂配方,以细菌存活率作为指标检测该粗提物的冻干保护效果;并在扫描电镜下观察冻干菌粉的形态特征。试验结果显示:冷诱导胡萝卜在12.5 ku和36 ku分子量处出现疑似抗冻蛋白条带;不同保护剂对嗜酸乳杆菌的冻干保护效应差异显著(P<0.05),添加冷诱导胡萝卜粗提物的复合保护剂冻干保护效果最优,其细菌存活率达到76.02%;最佳保护剂组配方为:10%脱脂乳,10%麦芽糊精,10%海藻糖,1.0%L-Cys,2.0%VC,2.0%甘油,0.8%硫酸锰和15%冷诱导胡萝卜粗提物。     

嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中保护剂的筛选及液氮预冻

冻干乳酸菌发酵剂在乳品生产中的优势日益明显,对其研究尤为重要。通过正交试验设计,优化适合嗜酸乳杆菌的最佳冻干保护剂配方为：脱脂乳粉15%、海藻糖4%、VC 1%、谷氨酸钠1.5%。在冷冻干燥中,通过实验发现,用液氮预冻比在普通的冷冻干燥条件下预冻嗜酸乳杆菌的存活率要高。此外,用液氮预冻时,不同的液滴大小对嗜酸乳杆菌的存活率也有影响,液滴越小,存活率越高。     

嗜酸乳杆菌冻干保护剂及其直投式复合发酵剂的开发

为提高嗜酸乳杆菌冻干存活率和研发以嗜酸乳杆菌冻干菌粉为基础的直投式复合发酵剂,本研究以嗜酸乳杆菌为试验菌株,在单因素实验、析因实验和最陡爬坡实验的基础上采用响应面分析优化了嗜酸乳杆菌真空冷冻干燥的保护剂配方。优化后将嗜酸乳杆菌冻干菌粉与肉糖葡萄球菌冻干菌粉以一定质量比复合并应用于萨拉米香肠的制备中。结果表明,嗜酸乳杆菌最佳冻干保护剂(以11%脱脂乳为基础)配方为:海藻糖3.03 g/100 mL、甘油9.50 g/100 mL、谷氨酸钠3.50 g/100 mL,此条件下,嗜酸乳杆菌冻干存活率高达81.24%;嗜酸乳杆菌与肉糖葡萄球菌的冻干菌粉最佳比例为1:2,直投式复合发酵剂最佳接种量为10~8 cfu/g。与对照组相比,该直投式复合发酵剂生产的萨拉米香肠酸味柔和,色泽、硬度、弹性良好,总体接受度最高。     

嗜酸乳杆菌冻干影响因子的研究

传统的乳酸菌发酵剂因活化过程复杂,极易引起污染而影响发酵乳的质量。目前,多采用冷冻干燥技术制备直投式粉末状乳酸发酵剂。然而,菌种冻干时机的把握和冻干保护剂的选择,将直接影响乳酸菌在冷冻干燥前后的存活率以及存活期。本文研究了嗜酸乳杆菌的生长曲线,选用蔗糖、乳糖、甘油、VC、谷氨酸钠、麦芽糊精、脱脂乳粉等为嗜酸乳杆菌冻干保护剂进行了冻干研究。结果表明:①嗜酸乳杆菌发酵液培养至酸度为100°T、pH值4.8时,OD410nm=0.511为最大,是最佳发酵终止时间;②嗜酸乳杆菌冻干保护剂配方以5%麦芽糊精、2%VC、5%甘油为最佳冻干保护剂组合,此时嗜酸乳杆菌冻干菌粉活菌数为2.34×109cfu/g。     

PVP K-30对嗜酸乳杆菌的冻干保护研究

聚乙烯吡咯烷酮K-30,简称PVP K-30,是一种新型的食品安全添加剂,在食品产业中受到广泛关注。以嗜酸乳杆菌冻干存活率为衡量指标,对包括PVP K-30在内的13种冻干保护剂进行了单因素保护效果的比较,并对筛选的5种保护剂进行L16(45)多因素复合实验,结果表明,13种单一保护剂对菌体存活率均具有一定的保护作用,复配保护剂的效果明显高于单一保护剂;PVP K-30可明显增强脱脂乳、海藻糖的保护能力;以4%PVP K-30、20%脱脂乳、6%海藻糖、0.5%谷氨酸钠和4%甘油组成的复配保护剂效果最佳,可使嗜酸乳杆菌真空冷冻干燥后存活率达到93.33%。     

冷休克处理提高嗜酸乳杆菌的冻干存活率

冷冻干燥法为制备直投式发酵剂常用的方法,然而,在冻干过程中,菌的存活率会降低而影响发酵剂的活性。为提高嗜酸乳杆菌冷冻干燥后的存活率,本试验通过单因素和响应面试验对冷冻干燥前的嗜酸乳杆菌进行冷休克处理条件优化。结果表明:最佳冷休克处理条件是:在37℃培养10 h时收集嗜酸乳杆菌,8℃冷休克处理15 h,再结合复合冻干保护剂,使其冷冻干燥后的存活率提高至96.64%;比未冷休克、添加冻干保护剂的P2组(78.99%)高17.65%,比未冷休克、未添加冻干保护剂的P4组(21.42%)高75.22%。这说明冷冻干燥前对乳酸菌进行冷休克处理是提高其抗冻干胁迫能力的一种有效新途径。     

Viability of probiotic micro-organisms (Lactobacillus acidophilus La-5 and Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bb-12) in ice cream

The purpose of this research was to determine the survival of two probiotic micro-organisms in ice creams (4% fat). The micro-organisms were Lactobacillus acidophilus La-5 and Bifidobacterium animalis subsp . lactis Bb-12 . To meet this objective, an ice cream mixture was formulated and subjected to three treatments. Treatment 1 was inoculated with L. acidophilus , treatment 2 with B. lactis and the third treatment was inoculated with a mixture of both bacteria inoculated in 1 : 1 proportions. The inoculation was with 4% culture for each treatment. The final products were stored at −25°C for 60 days. The ice cream inoculated with L. acidophilus had a final concentration of 2 × 10 ⁶ cfu/g and the survival rate was 87%. The treatment inoculated with B. lactis had a final concentration of 9 × 10 ⁶ cfu/g, with a logarithmic decrease of 10%. When both micro-organisms were inoculated together, the survival rate was 86%.     

离心条件对冻干菌株存活率影响的研究

选择酶解乳清培养基为离心基质,研究了不同的离心条件对于冻干后活菌存活率的影响,确定了冻干后活菌存活率最高的适宜离心条件,,结果表明:在8000r/min、10min条件下离心的活菌存活率最高;在4000r/min,10min条件下离心的活菌冻干存活率最高,贮藏期内的损失最小,益生菌冻干制剂的活菌数高;离心温度对于活菌离心存活率的影响不显著.     

具有α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV抑制作用降糖益生菌的筛选

以实验室保藏的13 株乳酸杆菌为研究对象,研究其细胞代谢物（cell-free excretory supernatants,CFS）和细胞内容物（cell-free extracts,CFE）对α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV（dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV）的抑制活性;然后对酶抑制率较高的菌株进行益生特性评价,以期筛选出具有潜在降糖作用的益生菌。结果表明,13 株乳酸杆菌的CFS对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,抑制率为0%～12.13%;CFE对α-葡萄糖苷酶无抑制作用。13 株乳酸杆菌CFS和CFE对DPP-IV均表现出一定的抑制作用,抑制率分别为0%～7.13%和0%～55.42%。选取酶抑制率较高的嗜酸乳杆菌KLDS1.1003、KLDS1.0901和KLDS1.0902进行益生特性的研究。其中嗜酸乳杆菌KLDS1.0901表现出较高的酸耐受性,嗜酸乳杆菌KLDS1.1003表现出较高的胆盐耐受性和疏水性。主成分分析表明嗜酸乳杆菌KLDS1.1003的综合性能最佳：其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性可达10.29%;对DPP-IV的抑制率为CFS 7.13%,CFE 50.14%;于pH 2.0的条件下孵育1 h后,存活率达到51.55%;在0.3%的胆盐条件下孵育,滞后时间为2.26 h;在二甲苯、乙酸乙酯和氯仿溶剂中的疏水率分别为134.33%、20.51%和344.08%,总体上嗜酸乳杆菌KLDS1.1003具有较高的酶抑制活性和良好的益生特性。     

嗜酸乳杆菌表层蛋白提取方法的对比

本文通过电泳比较了5 mol/L LiCl法、4 mol/L盐酸胍法、8 mol/L尿素法和5 mol/L LiCl结合1 mol/L LiCl法提取嗜酸乳杆菌JCM 1132表层粗蛋白方法,并进一步研究了不同提取方法对乳杆菌表面特性的影响。结果表明:两种不同浓度的LiCl法是提取表层蛋白的最适方法,该方法提取可得到纯度较高的表层蛋白。且用该方法剥离表层蛋白后,菌体的存活率最高,约为99.27%。不同方法去除表层蛋白后,菌体的表面电荷、表面疏水性、自聚集能力以及与沙门氏菌的共聚集能力均有所降低。表明表层蛋白对嗜酸乳杆菌表面性质起关键性作用,对乳杆菌益生功能的积极影响。     

牛羊乳促嗜酸乳杆菌增菌发酵差异性及冷藏存活率比较研究

益生菌的活菌数量是衡量益生菌产品及制剂的营养价值和保健功能的主要指标之一。本研究以嗜酸乳杆菌为发酵剂分析比较牛乳发酵奶和羊乳发酵奶中嗜酸乳杆菌增菌发酵的活力差异,及在冷藏期活菌数量的变化趋势,探讨了牛羊乳在促进嗜酸乳杆菌发酵方面的差异性及在冷藏期存活率变化规律。结果表明:嗜酸乳杆菌在羊乳基质中表现为较好的增菌发酵效能,总活菌数为1.66×1010CFU/mL,大于牛乳基质中的总活菌数3.02×109CFU/mL;羊乳发酵奶和牛乳发酵奶在21d贮藏期内嗜酸乳杆菌的活菌数均维持在较高活力水平,而在21～26d的贮藏期内,其存活性显著降低(p<0.05),存活率分别为84.15%和84.39%。由此说明羊乳基质促嗜酸乳杆菌增菌发酵效能更佳,牛、羊乳发酵奶在贮藏期活菌数变化规律基本一致。     

冷应激及包埋对乳酸菌冻干发酵剂的影响

将嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌按3∶2∶1比例制备乳酸菌冻干发酵剂.比较不同温度冷应激处理对乳酸菌冻干存活率的影响,结果表明,20℃,处理4h时,冻干存活率为96.3％.选择发酵的固定化细胞制作条件:海藻酸钠2.25g/L、CaCl2 4.0g/L.包埋后乳酸菌冻干存活率为95.6％.     

功能性酸乳中每种益生菌的单独计数方法及其混合发酵工艺的研究

通过研究分析功能性酸乳中双歧杆菌和各种乳酸菌在BBL平板培养基上的菌落特征及菌体形态,提出了一种可同时准确对每种益生菌单独计数的新方法,从而可直观地观察到各种益生菌的生长活度,免除了传统方法计数不同有益菌数要用不同培养基的繁琐,为生产和检测提供了依据;还对功能性酸乳的混合发酵生产工艺进行了研究,确定了最佳的菌种比例,按嗜热链球菌3%、保加利亚乳杆菌2%、嗜酸乳杆菌4%、双歧杆菌10%接种,39℃发酵11~13h,酸乳产品既保持了普通酸乳的良好口感和风味,又保证了双歧杆菌和乳酸菌活菌数在贮存期内均大于108cfu/mL,增强了酸乳的保健功能。