胶束电动毛细管电泳法分离检测5种β-内酰胺类抗生素

采用毛细管电泳法,基于胶束电动模式与有机添加剂协同作用,分离检测5种β-内酰胺类抗生素。考察运行缓冲液的构成及各组分浓度、pH值、分离电压等因素对电泳分离的影响。优化后的电泳运行缓冲液包含20mmol/L Na2HPO4-20mmol/L NaH2PO4(pH8.5),20mmol/L十二烷基硫酸钠和体积分数25%甲醇。在18kV电压下5种抗生素在15min内达到基线分离。各组分线性关系良好,检出限5.3～8.1mg/L,进样精密度RSD 3.8%～5.5%。研究表明,对分子结构特别相近的抗生素,通过表面活性剂胶束准固定相与有机添加剂协同作用来改善分离效果是可行的。     

高效毛细管电泳同时分离多种酚类物质

建立了高效毛细管电泳同时分离测定芦丁、槲皮素、绿原酸、咖啡酸、没食子酸和原儿茶酸6种酚类物质的分析方法。考察了缓冲液种类、离子浓度和pH、分离电压、运行温度等电泳参数,确立了最佳的电泳条件:缓冲液为20 mmol/L磷酸二氢钠-20 mmol/L硼砂,pH7.5,分离电压为20 kV,运行温度为30℃,紫外检测波长214 nm。结果表明,6种物质在12 m in内得到完全分离,且各组分质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,R2为0.998 7~0.987 4。方法精密度试验中,迁移时间的RSD为0.280%~0.425%,峰面积的RDS为5.228%~8.506%,回收率为85.11%~101.98%。该法快速、简便、准确,具有较高的灵敏度。     

高效毛细管电泳同时检测荸荠中的4种黄酮类物质

采用毛细管电泳法分析荸荠中的黄酮类化合物,测定了芦丁、槲皮素、山奈酚和绿原酸的含量。研究了缓冲液的种类、离子浓度、pH值、分离电压和运行温度等一系列电泳参数,得出优化的电泳条件为:缓冲液为20mmol/L磷酸二氢钾-20 mmol/L硼砂(pH 7.8),紫外检测波长202 nm,分离电压24 kV,运行温度30℃。在此条件下,上述4种物质在7 min内即可分离,并在3.125～100 mg/L内有良好的线性关系,相关系数R2均在0.999以上,相对标准偏差(RSD):迁移时间为0.78%～0.98%;峰面积为6.5%～8.6%。在5,10,20 mg/kg的添加水平下,4种物质的加标回收率为80%～98%。该方法简便、快速、重现性好,可推广应用于植物中4种黄酮类物质的同时检测。     

区带毛细管电泳法同时分离检测6种喹诺酮类抗生素

采用区带毛细管电泳法建立6种喹诺酮类抗生素同时分离检测的方法,考察了缓冲液种类、离子浓度、pH以及分离电压,温度等因素对电泳分离的影响.优化后的分离检测条件为:缓冲液为30mmol/L硼酸钠-10mmol/L磷酸二氢钠(pH8.5)、分离电压和温度分别为18kV和25℃、紫外检测波长278mm.结果表明,6种药物在10min内完全达到基线分离,且各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2>0.9929),检出限为29-51μg/L,回收率为98.05%-104.30%,相对标准偏差(RSD)小于4%.     

毛细管电泳法同时分离检测饮料中的六种食品添加剂

建立毛细管电泳法同时测定饮料中苯丙氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、肉桂酸、山梨酸钾、抗坏血酸和苯甲酸6种食品添加剂的分析方法。在Peakmaster 5.3软件对电泳参数模拟的基础上,考察了缓冲液浓度、pH值以及分离电压对6种食品添加剂分离效果的影响。结果表明,在检测波长214 nm,进样时间10 s的情况下,确定最佳电泳条件为40 mmol/L pH 9.0 Na2HPO4-H3PO4的缓冲液,分离电压12 kV。在此条件下,6种食品添加剂在20～160 mg/L范围内呈良好的线性关系（R＞0.980 0）,检出限为0.23～0.77 mg/L,加标回收率为97.3%～103.0%,相对标准偏差（RSD）为2.0%～3.8%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为2.0%～3.8%,表明该方法操作简便、准确度高、精密度良好,能满足饮料中6种食品添加剂的检测需求。     

胶束电动毛细管电泳法分离测定食品中尼泊金酯的研究

建立胶束毛细管电泳法直接分离测定食品中尼泊金酯含量的方法,研究缓冲溶液的浓度、pH 值、表面活性剂浓度、电压等条件对分离的影响,对分离条件进行优化。在波长256nm、分离电压22kV、pH8.0、10mmol/L磷酸二氢钠-10mmol/L 硼砂、20mmol/L 十二烷基硫酸钠缓冲溶液中,食品中尼泊金酯各成分在10min 内获得基线分离,其浓度与峰面积之间具有良好的线性关系,平均回收率在97.2%～104% 之间。     

毛细管电泳法分离检测香兰素、香兰素醇、香兰素酸和阿魏酸

建立同时测定香兰素、香兰素醇、香兰素酸和阿魏酸4种组分的毛细管电泳法。研究运行缓冲液的组成、pH值和浓度、分离电压、进样时间及检测波长等对分离效率的影响,获得最优的测定条件。以熔融石英毛细管为分离通道,工作电极电位20kV、20℃、进样时间5s、检测波长280nm,在pH9.23、浓度30mmol/L硼砂缓冲液中,4组分获得良好的分离。该法应用于当归、胡黄连和奶糖等样品的检测分析,结果令人满意。     

胶束毛细管电泳Sweeping法检测畜肉中残留氟嗪酸

建立胶束毛细管电泳在线Sweeping富集法检测畜肉中残留的痕量氟嗪酸.讨论了缓冲液pH、SDS浓度、进样时间、运行电压、进样压力对富集效果的影响;考察了不同有机溶剂对蛋白的沉淀效果.结果:选择20mmol/L硼砂 80mmol/l十二烷基硫酸钠(SDS, pH=9.6)为缓冲液,电压18kV,进样时间为200s,进样压力15mbar,三氯乙酸为沉淀剂.氟嗪酸富集倍数达500倍,检测限为0.016mg/L,相对标准偏差RSD(n=3)为2.41%.胶束毛细管电泳在线Sweeping富集法可用于畜肉中残留痕量兽药的检测.     

利用区带毛细管电泳分离、分析葡萄籽原花青素

通过选择不同的缓冲液,发现硼酸盐缓冲液对含有大量同分异构体和不同聚合度的葡萄籽原花青素分离、分析具有良好的效果,利用毛细管电泳可以将葡萄籽原花青素各组分进行一定程度的分离,得到较好的电泳图谱。当硼砂-磷酸盐缓冲液pH=9,浓度为80mmol/L时,原花青素混合物的分离度和分离效果最好。提高毛细管电泳分离电压和分离温度,降低硼砂-磷酸盐缓冲液的浓度,可以改善各组分的分离效果,缩短分离时间,提高分析速度。通过解聚反应,可使高聚体原花青素降解,葡萄籽原花青素的电泳分离效果得到明显改善,在低浓度(20mmol/L)硼砂-磷酸盐缓冲液中也可得到艮好的毛细管电泳图谱。     

毛细管电泳法测定婴幼儿食品中三嗪类农药残留量

采用毛细管电泳法对5种三嗪类农药进行了分离研究,考察了缓冲溶液的浓度、pH、胶束浓度和有机改性剂对分离的影响。以10mmol/L硼砂-50mmol/L十二烷基硫酸钠-10%(体积分数)甲醇溶液(pH9.42)为分离介质,压力进样方式,25kV恒压分离,221nm波长检测,各组分可达到基线分离。5种三嗪类农药标样在质量浓度0.1～10mg/L范围内呈良好线性关系,3个水平的加标回收率在81.6%～92.7%之间,方法最低检出限为0.1μg/g。     

毛细管电泳分离测定霉变食品中桔青霉素的研究

为了建立毛细管电泳法分离测定部分霉变食品中桔青霉素的方法。研究缓冲溶液种类、浓度、pH 值、有机添加剂等对分离的影响,对分离条件进行优化,在波长为252nm,分离电压为15kV、10mmol/L 磷酸二氢钠-10mmol/L 硼砂缓冲溶液(pH7.0),10% 乙醇为提取剂的条件下,用无水乙醇提取在相对干燥条件下霉变的馒头,提取产物中的桔青霉素与其他组分在9min 内达到了基线分离。浓度与峰面积之间具有良好的线性关系,其迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.13%、1.6%,回收率在90%～115% 之间。此方法快速、简便、试样用量少、分离效果较高。     

加压毛细管电色谱测定甘蔗中三种多酚类化合物

为建立加压毛细管电色谱(pCEC)分离检测甘蔗中多酚类化合物绿原酸、阿魏酸、表儿茶素的方法,采用C₁₈毛细管色谱柱,以NaH₂PO₄和甲醇为流动相,优化了流动相比例、缓冲盐pH、缓冲盐浓度、分离电压、流速等色谱条件。结果表明,在流动相为15.0 mmol/L NaH₂PO₄+12.5 mmol/L庚烷磺酸钠(pH5.0)/甲醇(50:50,V/V)、分离电压为1 kV、流动相总流速为0.06 mL/min、检测波长为220 nm的色谱条件下,绿原酸、阿魏酸、表儿茶素分离较好,在20~320 μg/mL线性关系良好,相关系数分别为0.9978、0.9922、0.9971,检出限分别为0.14、0.75、1.65 μg/mL,相对标准偏差分别为2.82%、2.69%、1.18%,平均回收率分别为96.79%、100.71%、99.01%。该方法快速、准确、重复性好,适用于甘蔗中多酚类化合物的分离检测。     

毛细管电泳-电化学发光法测定荷叶中荷叶碱与莲子心中莲心碱含量

建立毛细管电泳-电化学发光法同时测定荷叶中荷叶碱与莲子心中莲心碱含量的方法。对三联吡啶钉(Ru(bpy)_3~(2+))溶液浓度、检测电位、磷酸盐缓冲液浓度和pH值、进样时间和分离电压等实验条件进行考察和优化。结果表明,在检测电位为1.20 V,运行缓冲液为10 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 5.74),5 mmol/L Ru(bpy)_3~(2+)溶液,检测池内磷酸盐缓冲液浓度为60 mmol/L(pH 8.30),进样电压为8 kV,进样时间为10 s,分离电压为13 kV,荷叶碱检出限为7.7×10~(-7)mol/L(R_(SN)-3),莲心碱检出限为7.8×10~(-7)mol/L(R_(SN)-3)。对浓度为6.8×10~(-5)mol/L荷叶碱和3.1×10~(-5)mol/L莲心碱的标准品溶液进行5次平行测定表明:荷叶碱峰面积的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为3.76%,迁移时间RSD为0.83%;莲心碱峰面积RSD为4.28%,迁移时间RSD为1.37%。该方法可用于测定荷叶中的荷叶碱与莲子心中莲心碱含量。     

苦丁茶中酚酸类化合物的HPCE分离测定

通过建立了高效毛细管电泳法同时分离测定苦丁茶中山奈酸、芦丁、没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、没食子酸、原儿茶酸等7种酚酸类物质含量的方法。对缓冲液离子浓度和pH、分离电压和毛细管温度等电泳分离条件进行了优化,结果发现在柱温25℃、电压20kV、20mmol/L pH7.5磷酸二氢钾-硼砂缓冲液的电泳条件下,可在13min内实现了7种酚酸类物质的分离检测。本方法具有较高的灵敏度,呈现较好的线性关系,r为0.9982~0.9996,迁移时间重现性为0.1557%~0.1664%,峰面积重现性为1.080%~3.466%,回收率为80.14%~93.24%。本研究采用建立好的方法测定了不同产区苦丁茶中7种酚酸类化合物的含量。     

高效毛细管电泳法快速测定乳制品中三聚氰胺

建立高效毛细管电泳快速测定乳制品中三聚氰胺含量的方法。样品用100mmol/L 醋酸提取,以150mmol/L磷酸二氢钠为分离缓冲液,以未涂敷石英毛细管(20cm(有效长度)× 50μm)为分离柱,于235nm 波长处检测,采用峰面积外标法定量。实验研究缓冲溶液的浓度、分离溶液pH 值及样品前处理条件对三聚氰胺准确定量的影响。方法检出限为0.06mg/L,定量限为0.2mg/L,线性范围为0.2～200mg/L,线性相关系数r=0.9998。1.0、10mg/L 添加水平的平均加标回收率分别为93.0% 及84.3%。该方法简单快速,6min 之内即可完成一次样品分析(预清洗2min,分离4min)且试剂消耗少、环境友好及检测准确,适合于各类乳制品中三聚氰胺的常规测定。     

毛细管电泳法直接分离测定果冻中的色素

建立毛细管电泳法直接测定果冻中亮蓝、胭脂红、柠檬黄的方法,研究缓冲溶液种类、浓度、pH值、电压等对分离的影响,并对分离条件进行优化。在波长255nm、分离电压18kV、pH8.5、5mmol/L Na2HPO4-5mmol/L Na2B4O7溶液中,亮蓝、胭脂红、柠檬黄在6min内得到了较好的分离。用于部分市售果冻样品的测定,得到较满意结果,回收率为85%～110%。     

基于荧光标记的大黄鱼氧化肌肉蛋白质双向电泳技术的建立

在确定大黄鱼肌肉蛋白质双向电泳分离的基础上,采用荧光素-5-氨基硫脲(fluorescein-5-thiosemicarbazide,FTSC)对氧化的大黄鱼肌肉蛋白质进行荧光标记和参数优化,进而建立氧化肌肉蛋白质的双向电泳技术体系。结果显示,氧化肌肉蛋白质较佳的双向电泳程序为:蛋白样品采用液氮研磨和裂解液Ⅲ(含8 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%3-(3-(胆酰胺丙基)二甲氨基)丙磺酸内盐(CHAPS)、65 mmol/L二硫苏糖醇(DTT)和0.2%载体两性电解质)制备;采用FTSC溶液40℃恒温水浴3 h,对氧化蛋白质进行荧光标记,并采用乙醇-乙酸乙酯混合溶液进行洗脱;标记后的蛋白样品采用p H 5~8的固定化p H梯度(IPG)预制胶条上样后,采用等电聚焦程序C(50 V主动水化14 h,500 V、2 h,1 000 V、1.5 h及4 000 V、1 h三段式除盐,6 000 V、0.5 h和10 000 V、1 h两段式升压,10 000 V聚焦80 000 vhr,最后500 V保持10 h)进行第1向分离,再采用12%的聚丙烯酰胺分离胶进行第2向分离;最后所得凝胶经直接荧光扫描和银染后扫描分别得到氧化肌肉蛋白质的荧光图谱和肌肉全蛋白电泳图谱。由该程序获得的双向电泳图谱具有分离度好、蛋白点清晰、分布均匀等优点,为利用双向电泳和蛋白质组学技术分离鉴定氧化蛋白质种类、进而阐明蛋白质氧化机制提供理论依据。