甘肃河西走廊葡萄酒产区本土酒酒球菌发酵耐受性分析

为筛选出具有良好发酵耐受性的本土酒酒球菌(Oenococcus oeni),以甘肃河西走廊葡萄酒产区分离鉴定的7株O. oeni为供试菌株,分别对其进行pH值、乙醇、SO₂质量浓度和发酵温度等酿造因素的耐受性考察,选择耐受性较好的菌株进行复合因素(pH值×乙醇×SO₂质量浓度)适应性分析。结果表明,7株本土O. oeni发酵耐受性存在差异,且同一菌株对不同因素的抗胁迫性也不相同;菌株MG-1、MG-7、QL-11、ZX-1在pH 3.2、乙醇体积分数14%及SO₂质量浓度40 mg/L条件下均可生长增殖;影响菌株MG-1和MG-7生长的因素主次为乙醇体积分数>SO₂质量浓度>pH值,影响菌株QL-11和ZX-1生长的因素主次为乙醇体积分数>pH值>SO₂质量浓度。综合分析,供试菌株中ZX-1的发酵耐受性最强,其次为菌株MG-1、MG-7和QL-11,均具有一定的产业化应用潜力。     

甘肃河西走廊产区本土酒酒球菌对赤霞珠干红葡萄酒香气品质的影响

酒酒球菌(Oenococcus oeni)启动的苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)是酿造高品质葡萄酒的必需工艺,随着L-苹果酸逐渐转化为L-乳酸,葡萄酒的口感及香气均有明显改善和提升。为探究本土酒酒球菌诱导MLF对赤霞珠干红葡萄酒香气品质的影响,以甘肃河西走廊产区分离鉴定出的本土O.oeni为供试菌株,采用GC-MS检测MLF后酒样中的挥发性香气化合物,结合感官分析探讨其对香气品质的影响。结果表明,4株本土O.oeni均具有良好的L-苹果酸降解能力,但相互间却表现出一定的差异; QL-11菌株MLF后的干红葡萄酒中酯类、醇类化合物种类(分别为35、19种)均高于其他菌株发酵酒样,且香气物质总含量(15.16 mg/L)最高,感官分析呈现浓郁的花香、果香味,与商品菌OMEGA发酵酒样的香气特征差异明显,具有酿造代表产区风格葡萄酒的应用潜力。     

葡萄酒中的酚类化合物及其对酒酒球菌生长的影响研究进展

本文综述了葡萄酒中酚类化合物的组成、特性及功能,并就有关酚类化合物对酒酒球菌生长的影响及酒酒球菌对酚类化合物的代谢进行了综述,以期为酒酒球菌苹果酸-乳酸发酵提供理论依据和指导。     

中国葡萄酒产区酒酒球菌种质资源遗传多样性分析

为了解我国葡萄酒产区酒酒球菌种质资源遗传多样性,对22 株筛选自我国不同葡萄酒产区的乳酸细菌进行了种特异性聚合酶链式反应（species-specific polymerase chain reaction,PCR）分析、16S rRNA序列分析和扩增片段长度多态性分析（amplified fragment length polymorphism,AFLP）基因分型。种特异性PCR和16S rRNA序列分析表明22 株分离株为酒酒球菌（Oenococcus oeni）。建立了O. oeni基于HindⅢ和MseⅠ为内切酶的AFLP分析体系,对16 对引物组合进行了筛选,结果表明HT-MA、HT-MT、HT-MC、HG-MA、HG-MT、HC-MT为O. oeni AFLP分析的最佳引物组合,且实验重复性在98%以上。对O. oeni的AFLP分析结果显示：22 株O. oeni分为3 个簇群,且簇群间遗传相似性系数较小。所以,以HindⅢ和MseⅠ为内切酶的AFLP技术是研究O. oeni基因分型的有效方法,我国葡萄酒产区的O. oeni具有丰富的遗传多样性,O. oeni菌株间的遗传相似性系数不仅仅与其生态地理分布有关,可能还与其所处的微生态和其他因素有关。     

酒酒球菌在葡萄酒中的应用研究进展

酒酒球菌（Oenococcus oeni,O.oeni）是葡萄和葡萄酒中主要的乳酸菌种类,它是一种营养缺陷型细菌,能够在葡萄酒恶劣条件下生存,在葡萄酒苹果酸-乳酸发酵（malolactic fermentation,MLF）中担任主要角色,是葡萄酒最终风味的塑造者。为了进一步提高酒酒球菌在葡萄酒酿造工业中的应用,该文从酒酒球菌菌株分离筛选和鉴定,及其对葡萄酒酿造的有益作用,葡萄酒酿造过程对酒酒球菌的影响以及酒酒球菌在分子生物学方面的研究进展进行归纳和展望。     

不同发酵条件对模拟葡萄酒中酒酒球菌柠檬酸代谢的影响

以酒酒球菌31-DH进行模拟酒苹果酸-乳酸发酵,使用离子排斥色谱法测定相关代谢物质的含量,研究苹果酸-乳酸发酵期间及发酵后p H、乙醇和葡萄糖对柠檬酸代谢的影响。结果表明:该方法耗时短、前处理简单、分离度良好、回收率为87%¹08%、精密度为0.77%⁴.33%,满足分析要求。当发酵液处于低p H,高酒精度,低葡萄糖浓度时,柠檬酸代谢缓慢,乳酸、乙酸及2,3-丁二醇的产量较低,双乙酰含量峰值较高。当发酵液中不含有乙醇时,苹果酸、柠檬酸、葡萄糖代谢迅速,伴随菌体的大量生长,乳酸、乙酸、2,3-丁二醇含量较高,但无双乙酰的产生。当发酵液中不含有葡萄糖时,柠檬酸代谢速率加快,乳酸产量较低,2,3-丁二醇及双乙酰产量较高。p H、乙醇、葡萄糖均显著影响酒酒球菌31-DH对柠檬酸的代谢。      

酒类酒球菌分离培养基研究

研究了9种乳酸菌培养基对酒类酒球菌的分离培养效果。结果表明，ATB，改良MRS培养基对酒类球菌的相对鉴别力（ROF值）最高；在以上2种培养基中添加50mg/L放线菌酮能有效地报制酵母菌的生长，可以用于酒类酒球菌分离。     

酒类酒球菌对葡萄酒中相关物质代谢的影响

酒类酒球菌是触发葡萄酒苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)的主要乳酸菌,其代谢产物如乳酸、乙酸、双乙酰、乙偶姻、生物胺等对葡萄酒的感官品质有重要作用。本文对酒类酒球菌在葡萄酒MLF过程的代谢情况进行总结,阐述糖、有机酸、含氮物质和酚类化合物的代谢情况,以及在不同影响因素下酒类酒球菌生长和代谢途径的改变状况,已经证明pH值、SO2、乙醇体积分数、葡萄糖/果糖比等都是影响代谢的因素。随着研究的不断深入,酚类化合物在代谢中的作用也受到越来越多的关注。酚类化合物一方面通过刺激或者抑制酒类酒球菌的生长而间接影响MLF的进行;另一方面,不同的酚类物质也会影响细菌对其他酚类的代谢,从而影响葡萄酒的口感和质量。通过全面综合了解酒类酒球菌在葡萄酒中的代谢情况有助于更好地调控MLF过程。     

新疆葡萄酒产区优良酒类酒球菌的分离、鉴定

为了分离筛选出适合葡萄酒酿造的优良酒类酒球菌(Oenococcus oeni)菌株,从我国新疆葡萄酒产区分离纯化出30株酒类酒球菌,依据形态特征、生理生化特性,它们均被鉴定为酒类酒球菌。分别对其进行单因子(pH值、酒精、SO2)耐受性实验,选出单因子抗性较好的9株菌进行复合因子(pH值×酒精×SO2)耐受性实验,结果表明,有3株酒类酒球菌具有较好的发酵适应性。最后通过Species-specific PCR以及16S rRNA序列同源性分析对其进行验证,并构建相应的系统发育树,系统发育分析表明所筛菌株与酒类酒球菌的同源性均达到了99%以上,说明本实验所筛选的9株性能较好的菌株均为酒类酒球菌。     

宁夏酿酒产区酒酒球菌的快速鉴定及其PCR体系的优化

运用基于酒酒球菌16SrRNA高度保守序列设计的特异引物,通过对实验室保存优良酒酒球菌菌株的扩增验证,实现了对筛选自宁夏产区的未知苹果酸乳酸细菌的快速、可靠鉴定。通过对影响特异引物PCR反应体系的主要因素进行优化,建立了适合于实验室的特异引物扩增反应体系。结果表明:实验室保存酒酒球菌菌株均能扩增出唯一的、清晰的、大约995bp的条带,未知菌株通过扩增证明均为酒酒球菌;建立的特异引物扩增体系为:50μL的反应总体积,2.5UTaq酶、200μmol/LdNTP、0.2μmol/L上/下游引物、2.0mmol/LMg2+、DNA模板40ng。     

The influence of malolactic fermentation and Oenococcus oeni strain on glycosidic aroma precursors and related volatile compounds of red wine

Free and glycosidically bound volatile compounds of red wine were measured after malolactic fermentation (MLF) with four different commercial starter cultures of Oenococcus oeni. MLF resulted in a significant decrease in the concentration of total glycosides, expressed as phenol‐free glycosyl glucose. Gas chromatographic analyses of wine enzyme hydrolysates showed that the extent of hydrolysis of glycosides during MLF was dependent on both bacterial strain and chemical structure of the substrate. The highest decrease was observed for glycosidic precursors of primary terpene alcohols. Glycoside‐related aroma compounds such as linalool, farnesol, and β‐damascenone were increased after MLF with all the bacterial strains tested. Two of the strains were also able to release significant amounts of vinylphenols during MLF. Copyright © 2006 Society of Chemical Industry     

酒类酒球菌新菌株苹果酸-乳酸发酵条件的研究

酒类酒球菌(Oenococcus oeni)普遍应用于葡萄酒生产中,它可以触发苹果酸-乳酸发酵,促进葡萄酒中的苹果酸转化为乳酸,降低总滴定酸,提高酒体生物稳定性,改善酒体口感。本文针对3株自主筛选的酒类酒球菌,研究了酒精度、pH、SO2浓度、发酵温度、接种量等因素对葡萄酒苹-乳发酵过程的影响。     

昌黎产区酒类酒球菌（Oenococcus oeni）的遗传多样性及系统发育分析

对我国昌黎产区5 家具有代表性酒庄进行酒类酒球菌（Oenococcus oeni）菌株的分离,采用Species-specific聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）鉴定O. oeni,运用荧光标记扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism,AFLP）技术进行分子遗传学研究。结果表明：在分离具有表型差异的226 株葡萄酒乳酸菌中,通过Species-specific PCR,鉴定出222 株O. oeni。对分离的O. oeni菌株进行荧光标记AFLP分析,结果显示,经筛选的荧光标记选择性扩增引物可将222 株O. oeni分为221 个AFLP遗传型,其相似性系数在74%～98%。在81.7%的相似性水平上,分离菌株存在2 个主要的进化类群。分离自同一酒庄的O. oeni菌株种群形成了独特的簇群结构,呈现出遗传发育和分离起源的典型特异性关系,证实了O. oeni资源是葡萄酒“风土”的重要组成之一。本研究证实了昌黎产区存在丰富的O. oeni资源,且不同酒庄分离的O. oeni菌株种群呈现出遗传特异性,这为开发我国具有地域特色的O. oeni资源提供了技术和理论支持。     

葡萄酒中酒类酒球菌的分离——抑制剂对酵母菌生长的抑制效应

从葡萄酒中分离酒类酒球菌时 ,酵母菌是最主要的干扰菌。作者通过在ATB和改良MRS琼脂培养基中添加放线菌酮、山梨酸和制霉菌素 ,研究了不同抑制剂对酵母生长的抑制效应。结果表明 ,采用ATB + 5 0mg/L放线菌酮、改良MRS + 5 0mg/L放线菌酮、改良MRS + 10 0mg/L山梨酸、改良MRS + 5 0mg/L制霉菌素选择性培养基 ,能够完全抑制酿酒酵母的生长。     

Differentiation of Australian wine isolates of Oenococcus oeni using random amplified polymorphic DNA (RAPD)

Intraspecific variation of Oenococcus oeni , the preferred lactic acid bacteria species for inducing malolactic fermentation in wine, was studied using the randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) strain fingerprinting technique. Ten of fifteen isolates of O. oeni from Australian wineries situated in different wine regions could be distinguished by the RAPD technique. Strains of O. oeni which originated from the same winery were either indistinguishable or closely related to each other. Six different commercially available O. oeni strains could be differentiated with the four RAPD primers used and their genetic similarity determined. Analysis of O. oeni present in wines from a single source of fruit (Cabernet Sauvignon, vintage 2002) that underwent spontaneous malolactic fermentation revealed wide genetic variation amongst the isolates. Each fermentor contained several different O. oeni strains, which were present throughout alcoholic and malolactic fermentation. These data highlight the sensitivity of RAPDs when suitable primers are applied to O. oeni of unknown genetic origin, thus enabling O. oeni strains with desirable sensory and fermentation properties to be genetically analysed.     

酒酒球菌（Oenococcus oeni）相关生物组学研究进展

酒酒球菌（Oenococcus oeni）是触发葡萄酒苹果酸-乳酸发酵的主要微生物,而苹果酸-乳酸发酵有利于提高葡萄酒品质,为了进一步提高酒酒球菌在葡萄酒酿造工业中的应用,通过各种生物组学方法来探究酒酒球菌的生物调节和代谢体系是必要的。本文对不同生物组学的研究手段进行汇总,并对其在酒酒球菌相关研究中的应用进行归纳和展望。     

酒酒球菌抗酸相关基因RAPD标记的筛选

对影响RAPD 反应体系的主要因素进行优化,建立适合本实验室的RAPD 反应体系。在此基础上以33 株抗酸性酒酒球菌和9 株酸敏性菌株为试材,采用BSA 法和RAPD 技术,通过对45 个随机引物的筛选以及在单菌株中的筛选验证,最终获得与酒酒球菌抗酸性状相关的3 个RAPD 标记：S40-1400、S333-2500、S333-650。