高效液相色谱法测定猪肾脏中赭曲霉毒素A

建立高效液相色谱法测定猪肾脏中赭曲霉毒素A(OTA)的含量。采用免疫亲和柱净化,Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-2%乙酸为流动相,激发波长(λem)为332 nm,发射波长(λex)为460 nm。结果显示,赭曲霉毒素A在0.1 ng/mL~10 ng/mL范围内线性关系良好(R~2=0.999 9),平均加样回收率为77.3%~84.4%,平均相对标准偏差(RSD)为0.8%~1.3%。该方法简便、准确性好、灵敏度高,可用于猪肾脏中赭曲霉毒素含量的测定。     

酶联免疫吸附法快速检测饲料中赭曲霉毒素A

目的建立一种酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测饲料中赭曲霉毒素A快速的方法。方法样品采用60%的甲醇溶液提取,提取液经过离心、快速滤纸过滤后,用稀释缓冲溶液按10倍的比例对提取液进行稀释即为试样液,采用酶联免疫吸附方法进行检测。结果在加标浓度为25、50和100μg/kg的加标水平下,赭曲霉毒素A在饲料中的加标回收率为88.4%~134.6%,变异系数为3.5%~6.9%。抽取10份样品进行检测,赫曲霉毒素A含量在14.1~38.2μg/kg。符合国家的标准GB 13078-2017对饲料中赫曲霉毒素A含量的规定。结论本方法灵敏度高、快速简便,适用于饲料中赭曲霉毒素A的快速批量检测。     

椰子粉、脆香米、麦提莎、葡萄干中赭曲霉毒素A的测定

本文建立HPLC—FLD测定椰子粉、脆香米、麦提莎、葡萄干中赭曲霉毒素A的方法,标准品回归曲线为0．9994,样品加标回收率在94．87％－105．3％,阳性样品测定结果RSD 1．83％,最低检出限0．28μg／kg,定量限0．92μg／kg,满足现行国家标准检测要求。     

大麦中赭曲霉毒素A的检测及免疫亲和柱重复使用的研究

本研究采用免疫亲和柱净化、高效液相色谱定量等方法,在国内开展啤酒大麦中赭曲霉毒素A(OTA)检测研究。向啤酒大麦中加入标准品,加标范围0.1～10.0μg/kg之间,加标回收率为93.15%～97.07%,相对标准偏差是0.54%～2.19%,检出限0.05μg/kg。实验研究表明,OTA浓度在0.1～10.0μg/kg之间时,免疫亲和柱可以重复利用,并且回收率≥92%,回收效果较好。     

高效液相色谱法测定酒中的赭曲霉毒素A

研究了单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定酒中赭曲霉毒素A的方法。脱气后的酒类样品用1%PEG和5%NaHCO3的水溶液稀释,然后通过Ochra Test免疫亲和柱净化,净化液经Hypersil BDS C18柱反相色谱柱分离、荧光检测器检测、外标法定量。对添加不同含量的赭曲霉毒素A进行6次反复实验,得其平均回收率为92.8%-99.5%,RSD%〈10,最低检测限为0.04ng/mL,线性范围为0.1-10ng/mL。     

粮食中赭曲霉毒素A的快速定量检测-超高效 液相色谱法

建立了免疫亲和柱净化-超高效液相色谱法快速定量测定粮食中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)的检测方法。样品经提取后,用免疫亲和柱净化、浓缩, Waters Acquity UPLC BEH C₁₈(50 mm?2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱分离,以乙腈∶水∶冰醋酸(体积比 100∶98∶2)为流动相,流速为0.2 mL/min,进样量为1μL,用Acquity荧光检测器激发波长为310nm,发射波长为465 nm处进行检测,赭曲霉毒素A的保留体积小于1.15mL,从样品前处理到分析整个过程小于45 min。根据3倍信噪比的峰响应值,确定赭曲霉毒素A的检出限为0.25pg,在1～50.0 pg范围内呈线性相关,相关系数R₂值为0.998;在小麦、玉米、稻谷样品中加标回收率分别为81.5%～101.2%,81.3%～85.5%,87.8%～97.5%,精密度为3.3%～6.4%。本方法简便快速、灵敏度高、重现性好、溶剂用量少,适用于粮食中赭曲霉毒素A的快速测定。     

高效液相色谱-串联质谱法检测茶叶中的 赭曲霉毒素A

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用技术检测茶叶中赭曲霉毒素A(OTA)的方法。方法用甲醇-2%Na HCO3溶液(60:40,V:V)提取样品中的赭曲霉毒素A,采用免疫亲和柱对茶叶中的赭曲霉毒素A净化,使用甲醇-5 mmol/L乙酸铵(含0.1%乙酸)为流动相,检测赭曲霉毒素A,采用正离子模式。结果本方法中赭曲霉毒素A在0.5~10 ng/m L质量浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.996),回收率在83.6%~92.5%之间,相对标准偏差在6.5%~9.1%之间,检出限为0.1μg/kg。结论该方法准确性好、灵敏度高,适用于茶叶样品的检测。     

食品中赭曲霉毒素A检测方法研究进展

赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA)是曲霉属和青霉属等有毒真菌产生的一类次级代谢产物,是常见污染食品的五大真菌毒素之一,具有较强的肾毒性、肝毒性、神经毒性和免疫毒性,以及致畸、致癌和致突变作用。OTA广泛存在于各种谷物及其制品、葡萄与葡萄酒、咖啡等多种食品原料及其成品中,严重威胁人体健康,因此有必要建立快速、准确、灵敏的OTA检测方法。针对食品中OTA的检测,目前已经拥有许多方法,如薄层色谱法,高效液相色谱法,液相-质谱联用法以及酶联免疫吸附法等。本研究对赭曲霉毒素A不同检测方法的原理、优缺点等进行归纳总结,旨在为食品中OTA的检测提供支持。     

赭曲霉毒素A单克隆抗体免疫亲和柱的制备

制备了赭曲霉毒素A(OTA)单克隆抗体免疫亲和柱,并用间接竞争ELISA和HPLC法评价了免疫亲和柱的性能,其柱容量(结合OTA的能力)约为200ng,加标回收率为90.38%～100.1%,可反复使用3次。 建立了免疫亲和柱-HPLC联用分析谷物中OTA的方法,最低检出限为0.2μg/kg,线性范围为0.6～400μg/kg,OTA加标量为1～10μg/kg时谷物样品中的回收率为78.7%～87.1%,变异系数小于6.5%。用此法检测了大米、小麦、玉米和玉米饲料等15份市售样品,检出率为46.7%,其中OTA的最高含量为0.785μg/kg。     

化学发光免疫分析方法检测粮食谷物中赭曲霉毒素A残留

目的建立粮食谷物中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)残留检测的化学发光免疫分析方法。方法人工改造OTA半抗原、制备包被原和多克隆抗体工作液,优化检测步骤,验证各项评价指标,比较化学发光免疫分析方法和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)的实际样本检测结果的一致性,以此来实现化学发光免疫分析方法的建立。结果 50%抑制浓度(IC_(50))为0.278μg/L;OTA的最低检出限为5.0μg/kg,样本添加回收率在65.4%到115.8%之间,批内、批间相对标准偏差15%。同时,通过对实际样本检测,证明化学发光免疫分析方法具有显著的准确度和可靠性。结论基于化学发光免疫分析方法能够实现粮食作物中的OTA残留的快速检测,灵敏度高、成本低、时间短,为食品中霉菌毒素残留的快速检测提供了新的技术参考。     

赭曲霉毒素A的检测方法的研究进展

赭曲霉毒素(OTA)是烈性的肾脏毒和肝脏毒,并具有致癌、致畸和致突变性。建立相关检测方法对防止OTA进入人类食物链具有重要意义。本文针对OTA的三种检测方法：薄层层析法、高压液相色谱法、酶联免疫吸附法做一综述。     

以赭曲霉毒素A单克隆抗体建立竞争酶联免疫吸附分析方法的研究

本研究通过活性酯法合成赭曲霉毒素A人工抗原，免疫小鼠制备单克隆抗体，在此基础上建立了竞争ELISA检测方法，线性范围为200-6000pg／ml，检测下限为150pg／ml。单抗与赭曲霉毒素B的交叉反应率为35％，与桔霉素、黄曲霉毒素B1和展青霉素等毒素交叉反应低于0．01％。在小麦样品中的加标回收率为83％～116％，变异系数为9.4％-19．8％。测试23份样品，赭曲霉毒素A的含量在0．6～2．56μg／kg之间。     

基于荧光传感器检测食品中赭曲霉毒素A的研究进展

赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)是曲霉菌属和青霉菌属产生的一种次级代谢产物,具有较强的肾毒性、肝毒性、神经毒性和免疫毒性.因其较为稳定的物理化学性质,使其在食品加工过程中难以被有效去除.OTA广泛存在于谷物、葡萄等多种食品原料及其制品中,严重威胁人体健康.近年来,光学传感器作为生命科学领域中的研究热点,...     

免疫学法检测赭曲霉毒素A研究进展

赭曲霉毒素A是曲霉属和青霉属某些真菌次级代谢产物,其毒性大、污染范围广、与人类健康关系密切。对赭曲霉毒素A检测是利用其本身荧光特性进行高灵敏度荧光检测,易受其它本底物荧光干扰,造成检测周期长,成本高;免疫化学分析具有高度特异性、灵敏性和快速简便等优点,在赭曲霉毒素A检测中应用广泛,其中,免疫传感器具有独特专一性和选择性,在赭曲霉毒素A检测领域能发挥更大优势。     

赭曲霉毒素A检测方法的研究进展

赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA)是一种具有极端毒性、污染广泛及危害严重的次级代谢产物。由于赭曲霉毒素A具有这些特点且食品安全问题越来越被人们广泛关注, 所以确定食品和商品中的OTA污染水平非常重要。目前对于OTA的检测, 已经建立了非常多的分析手段, 如薄层色谱法(thin layer chromatography, TLC)、高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)、酶联免疫技术(enzyme linked immunosorlent assay, ELISA)、时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)等。本文综述了多种赭曲霉毒素A的检测分析方法, 简介了它们的优缺点及研究进展, 并进行了比较, 以期为食品中赭曲霉毒素A的检测研究提供一些参考。     

免疫亲和层析净化高效液相色谱测定赭曲霉毒素A的方法研究

试样经甲醇-水或碳酸氢钠-水溶液提取,提取液稀释过滤后经过含有赭曲霉毒A特异性抗体的免疫亲和柱层析净化,洗脱液用C18(150×4.60mm,5μm)色谱柱分离,荧光检测器测定。流动相为乙腈:水:乙酸为99:99:2;激发波长333nm;发射波长477nm;柱温35℃;进样量100μl;外标法定量,结果表明,色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系,方法的检出限为0.2μg/kg,加标回收率为90.3%～106%,对不同浓度的样品相对标准偏差RSD为1.75%～4.32%。该方法操作简便、准确,回收率高、精密度良好、重现性好,可用于谷物、酒类、调味料等产品中赭曲霉毒素A的测定。     

全自动免疫亲和在线净化—高效液相色谱法快速测定粮食中赭曲霉毒素A

建立了全自动免疫亲和在线净化-高效液相色谱法快速测定粮食中赭曲霉毒素A(Ochtatoxin A,OTA)的方法。玉米、小麦样品经乙腈-水(60:40,V:V)提取,3%Tween-20(m/V)水溶液10倍稀释后,用自动进样器注入RIDA~? REST在线固相萃取系统,经赭曲霉毒素A免疫亲和小柱净化后,以乙腈-2%乙酸水(50:50,V:V)为流动相,流速为1.0 mL/min,C18色谱柱(150 mm×3.5 mm,3.5μm)分离,荧光检测器测定。根据3倍信噪比的峰响应值,确定赭曲霉毒素A的检出限为0.24μg/kg,在0.012 5～0.5μg/L范围内呈线性相关,R~2值为0.999 8;在玉米、小麦样品中加标回收率为80.1%～106.9%,变异系数为2.4%～8.2%。本方法一次装柱可检测60个样品,24 h可检测100个样品,满足谷物中赭曲霉毒素A快速准确定量检测的需要。     

抗赭曲霉毒素A多克隆抗体的制备

为了制备赭曲霉毒素A多克隆抗体,采用戊二醛法合成赭曲霉毒素A-BSA人工抗原,通过紫外扫描法鉴定半抗原与载体蛋白偶联效果.合成的人工抗原用弗氏佐剂乳化后免疫Balb/c小白鼠,4次免疫后眼球下缘采血,分离血清.试验结果表明,免疫后产生了抗赭曲霉毒素A-BSA的特异性多克隆抗体,抗体效价为1:8100,赭曲霉毒素A的最低...     

酶联免疫法检测赭曲霉毒素A在浓香型白酒生产中的变化

本研究采用酶联免疫法对泸州老窖大曲、入窖酒醅、丢糟、黄水、基酒、成品酒中的赭曲霉毒素A的含量进行检测,结果表明:此法检测灵敏度为0.3μg/kg,相对标准偏差在1.497%-3.369%之间,平均回收率达96.4%,浓香型白酒生产各个环节的样品中赭曲霉毒素A的含量远低于国内外食品行业的限量标准,并由此初步验证得知赭曲霉毒素A在浓香型白酒生产中是安全的。     

不同品牌酶联免疫吸附法试剂检测饲料中赭曲霉毒素A的研究

对酶联免疫方法试剂盒检测饲料中赭曲霉毒素A进行验证,通过不同品牌试剂盒方法进行对比,可知,在线性关系、回收率、精密度和抗干扰等方面,品牌P试剂盒方法较好,能够作为乳制品企业快速筛查饲料的一种定量检测方法。