卵白蛋白多肽的酶解制备及抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除率和水解度为指标,采用碱性蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化活性肽,考察底物质量分数、酶解时间、加酶量、温度等因素对制备的影响。正交实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳水解条件为:底物质量分数4%、酶解时间6h、加酶量5500U/g,温度65℃,此条件下DPPH自由基清除率达到96.92%、水解度为57.14%。酶解时间对DPPH自由基清除率的影响最大,而底物质量分数对水解度的影响最大。      

小米多肽酶解工艺及其抗氧化和ACE抑制活性

以小米蛋白为原料,制备具有抗氧化活性和血管紧张素转移酶(ACE)抑制活性的食源性多肽。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解小米蛋白,选取最优酶解工艺。选用碱性蛋白酶酶解4 h,得到的蛋白水解液分别通过3 ku和10 ku的超滤膜,得到分子质量＜3,3~10 ku和＞10 ku的3种组分,测定其抗氧化活性和ACE抑制活性。结果表明:采用碱性蛋白酶酶解4 h得到的蛋白水解液经超滤后得到分子质量＜3 ku的多肽具有最高的抗氧化活性和ACE抑制活性,其DPPH清除能力为38.44%,ABTS自由基清除能力为81.62%,羟基自由基清除能力为68.49%,ACE抑制活性为87.53%。此方法得到的多肽分子质量小,功能氨基酸含量较高,具有良好的抗氧化活性和ACE抑制活性。本研究结果为抗氧化肽和ACE抑制肽的开发提供试验依据,对未来工业化的发展提供理论参考。     

巴旦木蛋白水解物的制备及其抗氧化活性

以巴旦木蛋白为底物,采用正交试验优化碱性蛋白酶水解巴旦木蛋白的条件,研究巴旦木蛋白肽的还原能力、对羟自由基、超氧阴离子自由基以及二苯代苦味酰基自由基的清除能力。结果表明:最优酶解工艺参数为底物浓度20%、酶浓度4%、pH值9.5、酶解温度60℃,在此条件下巴旦木蛋白的水解度为36.6%。巴旦木蛋白肽的还原能力随肽浓度的增大而增大,对OH.、O2-.以及DPPH.均具有良好的清除能力,清除效果随着巴旦木蛋白肽浓度的增大而增强,两者之间存在着量效关系,但当肽达到一定浓度时,其抗氧化效果基本不受浓度影响。     

酶法改善卵白蛋白乳化性研究

采用碱性蛋白酶通过酶法改性以改善卵白蛋白乳化性。在单因素实验的基础上,以乳化活性为响应值,选取酶解时间、pH、酶解温度为考察因素,根据Box-Behnken中心组合设计原理建立数学模型,进行响应面分析。获得卵白蛋白乳化性的酶法改性最佳工艺为:底物浓度1.0%、酶用量30000 U/g、酶解时间195 min、p H9.0、酶解温度38℃。在此条件下改性卵白蛋白乳化活性为0.967±0.031,乳化活性相比未改性提高89.61%,说明碱性蛋白酶改性改善卵白蛋白乳化性效果理想。      

蛋白酶酶解核桃饼粕的抗氧化活性

为研究碱性蛋白酶酶解核桃饼粕制得的酶解液的抗氧化活性,运用碱溶酸沉提取法提取核桃饼粕蛋白,利用碱性蛋白酶酶解制得核桃饼粕酶解液及核桃饼粕分离蛋白酶解液.通过对·OH、O2-、DPPH自由基清除能力及总还原力的测定,对比核桃饼粕与其分离蛋白酶解产物的抗氧化活性.结果 显示,·OH清除率分别为17.32％和18.11％,O...     

芝麻蛋白水解工艺优化及芝麻多肽组分抗氧化活性的研究

研究了芝麻多肽的水解工艺条件及其组分抗氧化活性.采用Box-Behnken试验设计,优化了芝麻蛋白水解条件,对芝麻多肽(SP)和不同分子质量的芝麻多肽(SP1、SP2和SP3)清除DPPH自由基活性、总抗氧化能力、抑制猪油和冷藏熟肉糜脂质氧化作用进行了研究.优化的水解条件为:6.91 g芝麻蛋白,0.082 g碱性蛋白酶,水解时间6.82 h,水解度为30.2%.芝麻多肽均有一定的抗氧化能力,SP3和SP的抗氧化活性明显高于芝麻蛋白.0.02%SP3和SP对DPPH自由基清除率分别为79.17%和52.54%,清除能力由高到低的顺序为SP3>SP>SP2>SP1.芝麻多肽的总抗氧化能力与清除DPPH自由基的活性一致.0.02%的芝麻多肽具有明显的抑制猪油氧化和冷藏熟肉糜脂质氧化的作用,可使猪油过氧化值从126.6 mmol/kg降低至45.4 mmol/kg,SP3和SP对冷藏熟肉糜脂质氧化的抑制率分别为74.68%和59.37%,抑制能力由强到弱的顺序为SP3>SP>SP2>SP1.     

酸枣仁蛋白的不同蛋白酶酶解产物功能特性及抗氧化活性分析

以酸枣仁为原料,采用碱提酸沉法对酸枣仁蛋白进行提取,用三种不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)对酸枣仁蛋白进行酶解,得到三种酶解物,研究不同酸枣仁蛋白酶解物的功能特性和抗氧化活性.结果表明,与酸枣仁蛋白相比,不同酸枣仁蛋白酶解物的溶解性、持油性、起泡性及其稳定性、乳化性及其稳定性均具有不同程度地提高,其中,...     

酶法制备鲟鱼皮胶原蛋白多肽及其抗氧化活性研究

该研究以鲟鱼皮为原料利用碱性蛋白酶水解制备胶原蛋白肽,进行了鲟鱼皮基本成分分析,酶解条件优化和酶解产物抗氧化活性研究。结果表明,最佳酶解条件为pH 9,温度55℃,添加酶质量分数3%,酶解时间5 h时水解度为22. 0%。酶解液经超滤分离得到4种不同分子质量范围的胶原蛋白肽组分SSCP-I(分子质量>10 000 Da)、SSCP-II(分子质量=5 000～10 000 Da)、SSCP-Ⅲ(分子质量=1 000～5 000 Da)和SSCP-IV(分子质量<1 000 Da)。其中(分子质量=1 000～5 000 Da) SSCP-Ⅲ对超氧阴离子自由基的清除能力最高,其半抑制清除浓度IC50为5. 938 g/L。该研究为鲟鱼皮的综合加工和高值化利用提供了理论指导。     

双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化多肽的研究

本文以葵花籽粕蛋白粉为原料,获取双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化活性多肽的最优工艺。分别采用碱性蛋白酶等七种蛋白酶对葵花籽粕蛋白进行酶解,以抗氧化性及水解度为指标对酶制剂进行筛选。以抗氧化性为指标,通过单因素及响应面法对酶解条件进行优化,获取最佳酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶为最适酶制剂且最佳酶解工艺为:p H7.6、复合酶比例为2.5∶1、底物浓度2%、[E]/[S]为2%、酶解温度50℃、酶解时间200min,在此条件下,葵花籽粕多肽对O-2·和·OH清除能力分别为68.06%和50.12%。      

卵白蛋白抗氧化肽分离与纯化

目的:从卵白蛋白酶解液中分离抗氧化肽.方法:通过超滤、离子色谱和反相高效液相色谱法从卵白蛋白酶解液中分离制备抗氧化肽,用电喷雾质谱肽的结构进行表征.结果:分离纯化获得抗氧化能力较强的3个肽:OPQ3-1、OPQ3-2和OPQ3-4,分别是源于鸡蛋卵白蛋白第115～117氨基酸残基(Pro-Glu-Tyr),分子质量408.14 Da;第245～248氨基酸残基(Leu-Pro-Asp-Glu),分子质量473.19 Da;第148～150氨基酸残基(Trp-Val-Glu),分子质量433.18 Da.结论:卵白蛋白经胃蛋白酶水解获得抗氧化多肽.     

核桃多肽体外抗氧化活性研究

以提取油脂后的核桃渣为原料分离出核桃蛋白,利用酸性、碱性、中性3种蛋白酶复合酶解核桃蛋白,制备水解度高的核桃多肽。通过测定核桃多肽的总还原能力、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、二苯代苦味酰基自由基(DPPH)清除能力,研究核桃多肽的抗氧化活性大小。结果表明,3种酶协同对核桃蛋白进行水解,水解度可达到45.58%,核桃多肽有一定的体外抗氧化活性,其总还原能力、对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除率与质量浓度呈量效关系。     

Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清制备抗氧化活性肽

研究Alcalase碱性蛋白酶酶解鸡蛋蛋清制备小分子活性肽.确定酶解的最佳工艺是:酶解pH值为9.0,酶解温度为70℃,底物浓度[S]为4.5%,酶加入量[E]/[S]为6%.水解时间4 h,水解度达到33%.采用化学发光法研究蛋清肽混合物的抗氧化性,结果表明,不同浓度和水解度的蛋清肽混合物均具有清除活性氧和抗脂质氧化的能力.随着蛋清肽混合物浓度增大,清除能力增大,抗氧化性增大.不同水解度的蛋清肽混合物,其清除活性氧和抗脂质氧化能力稍有不同,但区别不大.用葡聚糖凝胶SephadexG-15测定水解物分子量分布,结果表明水解产物中的主要成分是分子量集中在1300u的寡肽.     

酶法改善卵白蛋白起泡性

采用碱性蛋白酶对卵白蛋白进行酶法改性处理以改善其起泡性。探讨酶解时间、底物质量分数、酶用量因素对卵白蛋白起泡性和泡沫稳定性的影响,在单因素试验基础上采用Box-Behnken中心组合试验设计优化酶法改性条件。结果表明,碱性蛋白酶酶法改性卵白蛋白改善其起泡性的最佳条件为：酶用量144 000 U/g、底物质量分数1.90%、酶解时间34 min。在此条件下酶法改性后卵白蛋白起泡性达202.0%,为未改性（120%）的1.683 倍。     

桑叶蛋白活性多肽的酶解制备

该研究旨在探讨蛋白血管紧张素转换酶（angiotensin I-convening enzyme,ACE）抑制肽及抗氧化肽的酶解制备方法。选取3种蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶及芽孢杆菌蛋白酶）酶解制备桑叶功能活性多肽,以ACE抑制活性为主要指标并辅以水解度（degree of hydrolysis,DH）评价ACE抑制活性,以DPPH自由基清除能力和总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）为指标评价其抗氧化性能。运用单因素逐级优化法对酶解反应的酶解pH值、底物浓度、加酶量、酶解温度和酶解时间进行参数优化。结果表明,3种蛋白酶的酶解产物均具有ACE抑制活性,中性蛋白酶酶解产物效果最佳,酶解工艺条件为底物浓度20 g/L、加酶量7.5%、酶解时间50 min、酶解温度55℃、pH7.0时,酶解产物的ACE抑制活性为81.23%,DH为21.41%。在不同蛋白酶优化条件下测定3种酶解产物的抗氧化能力,中性蛋白酶DPPH自由基清除率和总抗氧化能力均为最高,分别为80.702%和4.717 mmol/g。     

温度对碱作用下卵白蛋白-葡萄糖体系色泽、理化特性及抗氧化活性的影响

探讨温度（4、25、37 ℃）对碱作用下卵白蛋白-葡萄糖体系色泽、理化特性及其抗氧化活性的影响。结果表明,随着孵育时间延长和温度升高,卵白蛋白-葡萄糖体系色泽不断加深,棕色产物以及荧光化合物含量不断增加,其美拉德反应中间产物含量在4 ℃和25 ℃时不断上升,而在37 ℃时先上升后下降,其pH值在整个孵育期间呈现出先上升后下降的趋势。傅里叶变换红外光谱分析表明,卵白蛋白和葡萄糖发生了缀合反应。氨基酸分析表明在碱诱导下卵白蛋白中的丝氨酸、组氨酸和半胱氨酸具有较高的反应性,其中反应性最高的是半胱氨酸。孵育后卵白蛋白-葡萄糖体系的抗氧化活性与卵白蛋白葡萄糖混合物相比有了显著提升,但随孵育时间的延长有轻微下降。     

蓖麻限制性酶解蛋白功能特性和抗氧化活性研究

目的研究蓖麻限制性酶解蛋白的功能特性和抗氧化活性,为进一步开发利用蓖麻蛋白提供一条新途径。方法以蓖麻子为原料,通过粉碎、脱脂、乙醇洗涤、沸水脱毒、冷冻干燥等操作步骤制备蓖麻浓缩蛋白,再分别用碱性蛋白酶(alcalase)、风味蛋白酶(flavourzyme)、复合蛋白酶(protamex)、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解得到5种蓖麻限制性酶解蛋白,并进行功能性质和抗氧化活性研究。结果蓖麻浓缩蛋白色泽洁白、无异味,其蛋白含量为73.08%,脂肪含量为1.13%,是一种优质的植物蛋白;蓖麻浓缩蛋白经蛋白酶限制性酶解后功能性质和抗氧化活性增加,功能性质大小顺序为:复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶,抗氧化活性大小顺序为:复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶。结论采用复合蛋白酶限制性酶解蓖麻蛋白,可得到功能特性和抗氧化活性都较好的限制性酶解蓖麻蛋白。     

猪骨蛋白的中性蛋白酶酶解工艺及其产物抗氧化活性研究

试验首先通过单因素试验分析了酶的浓度,pH,酶解温度,酶解时间对水解度的影响,然后在此基础上通过正交试验得到了中性蛋白酶酶解猪骨蛋白的最佳工艺参数,最后研究了酶解产物对羟基自由基的清除效果。结果表明:中性蛋白酶酶解猪骨蛋白的最佳工艺参数为酶的浓度4%,pH 6.5,酶解温度45℃,酶解时间3h,此时水解度为31.3%;猪骨蛋白的中性蛋白酶解物对羟基自由基有明显的清除作用,在浓度133~4000μg/mL的浓度范围内,清除羟基自由基的能力为29.59%~81.43%,且存在明显的量效关系,但其清除效果低于VC。     

乳清蛋白水解物抗氧化活性的研究

本实验主要研究了乳清蛋白的碱性蛋白酶水解产物在不同体系中的抗氧化活性。通过测定水解物对卵磷脂脂质氧化体系的硫代巴比妥酸值(TBARS)抑制作用、过氧化值(PV)的抑制作用、亚铁还原能力、金属离子螯合能力、DPPH 自由基清除能力,研究乳清多肽的抗氧化活性。结果表明,底物浓度为5%、蛋白酶量的添加量为2%、水解时间为5h 时乳清蛋白的水解物具有最强的抗氧化能力;碱性蛋白酶制备的乳清蛋白水解物的抗氧化能力与底物浓度、水解时间、溶解度等有关。     

酶解动物蛋白制备抗氧化多肽研究进展

动物蛋白资源丰富,酶法水解动物蛋白制备的抗氧化多肽具有多种生理机能,成为研究的热点。综述了酶解动物蛋白制备抗氧化多肽的研究现状,为提高畜禽副产品附加值提供了理论依据。     

鸡蛋壳膜多肽酶解工艺及抗氧化活性研究

试验以鸡蛋壳膜为原料,通过酶解法制备小分子肽,并对其生物活性进行研究。以水解度为评价指标,通过单因素试验确定蛋白酶种类、酶解时间、料液比以及酶添加量等因素对壳膜多肽水解度的影响,并通过响应面设计（Box-Behnken design,BBD）对酶解条件进行三因素三水平优化;通过高效凝胶过滤色谱测定酶解后壳膜多肽分子量的分布情况,并测定壳膜多肽对DPPH·、ABTS+·、·OH、O2-·的清除能力。结果表明,最佳酶解工艺条件为碱性蛋白酶（AP-200a）,酶添加量2.4%,料液比1∶9.5（g/mL）,酶解时间5 h;在此条件下,壳膜多肽水解度为27.15%,水解后相对分子质量小于1 000 Da的小分子肽所占比例为90.9%;且壳膜多肽对DPPH·、ABTS+·的清除率分别为（93.03±0.51）%、（94.53±0.92）%,与 VC的效果相当;但对·OH 和 O2-·的清除率分别为（43.33±1.10）%和（53.40±0.70）%。因此,通过该法酶解得到的壳膜多肽中小分子肽占比较高,易被人体消化吸收,且具有一定抗氧化活性。