东海海参胶原蛋白酶解物的制备与抗氧化活性及其对神经细胞损伤的保护作用

目的:研究木瓜蛋白酶酶解东海海参胶原蛋白的最优化条件,测定酶解产物的抗氧化活性及其对神经细胞损伤的保护作用。方法:以水解度为指标,通过响应面法优化东海海参胶原蛋白的酶解条件,确定最佳酶解参数。通过测定酶解产物对超氧自由基、羟基自由基和DPPH自由基的清除能力,研究其抗氧化能力。通过测定SK-N-SH神经细胞的存活率并进行形态观察,研究酶解产物对由H2O2造成的神经细胞损伤的保护作用。结果:木瓜蛋白酶酶解东海海参胶原蛋白的最佳条件为:底物含量34.3 g/g酶,温度43.2℃,pH 7.12,在该条件下东海海参胶原蛋白的水解度为16.73%。东海海参胶原蛋白酶解产物对超氧自由基、羟基自由基和DPPH自由基具有较好的清除作用,且与其浓度呈剂量依赖关系。酶解产物清除上述3种自由基的IC50值分别为34,25和24 mg/mL。胶原蛋白酶解产物对由H2O2造成的神经细胞SK-N-SH的损伤具有较好的保护作用。结论:研究结果为东海海参胶原蛋白的开发和利用奠定了良好基础。     

东海海参胶原蛋白酶解工艺研究

主要研究从东海海参中提取胶原蛋白的工艺以及胶原蛋白酶解的条件优化.以干东海海参为原料,采用酸碱溶液浸泡除去东海海参表面的钙质及非胶原物质,然后在酸性条件下用1%胃蛋白酶进行水解,提取胶原蛋白;分别探讨木瓜蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶酶解胶原蛋白的最佳条件.结果表明:木瓜蛋白酶最适条件:底物含量30 g/g酶.温度40℃,pH 7.5;风味蛋白酶最适条件:底物含量40 g/g酶,温度40℃,pH 7.5;胰蛋白酶最适条件:底物含量40 g/g酶,温度55℃,pH 9.0.复合酶水解的最佳工艺:风味蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比1:1,木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的质量比3:1,风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比1:1.     

即食东海海参产品贮藏稳定性研究

东海海参是一种低脂肪、富含胶原蛋白和微量元素的动物性食品,具有较高的食用价值和保健功效。目前,该资源还没有得到充分的开发和利用。以东海海参干品为研究对象,通过脱皮和调味处理,加工成即食海参,探讨了即食东海海参产品的贮藏稳定性。研究发现,防腐剂的添加可以有效提高产品保质期。在0℃的贮藏条件下,采用高温杀菌(95℃、20 min)处理,未添加防腐剂的产品保质期为35 d,添加防腐剂后产品保质期为50 d。     

东海海参多糖酶解提取工艺优化及其抗氧化活性

以东海海参（Acaudina leucoprocta）干品为原料，探究东海海参多糖的最佳提取工艺，并评价其基本组成及抗氧化活性。利用单因素试验考察木瓜蛋白酶的酶解温度、酶解时间、酶添加量、料液比对东海海参多糖提取率的影响，利用正交试验设计对工艺参数进行优化，利用红外光谱对得到的东海海参多糖进行鉴定，并检测东海海参多糖对DPPH·和·OH的清除率，考察东海海参多糖的抗氧化性。结果表明，各因素对多糖提取率的影响大小顺序为酶添加量>酶解时间>酶解温度，优化的最佳提取工艺为料液比1∶20(g/mL)、酶解温度55℃、酶解时间5 h、酶添加量1.0%，此条件下，东海海参多糖提取率为（11.85±0.27）%；东海海参多糖对DPPH·和·OH的清除效应随其浓度增加而提高。结果表明，东海海参多糖具有较强的抗氧化活性。     

即食东海海参休闲食品加工工艺

以东海海参干品为原料,通过改良传统的加工方法,确定了东海海参即食产品的加工新工艺。先将东海海参进行脱皮处理,选择盐腌为脱水方式,进行调味处理,通过感官评价进行单因素和正交优化实验,确定食盐添加量为东海海参肉重的2.50%,白砂糖添加量为海参肉重的3.50%,腌渍时间为1.00 h。封装后杀菌,杀菌方式采用热杀菌,95℃加热20 min,所得产品质量最好。即食东海海参基本营养成分分析结果显示,水分、灰分、粗脂肪、粗蛋白与鲜海参含量基本一致。质构参数则与鲜海参差异显著,其中硬度、咀嚼性和回复性有大幅度的降低,黏附性、凝聚性的变化不明显,弹性有小幅上升。在微生物检测中,即食东海海参产品的细菌总数(CFU/g)≤1 000,大肠菌群(MPN/100 g)≤30,未检出致病菌。     

东海乌参重金属脱除工艺的研究

东海乌参是众多海参品种中的重要一类,资源丰富,营养价值高,但其体壁重金属含量高,不能被充分开发利用.为探索东海乌参体表重金属的脱除方法,研究了各种重金属在东海乌参体壁上的分布状况,并分别采用化学法和酶-化学法脱除东海乌参体表重金属,对浸泡试剂和温度、酶类型和用量、处理时间等工艺条件进行优化,结果发现,采用酶-化学法脱除重金属,从外观品质和脱除效果上,都优于化学法.最优的脱除条件是采用0.10％(w/w)的木瓜蛋白酶,在37℃酶解1h,再用2.0％(w/v)食品级柠檬酸浸泡48h.经过酶-化学法处理后的东海乌参重金属脱除率可达90％以上.     

胡椒酶法搅拌脱皮的工艺优化

采用果胶裂解酶和植物水解酶对新鲜胡椒脱皮处理,研究优化的脱皮工艺条件。以脱皮率为参考指标,进行两种酶液的复配实验,在单因素实验的基础上,通过正交实验对酶法搅拌脱皮工艺进行了优化,比较了酶法搅拌得到的白胡椒与其他浸泡方式得到的白胡椒品质。结果显示果胶裂解酶和植物水解酶以体积比3∶2脱皮效果最好,优化后的酶处理工艺为:酶液浓度为2.0%,温度为45℃,转速为150 r/min,烫漂时间为5 min。经验证,酶法搅拌3 h,脱皮率为97.6%。与传统水沤法和生物酶法浸泡得到的白胡椒相比,脱皮时间明显缩短,白胡椒香味浓,色泽灰白,无异臭味。     

东海海参胶原蛋白多肽的制备及清除自由基功能研究

以东海海参为原料,采用酶法提取胶原蛋白。选取木瓜蛋白酶、风味蛋白酶以及复合酶(木瓜-风味),在其最佳水解条件下水解,以自由基清除率为指标,确定最佳水解时间及酶种类。研究结果表明,用木瓜蛋白酶水解4 h得到的多肽清除自由基的能力最强,清除率在70%以上;多肽清除羟自由基和超氧自由基的IC50分别为27.8mg/mL和49.3mg/mL。通过超滤处理及DEAE琼脂糖离子交换柱(DEAE Sepharose FF)分离纯化抗氧化肽,得到分子质量小于5kDa的肽,其功能性最强。利用HPLC测定该肽的氨基酸含量,结果显示该肽段以甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)、天冬氨酸(Asp)、精氨酸(Arg)、丝氨酸(Ser)和苏氨酸(Thr)为主。     

响应面法优化海参胶原蛋白肽的制备条件

以海参体壁为原料,研究酶解法制备海参胶原蛋白肽的工艺条件.通过单因素试验和响应面分析对酶解工艺条件进行优化.结果表明,酶解法制备海参胶原蛋白肽的最佳工艺条件为:以木瓜蛋白酶为水解酶,控制酶解温度67.8℃、酶解时间4 h、酶加量2 500 U/g、pH值6.7、底物浓度5.5%,该条件下,海参胶原蛋白肤的水解度为17.76%.     

酶法提取金针菇多糖的研究

研究了酶法提取金针菇多糖的最佳工艺条件,采用木瓜蛋白酶处理,对酶量、作用温度、最适pH、作用时间进行正交试验。确定了酶法提取金针菇多糖的最佳工艺:酶解反应的温度为55℃,酶浓度为0.6%,pH为7.0,反应时间为3 h,提取率可以达7.6%。