苦杏仁多酚氧化酶的分离纯化及部分特性分析

以苦杏仁为原料,采用(NH4)2SO4分级沉淀法对苦杏仁多酚氧化酶进行初步分离后经Sephadex G-75凝胶柱层析进一步纯化,冷冻干燥后即得苦杏仁多酚氧化酶纯品;通过凝胶电泳和热分析试验测定多酚氧化酶的相对分子质量和变性温度。结果表明:经分离纯化后苦杏仁多酚氧化酶的纯化倍数为49.03倍,该酶可能存在同工酶且相对分子质量分别约为21.9 k D和23.2 k D;苦杏仁多酚氧化酶变性温度为60.03℃。为苦杏仁加工过程中的酶促褐变控制提供部分理论参数。     

菊芋多酚氧化酶特性研究

对新鲜菊芋中提取的多酚氧化酶的特性进行了研究。结果表明：菊芋PPO其最适温度为40.60℃，最适PH为4-4～5．2；菊芋PP0在70℃以下稳定性好．而在85℃以上随温度升高和处理时间延长PPO活性迅速降低甚至失活：NaHSO3对菊芋PPO的有较强的抑制作用。     

新疆阿魏菇多酚氧化酶特性研究

以新疆阿魏菇为供试原料提取多酚氧化酶(PPO)，分别就底物浓度、pH、耐热性等方面对新疆阿魏菇PPO活力的特性进行了探讨；同时选择EDTA-2Na、亚硫酸钠、抗坏血酸、柠檬酸四种物质研究其对阿魏菇多酚氧化酶活力的抑制作用。结果表明，该酶的最适pH为6.0，具有较好的耐热性，98℃受热60s该酶全部钝化。四种物质对该酶均表现出不同的抑制作用，较强的是亚硫酸氧钠和EDTA-2Na，抗坏血酸和柠檬酸次之。     

橄榄果实多酚氧化酶特性研究

研究了橄榄鲜果中多酚氧化酶的最适温度、最适pH值及抑制剂等方面的特性,结果表明:该酶的最适温度为27℃,最适pH值为6.6,一定浓度的抗坏血酸、L-半胱氨酸、亚硫酸钠、偏重亚硫酸钾对该酶活性有明显的抑制作用。     

新疆无核白萄萄多酚氧化酶特性的研究

以新疆无核白葡萄品种为供试原料提取多酚氧化酶(pPO),分别就pH、温度、底物专一性、耐热性、底物浓度五个方面对无核白葡萄PPO活力的特性进行了探讨.结果表明,该酶的最适pH为7.2,最适作用温度为30～35℃,35℃F表现出较高的热稳定性,70℃受热20min酶活力基本稳定,80℃受热100s、100℃受热60s该酶全部钝化.该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,由高到低的顺序为邻笨二酚＞绿原酸＞焦性没食子酸＞没食子酸＞阿魏酸.     

新疆无核白葡萄多酚氧化酶特性的研究

以新疆无核白葡萄品种为供试原料提取多酚氧化酶(PPO),分别就pH、温度、底物专一性、耐热性、底物浓度五个方面对无核白葡萄PPO活力的特性进行了探讨。结果表明,该酶的最适pH为7.2,最适作用温度为30～35℃,35℃下表现出较高的热稳定性,70℃受热20min酶活力基本稳定,80℃受热100s、100℃受热60s该酶全部钝化。该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,由高到低的顺序为:邻苯二酚>绿原酸>焦性没食子酸>没食子酸>阿魏酸。     

新疆无核白葡萄多酚氧化酶特性的研究

以新疆无核白葡萄品种为供试原料提取多酚氧化酶(PPO),分别就pH、温度、底物专一性、耐热性、底物浓度五个方面对无核白葡萄PPO活力的特性进行了探讨。结果表明,该酶的最适pH为7.2,最适作用温度为30～35℃,35℃下表现出较高的热稳定性,70℃受热20min酶活力基本稳定,80℃受热100s、100℃受热60s该酶全部钝化。该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,由高到低的顺序为:邻苯二酚>绿原酸>焦性没食子酸>没食子酸>阿魏酸。      

黑脉羊肚菌多酚氧化酶特性研究

采用分光光度法420nm下分析黑脉羊肚菌多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO)特性。以黑脉羊肚菌为原料,经清洗切分后,匀浆、过滤,于4℃,12000r/min条件下离心分离,得到黑脉羊肚菌PPO粗酶液,应用于催化反应,并研究温度、底物浓度和抑制剂等对其活性的影响。结果表明:黑脉羊肚菌PPO的最适温度为30℃,最适pH7.5;其多酚氧化酶酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应动力学参数为Km=0.4769mol/L,Vmax=1.901mol/L;其中,抗坏血酸对黑脉羊肚菌PPO的抑制效果最好,亚硫酸氢钠次之,柠檬酸最弱。      

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶（PPO）的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca²⁺和Mn²⁺对蓝莓PPO有抑制作用,Cu²⁺、Mg²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。      

山楂多酚氧化酶的酶学特性研究

研究山楂多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。采用分光光度法测定PPO的酶活性,考察底物特异性、p H值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子以及抑制剂对PPO酶活性的影响。实验结果表明,山楂PPO的最适底物为邻苯二酚;最适p H值为6.5;最适温度为40℃;90℃热处理1.0 min或85℃处理1.5 min PPO酶活基本完全丧失;山楂PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=55.83 mmol/L,Vmax=98.04 U/min;Al3+对PPO酶活的抑制作用较强,Mn2+、Ca2+和Zn2+次之,Cu2+和Mg2+对PPO酶活抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;四种抑制剂对山楂PPO酶活均有一定的抑制作用,且抑制效果与抑制剂浓度呈量效关系,相同浓度下抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸L-半胱氨酸亚硫酸氢钠柠檬酸,抗坏血酸的抑制效果最为显著。     

丝瓜多酚氧化酶的分离纯化及酶学性质

从丝瓜中分离纯化出多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）,并对其部分酶学性质进行研究。采用硫酸铵分级盐析、透析、DEAE-Cellulose DE-52离子交换层析和Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析分离纯化丝瓜PPO。纯化所得酶的比活力为957.9 U/mg,纯化倍数为28.3,酶活力回收率为18.5%;十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）检测结果显示该酶蛋白呈单一条带,为单亚基蛋白,其分子质量约为67.8 kD,且无同工酶;该酶最适pH6.0,最适温度30 ℃,以左旋多巴（L-dopa）为底物,其米氏常数（Km）为1.32 mmol/L,最大反应速率（Vmax）为0.22 OD475 nm/min。     

菜豆豆荚多酚氧化酶的酶学特性研究

目的:了解菜豆豆荚多酚氧化酶(polyphenol Oxidase,PPO)的酶学特性。方法:采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)法对菜豆豆荚PPO的最适pH值、最适温度、底物专一性、激活剂及抑制剂进行研究。结果:菜豆豆荚PPO最适pH值为6.0;最适温度为30℃,且温度为30℃时,该酶具有较强的热稳定性,80℃可使其完全失活;该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,邻苯二酚为该酶的最适底物;抗坏血酸、L-半胱氨酸、β-巯基乙醇、甘氨酸均能抑制该酶的活性,而1.0mmol/Lβ-巯基乙醇或抗坏血酸可完全抑制其活性;氯化铜、尿素对该酶均有激活作用,其中氯化铜的激活作用明显。结论:高温、偏碱性环境、β-巯基乙醇或抗坏血酸处理均可有效抑制菜豆豆荚PPO活性。     

佛手瓜多酚氧化酶酶学特性研究

以佛手瓜中的多酚氧化酶为研究对象,对其酶学特性的研究表明：佛手瓜果实多酚氧化酶的最适pH 值为7.5,最适温度为30℃,底物浓度与酶活性呈正相关;该酶迅速催化焦性没食子酸的酶促氧化反应,但对邻苯二酚、对苯二酚和间苯二酚的催化活性较低。抗坏血酸、柠檬酸、四硼酸钠、MgCl2 和EDTA-2Na 对佛手瓜多酚氧化酶的抑制作用依次减弱,抗坏血酸、柠檬酸对佛手瓜多酚氧化酶的抑制作用随着浓度的升高而加强。     

毛酸浆多酚氧化酶的酶学特性研究

以毛酸浆中多酚氧化酶(PPO)为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究。结果表明,毛酸浆PPO的底物邻苯二酚的最适质量分数为0.04%;最适pH为7.0;最适温度为35℃;100℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为Km=0.025mol/L,Vmax=125U/min;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸柠檬酸L-半胱氨酸EDTA亚硫酸氢钠。     

多酚氧化酶对普洱茶渥堆发酵过程中品质变化的影响

本文探讨了添加不同浓度多酚氧化酶对渥堆发酵过程中普洱茶理化指标和感官品质的影响。实验结果表明:经不同浓度多酚氧化酶处理后的普洱茶,其部分品质成分在渥堆发酵过程中的变化差异显著(p0.01),与对照组相比,实验组的渥堆平均温度相对较高,茶多酚、儿茶素指标变化速度加快,且与多酚氧化酶的添加量呈负相关;茶黄素发酵前期生成速度加快,后期转化速度提高;茶褐素有较快积累。加入多酚氧化酶的普洱茶发酵18d后,在外形、汤色、滋味、香气、叶底等感官品质上基本具有熟茶的品质,其中1.6U/g、3.2U/g多酚氧化酶组可达到陈年普洱汤色红浓明亮,滋味醇厚回甘,香气浓郁的品质特点。本研究为缩短发酵周期,改善普洱茶品质提供新的思路和方法。     

蛋白交联中多酚氧化酶的酶源筛选及酶学性质研究

从多种植物和真菌中筛选出多酚氧化酶(PPO)活力高的原料,并对其酶学性质进行研究,以利于其在蛋白交联中的应用。双孢蘑菇和茄子中PPO 酶活相对较高,达到11004U/g 和9376U/g。双孢蘑菇PPO 和茄子PPO 的最适温度和pH 值均分别为20℃和7.0;在温度较高时,茄子PPO 比双孢蘑菇PPO 稳定性更好。Zn2+、Mn2+、Ag+对双孢蘑菇PPO 和茄子PPO 活力表现明显的抑制作用,Cu2+ 对双孢蘑菇PPO 活力表现明显的促进作用,而对茄子PPO 却有很强的抑制作用。双孢蘑菇PPO 和茄子PPO 的Km 和Vmax 分别为5.5mmol/L、1666.7U 和8.75mmol/L、2500U。     

不同金属离子对多酚氧化酶的影响

采用匀浆法从茄子中提取多酚氧化酶(PPO),以绿茶粉为底物,研究Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+、Na+、Al3+和Fe3+7种金属离子对PPO活性的影响。结果表明:Cu2+、Mn2+和Mg2+3种金属离子对PPO的活性有不同程度的促进作用,而Ca2+、Na+、Al3+和Fe3+对PPO的活性有抑制作用。其中,Cu2+浓度为3mmol/L时对PPO有激活作用,此时茶黄素总量达到7.45mg;Fe3+浓度为5mmol/L对PPO有显著抑制作用,此时茶黄素总量降低至0.26mg。     

金花茶花多酚氧化酶提取工艺研究

以金花茶花为原料,基于单因素试验结果,采用响应曲面法(response surface method,RSM)和人工神经网络模型(artificial neural networks,ANN)对金花茶花多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)的提取工艺进行优化。结果表明:RSM和ANN两种模型的决定系数R2分别为0.9922和0.9362,验证后的相对误差率分别为2.49%、1.14%。对比两种模型,ANN能够比RSM更准确地拟合模型和推导提取条件。金花茶花PPO提取最佳工艺条件为浸提时间45 min,缓冲液pH 6.35,聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone,PVP)添加量为22%。在此条件下,PPO提取量为1 805.11 U/(g·min)。该研究为金花茶花PPO活性与褐变的相关性以及抑制褐变提供基础。     

小麦多酚氧化酶(PPO)活性的基因型、环境及其互作效应的分析

选用16个有代表性的小麦品种(系)，分别在山东8个地区进行小麦多酚氧化酶(PPO)活性的基因型与环境效应分析。结果表明，在随机效应中，小麦籽粒PPO活性的品种与试点互作效应最为显著。在对面团白度性状进行选择时，既要选择多酚氧化酶(PPO)活性低的品种，又要注意选择在PPO积累低的地区种植，以实现优质品种的优质生产。     

葡萄与葡萄酒中多酚氧化酶研究进展

在葡萄与葡萄酒的加工过程中,多酚氧化酶可以引起葡萄汁和葡萄酒的氧化,尤其是白葡萄酒,严重影响了葡萄酒的品质。本文总结了葡萄中多酚氧化酶的结构和功能及其在葡萄中的分布情况,并且揭示了在葡萄酒酿造工艺中其引起氧化褐变的机制,同时介绍了影响多酚氧化酶活性的因素和多酚氧化酶抑制剂应用等的研究进展,为进一步控制葡萄酒酿造过程中多酚氧化酶引起的氧化褐变提供参考。