传统阳江豆豉发酵过程中米曲霉的筛选及发酵条件优化

对从广东阳江豆豉的曲醅中筛选的米曲霉菌株进行培养基和发酵条件优化,结果表明,该菌产酶最适培养基的组成为添加3%的酵母粉、1%的葡萄糖、3%的硝酸钠和0.50%的氯化钙于基础PDA培养基中。该菌株产酶最优发酵条件为温度30℃,pH值为7~8,250 mL三角瓶中装瓶量为120 mL。在此最优条件下进行生长曲线绘制,培养12 h时,开始出现白色菌落,到36 h时,白色菌丝体明显增多,蛋白酶活力也持续增大,菌株培养48 h时,黄绿色孢子开始产生,蛋白酶活力达到最大值,到60 h时,菌株增长明显减慢,产生大量孢子,颜色较深,蛋白酶活力开始下降。综合菌量和蛋白酶活力,培养48 h为最适发酵时间。     

黑胚小麦主要致病菌链格孢霉蛋白酶部分酶学性质研究

黑胚是小麦在成熟期或收获期籽粒受霉菌感染,在小麦胚部形成的明显灰褐色至黑色大小不一的斑块[1],黑胚小麦主要致病菌有蠕孢霉、链格孢霉等[2]。通过对从黑胚小麦中分离出来的链格孢霉的蛋白酶进行酶学性质的研究,从而了解该菌对小麦蛋白的影响程度。结果表明:该酶在经过110h的固态发酵,其酶活力达到最大值,最适作用温度约为40℃左右,最适pH值为7.5左右,最适反应温度为45℃。固态发酵时,培养基的含水量为80%时蛋白酶活力最高。     

云芝菌固态发酵产漆酶及其对二氯酚脱氯作用的研究

利用云芝菌固态发酵产漆酶,当玉米皮和麸皮的比例为6:4,培养基含水量65%,接种量10%,培养温度30℃时,发酵10 d,漆酶活力可达到1.51×10~5U/g(干曲)。利用云芝漆酶对2,4-二氯酚进行脱氯反应,其适宜温度为35℃,pH 6.0,当底物浓度为1 mmol/L时,反应8 h,2,4-二氯酚的去除率达到95%以上。     

珍珠贝肉制曲过程中物质代谢与酶活之间的关系

以马氏珍珠贝肉为原料固态发酵制备成曲,通过监测发酵过程各营养底物及中间代谢产物变化趋势,探究了制曲过程中物质代谢与酶活力的相互关系。研究表明:制曲过程中,曲质量和水分含量均呈现下降趋势,曲中的干物质大体也是呈现下降的变化趋势,曲温则是呈现先上升后下降的变化趋势。营养底物的代谢变化分为4个阶段,24 h是物质变化突变点,此后,柠檬酸循环是糖代谢的主要途径。24~36 h,小分子糖和游离氨基酸吸收利用量达到最高值,而40~46 h为蛋白酶活力最高值,酶系分泌滞后于代谢中产物的消耗。糖代谢对蛋白酶活力影响最显著,与中性蛋白酶活力呈显著负相关性(皮尔逊指数P依次为:-0.943);发酵前期提高淀粉酶活力,成曲蛋白酶活力提高了26.81%。     

从酱油生产用菌粉中选诱优良米曲霉菌种

以酱油酿造用菌粉为出发菌 (S) ,经分离、纯化后再经紫外线诱变 ( 3 0W ,2 5cm ,3 0min)及控温培养处理后 ,获得 1株变异菌株。结果表明 ,该菌株能在 42℃环境中旺盛生长 ;酶活力可达 72 63 5u/g(干曲 ) ,较出发菌株S酶活力提高了 1 0 8 3 %;遗传稳定性较好 ;发酵成酱油 ,其指标可达“GB1 81 86— 2 0 0 0低盐固态发酵酱油”特级品标准 ,明显优于出发菌株酿造的酱油     

绿僵菌Ma83固态发酵几丁质酶和部分酶学性质的初步研究

研究了金龟子绿僵菌MetarhiziumanisopliaeMa83菌株产几丁质酶的固态发酵条件和粗酶液的酶学性质。研究结果显示 ,当以麸皮∶蚕蛹粉为 3∶1作为培养基 ,最适氮源为1%NaNO3,起始pH为 6 5 ,发酵温度为 31℃ ,接种量为 2mL液态种子时酶活力最高。此外 ,添加稻壳对Ma83产几丁质酶有促进作用。该菌株在生长 2d时 ,酶活力达 33 9U /g干培养基。酶的最适反应温度为 5 0℃ ,最适反应 pH为 6 0 ;不同温度保温 1h后 ,酶的半失活温度为 42℃。不同 pH值的缓冲溶液中 (2 5℃ )放置 1h后 ,酶在pH 5 0～ 6 0条件下稳定性最高     

绿色木霉固态发酵纤维素酶生物量的测定及发酵培养基的初步优化

为了测定绿色木霉固态发酵纤维素酶的生物量，采用紫外分光检测固态发酵过程中麦角固醇的量．确定了其最佳提取工艺：在75℃恒温水浴中反应0．5h，用乙醚萃取，乙醇定容，紫外282nm检测．在此基础上对绿色木霉固态发酵的培养基进行了初步的优化，并得到了最佳的培养基组合：碳源为蔗糖，无机氮源为(NH4)2SO4，水料质量比为2．2，pH为5．5．用该培养基，CMC酶活和滤纸酶活分别比优化前提高了21．0％和44．1％．     

灵芝菌丝体固态发酵豆渣的营养成分变化

为了研究灵芝菌丝体固态发酵豆渣过程中的营养特性变化,以豆渣为原料,利用灵芝菌丝体固态发酵豆渣,研究发酵过程中菌质的形态指标、理化指标、生化指标的变化。结果表明,灵芝菌丝体发酵豆渣可分为3个阶段,1～5 d为发酵前期,5～9 d为发酵后期,9～11 d为老化期。豆渣经灵芝菌丝体固态发酵,总膳食纤维的质量分数在发酵前期由发酵前的43. 16%显著下降至28. 72%;脂肪的质量分数由发酵前的19. 69%显著下降至发酵末期的12. 29%;可溶性蛋白、氨基酸态氮的含量分别由发酵前的2. 27 mg/g、1. 16 mg/g显著上升至发酵末期的11. 05 mg/g、9. 94 mg/g;多肽的含量由发酵前的11. 90 mg/g上升至发酵后期的19. 59 mg/g。该研究结果为灵芝菌丝体固态发酵豆渣的工艺优化提供了理论依据。     

高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌优选及发酵工艺条件优化

以黄豆为主料,添加不同辅料,采用不同处理方式,以产酶活力为指标研究三株枯草芽孢杆菌发酵性能,筛选优势菌株进行固态发酵,确定最优工艺条件。结果表明:在三株受试菌种中BS21076发酵性能最优,活菌数及纳豆激酶活力均较高;最优固态发酵条件为:大豆90℃下烘炒5min,破碎度为四瓣,魔芋精粉添加量3%,接种量为8%,37℃下发酵24h;在此条件下,酶活力可达(3582.48±83.13)U/g,较传统发酵NK活力极显著(p0.01)提高。     

移动式填充床固态发酵反应器的设计及单宁酶中试发酵

通过对单宁酶固态发酵工艺分析,结合传统厚层通风制曲的结构,设计了移动式填充床固态发酵反应器。利用设计的固态发酵反应器以发酵茶梗为基质中试化生产单宁酶,探究10、15、20 m3/h通风量对单宁酶中试化发酵效果。结果表明:在通风量为10、15、20 m3/h的条件下,发酵达到的最大酶活分别为8.21、8.08、8.41 U·gds-1,达到最大酶活的时间分别96、120、144 h。利用设计的填充床固态发酵反应器以茶梗为基质发酵生产单宁酶,不仅原料来源广泛、价格低廉,还能有效提高单宁酶酶活。     

前体对桑黄菌丝生长和多糖合成的影响

考察不同类型前体对桑黄菌丝生长和胞外多糖合成的影响,在全合成培养基中添加乳糖前体有利于桑黄菌丝的生长和胞外多糖的合成。采用正交试验优化获得乳糖补加条件：发酵初始补加30g/L 乳糖,3L 发酵罐发酵168h 验证实验获得的桑黄菌丝量最高可达13.18g/L,胞外多糖产量最高可达1.21g/L,比对照组提高了25%。而植物油类前体筛选发现菜籽油能明显促进桑黄菌丝的生长,7L 发酵罐中发酵144h 桑黄菌丝量最高可达23.77g/L,比对照组提高了207.1%,但抑制胞外多糖的合成。     

木霉T6固态罐发酵产淀粉酶与尾气分析

建立了一个 2L玻璃发酵罐的固态通风培养和尾气检测系统。以天然原料麸皮 2 0 0g为培养基 ,加入 15 0mLMandels营养盐 ,接种量 2 5mL( 2× 10 8孢子 /mL) ,自然pH ,室温下 ,对木霉T6进行培养。通过定时取样测定淀粉酶活力 ,并对尾气CO2 连续测定 ,结果显示 ,菌体CO2 的释放与淀粉酶合成具有相关性 ,且呈同步关系。说明尾气的CO2 含量变化可以作为固态发酵某些产物合成的研究参数。     

分批与流加发酵法生产纤维素酶的研究

采用里氏木霉ＲｕｔＣ－３０,对２．５Ｌ罐分批和流加发酵产酶条件及优化进行了系统研究。通过研究不同浓度的ＳｏｌｋａＦｌｏｃ（纤维素粉）对分批发酵产酶的影响,发现菌体浓度与产酶量随底物浓度增加而增加,当采用５０ｇ／ＬＳｏｌｋａＦｌｏｃ复合１０ｇ／Ｌ麸皮为碳源时,菌体浓度和产酶量最大,最大ＤＣＷ１３．８２ｇ／Ｌ,ＣＭＣａｓｅ２３４．２Ｕ／ｍｌ,ＦＰＡ２１．２５Ｕ／ｍｌ,但ＳｏｌｋａＦｌｏｃ增加至６０ｇ／Ｌ,高浓度底物对菌体初始生长产生强烈抑制,产酶下降。通过研究不同初始Ｓｏｌ－ｋａＦｌｏｃ浓度对流加发酵产酶的影响,发现当初始底物浓度为５０ｇ／ＬＳｏｌｋａＦｌｏｃ复合１０ｇ／Ｌ麸皮时,菌体量和产酶均达到最大值,分别为ＤＣＷ１５．４１ｇ／Ｌ,ＣＭＣａｓｅ３５９．７Ｕ／ｍｌ,ＦＰＡ３０．６Ｕ／ｍｌ,高菌体量是获得纤维素酶高产的关键因素之一。此外用硫铵盐析法对纤维素酶进行了提取。     

风味酵母A10-2的高密度培养及其生长动力学

为实现一株自分离风味酵母的高密度培养及生长动力学预测模型构建,本文对从酱油发酵醪中筛选的产4-乙基愈创木酚的风味酵母A10-2进行了高密度培养工艺的研究,对培养基种类（氮、碳源）、浓度进行了研究及优化,并对酵母的生长、基质消耗过程进行了数学模型的构建和验证。结果表明:磷酸二氢铵作为无机氮源,浓度0.2 g/100 mL为最适氮源流加补料方案;使用糖蜜作为唯一碳源时,培养液中持续流加保持总糖浓度为0.4~0.6 g/100 mL可获得最佳菌体生长速度;A10-2酵母的生长符合Logistic方程S形曲线,基质（总糖）消耗符合Leudeking-Priet方程,比生长速率最大值μ_m为0.4764 h?1,最大菌体生长得率系数Y_G值为0.5879 g/g,维持系数m_s=0.0127 g·L?1·h?1。所建立模型能够较好的描述酵母在高密度培养过程中的生长和耗糖情况,具有预测指导意义。     

红曲废菌渣中有效成分的综合提取工艺

为提高废弃红曲霉菌丝体有效成分的利用率,在单因素实验的基础上,通过正交实验对红曲色素和粗蛋白的提取条件、麦角固醇的皂化条件及壳聚糖的脱乙酰条件进行了优化。结果表明:红曲色素提取条件为乙醇体积分数为80%,温度为50 ℃,时间为30 min,料液比为1:34 (g:mL);粗蛋白提取条件为pH为9,温度为45 ℃,时间为2 h;麦角固醇皂化条件为NaOH溶液浓度为14%,温度为90 ℃、时间为2 h、料液比为1:8 (g:mL);壳聚糖碱法脱乙酰条件为碱液浓度为45%,温度为110 ℃,时间为3 h。采用该工艺,最终红曲废渣中红曲色素、粗蛋白、麦角固醇和壳聚糖的得率分别达到94.41%、65.23%、4.16%、3.64%。通过该途径可一次性综合提取红曲色素、粗蛋白、麦角固醇和壳聚糖,达到资源利用的最大化。     

PURIFICATION OF CELLULASE FROM FUSARIUM MONILIFORME AND ITS APPLICATION TO THE PRODUCTION OF RED BEAN STARCH PRECIPITATE

To investigate the effect of cellulase on increase of recovery of red bean starch precipitate, cellulases from Fusarium moniliforme were purified and applied to the production of red bean starch precipitate. Oneã-glucosidase, two filter paper degradation enzymes (FPase), one endo-ã-glucanase (endo-Cx) and one exo-ã-glucanase (exo-Cx) were purified by ammonium sulfate fractionation, gel filtration and ion-exchange chromatography. Optimum temperature and time of submersion of red beans for reduction of hardness was 50°C and 2 h. Maximum sedimentation rate of starch was obtained when the red bean was incubated in a mixture of 0.004 units/mL of FPase and 0.3 units/mL of CMCase, and maximum recovery of red bean starch precipitate was obtained with 0.004 units/mL of FPase and 0.2 units/mL of CMCase. Enzyme treatment reduced suspended solids about 40% in waste water compared with control. A little hydrolysis in cell wall, intercellular space and interstarch granular space was observed.     

Bioconversion of sugar cane bagasse for cellulase enzyme and microbial protein production

A pilot scale (10 1) fermenter trial was conducted for the production of cellulase enzyme and single cell protein by growing a cellulolytic mould Aspergillus terreus GN₁ on 1.0% alkali-treated sugar cane bagasse substrate. A maximum crude protein content of 29.8% in the biomass was obtained during 4 days fermentation from the initial alkali-treated bagasse having 3.0% crude protein content. The carboxymethyl cellulase (CMCase) activity was almost 0 u/ml during the first 24 hr, which increased during 96 hr incubation to 0.52 u/ml, and corresponded with the highest filter paper enzyme (FPase) activity of 0.032 u/ml. There was an alternate decrease and further increase in water soluble carbohydrate during 96 hr incubation, which increased finally to 7.9%. There was no cellulose utilization during the first 24 hr of incubation. However, the cellulose of sugar cane bagasse substrate was utilized subsequently and a maximum of 72.5% of the initial cellulose was utilized up to 96 hr fermentation time.     

冬虫夏草与蛹虫草融合子菌丝体液体培养基筛选

以冬虫夏草与蛹虫草融合子菌丝体生物量为主要指标,采用正交设计方法对其菌丝体液体培养基进行筛选,比较3种培养方法对菌丝体的影响.结果表明其最适培养基配方为葡萄糖5.00g/L,蔗糖5.00g/L,酵母粉0.25g/L、黄豆粉5.00g/L(浸提液),KH2PO41.50g/L,MgSO4·7H2O 0.50g/L,VB1 4g/L,pH自然.25℃培养,周期156h,其菌丝体干重生物量可达3.51g/L.持续摇动培养法获得菌丝体生物量最多,利于菌体的规模发酵生产;动静相间法次之;静止法获得量较少.动静相间法所培养的菌丝体更有利于原生质体的制备和诱变育种.     

不同搅拌速度对松口蘑菌丝体发酵的影响

在摇瓶发酵条件优化的基础上,研究了松口蘑在25L搅拌式发酵罐上的分批放大实验,探讨了不同搅拌转速对菌丝生物量、生产强度、pH、溶氧及对菌丝形态的影响,在发酵温度25℃,通风量0.8vvm,罐压0.5kg/cm2的条件下,最佳搅拌转速为100r/min。发酵培养8d后,发酵液由浑浊变为澄清,上清液亮黄色,菌丝形态呈均匀颗粒状,菌丝生物量增加趋于平缓,最高可达11.5g/L。     

产纤维素酶海洋菌株的筛选及鉴定

从汕尾一鲍鱼场采集的样品中分离到120株菌，经过刚果红染色，初筛得到产纤维素酶酶活较高的8株菌。对这8株菌进行了纤维素酶和滤纸分解的研究。结果表明，这8株菌所分泌的纤维素酶主要为胞外酶，其中7株能降解滤纸条。在这8株菌中，JK29与GZ-18-2在分泌纤维素酶活力及降解滤纸能力方面均很强，其分解纤维素的酶活分别达到10．3U／ml和11．5U／ml，而分解滤纸的酶活力则分别为6．0U／ml和5．67U／ml。经过鉴定，这两株菌分别为Vibrio alginolyticus与Aeromonas sobria，可用于海洋菌株产纤维素酶的进一步研究。