三唑磷残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用

采用包被多克隆抗体直接竞争ELISA法研制一种检测水样、蔬菜和粮食样品中三唑磷残留的酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒。将不同浓度的三唑磷添加到水样、蔬菜和粮食样品中,用制备的试剂盒检测三唑磷残留并用气相色谱分析法(GC)进行验证,结果样品的加标回收率在65%～125%之间,变异系数<15%。对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定,结果表明:研制的试剂盒最低检测限为4.13ng/mL,线性检测范围3.9～500ng/mL;在4℃或-20℃条件下试剂盒有效期可达6个月。用ELISA试剂盒检测三唑磷残留具有可批量分析样品,快速、简便、灵敏、经济的特点,可广泛应用于环境监测和安全食品的生产。     

毒死蜱残留检测间接竞争ELISA 试剂盒的研制

在多克隆抗体的基础上研制一种适用于检测样品中毒死蜱残留的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。结果表明,研制的试剂盒最低检测限为0.5μg/L,线性检测范围为1.8～1000μg/L,供试样品检测结果的批内、批间变异系数均低于8%,回收率均高于85%。试剂盒在4℃或－ 20℃条件下至少可保存6 个月。     

直接竞争ELISA法检测蔬菜中2,4-二氯苯氧乙酸

目的研究竞争性酶联免疫法分析测定蔬菜中2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)残留量。方法样品用乙腈进行前处理后采用ELISA试剂盒检测蔬菜中2,4-D的残留,分析方法的灵敏度、回收率和稳定性;并比较其与超高效液相色谱-质谱法(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLC-MS)在灵敏度、稳定性等方法学参数上的差异。结果经过有机溶剂提取等前处理过程,ELISA与UPLC-MS的检测灵敏度分别可以达到1.739μg/kg和3μg/kg,回收率分别为80.19%~117.37%和80.04%~112.5%;试剂盒稳定性的测定证明其可以在4℃至少保存8个月。结论与UPLC-MS法相比,直接竞争ELISA法简单、高效,检测快速,灵敏度高,适合大批量筛选样品。因此,ELISA法更加适合快速检测蔬菜中2,4-D的残留。     

超高效液相色谱质谱联用法测定蔬菜中 氨基甲酸酯农药及其代谢物研究

目的建立以Qu ECh ERS法进行样品前处理,以超高效液相色谱质谱联用法分析蔬菜中氨基甲酸酯类农药的多残留检测技术,以适应食品安全风险监测工作需要。方法采用Qu ECh ERS法进行样品前处理,采用超高效液相色谱串联三重四极杆联用技术,以CH3CN:0.1%甲酸含5 mmol/L甲酸铵(每升中加入10 mg无水乙酸钠)为流动相,流速0.3 m L/min,以ACCUIITY BEH C18(2.1 mm×100 mm,i.d.1.7μm)为分析柱,柱温35℃,三重四杆质谱仪ESI源,正离子模式,多反应监测方式测定蔬菜中6种氨基甲酸酯类农药。结果本方法检出限为0.01 mg/kg,在线性范围2.5~200 ng/m L内有良好线性关系,线性相关系数(r)分别为:灭多威0.9997、涕灭威0.9993、克百威0.9994、涕灭威亚砜0.9979、3-羟克百威0.9994、涕灭威砜0.9995,回收率62.3%~114.0%,相对标准偏差2.53%~12.0%。结论本方法样品制备速度快,操作简便,适用于蔬菜样品中氨基甲酸酯类农药多残留检测。     

氯霉素ELISA可视化微阵列芯片检测试剂盒评价研究

为了了解氯霉素ELISA可视化微阵列芯片检测试剂盒的有效性和可靠性,从灵敏度、特异性、准确度、可重复性、检出限、耐变性、批间变异等方面进行了评价,结果表明该试剂盒在测试范围内线性回归良好,相关系数R2可达0.9943,与结构相似的甲砜霉素、氟甲砜霉素的交叉反应率均小于1%,批间变异系数小于20%,牛奶中的平均回收率为108.5%,检出限为0.067μg/L,该试剂盒有较好的准确性、特异性与重复性,耐变性与批间变异均在可接受范围内,可用于牛奶样品中氯霉素的残留检测。     

己烯雌酚残留检测ELISA试剂盒的研制及应用

在实验室前期制备的己烯雌酚多克隆抗体基础上建立间接竞争ELISA检测方法,研制出己烯雌酚残留ELISA快速检测试剂盒,并对其性能参数进行测定。结果表明,所选用的抗体对己烯雌酚亲和力高,除了与双烯雌酚、己烷雌酚的交叉反应率分别为6.83%和2.56%外,与其他结构类似物或功能类似物交叉反应率均小于0.01%;己烯雌酚残留检测的标准曲线为y=-28.71x+59.37,R2为0.9895,线性范围为0.08~8.17ng/mL,检测限IC10为0.05ng/mL,灵敏度IC50为1.09ng/mL,样品的加标回收率为80.04%~107.91%,平均批内和批间变异系数分别为6.41%和8.83%;与HPLC测定方法比对具有较高的相符性,相关系数R2为0.9882;该试剂盒在4℃下至少可保存6个月,可用于批量猪肉、鸡肉、鱼肉、饲料等样品中己烯雌酚残留的检测。     

PXC固相萃取-高效液相色谱法测定四川泡菜中的多菌灵、克百威

通过对四川泡菜进行固相萃取-高效液相色谱法测定多菌灵、克百威残留量.样品经乙酸乙酯提取后,PXC固相萃取柱提取净化,HPLC法测定.在添加水平为1,5,20μg/g时,多菌灵的回收率在86.3％～92.3％之间;RSD＜5％(n=6),检出限为0.03mg/kg,克百威的回收率在76.3％～89.4％之间;RSD＜5％(n=6),检出限为0.06 mg/kg,方法的测定结果满足农药残留量的检测要求.     

百菌清残留阻断ELISA试剂盒的研制及鉴定

目的 研制百菌清(Chlorothalonil, CTN)残留快速检测阻断ELISA试剂盒(CTN-Kit), 并对其特性进行测定。方法 基于一株分泌抗CTN高亲和力的CTN单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb), 应用阻断ELISA试验原理研制CTN-Kit。结果 CTN-Kit的标准曲线呈典型的S型, 相关系数R2=0.9922, 符合4参数logit曲线拟合, 线性检测范围为1.03~845.46 μg/L, 灵敏度为2.5 μg/L, 半数抑制浓度(IC50)为29.44 μg/L, 检测限为3.0 μg/L; 黄瓜样和番茄样的平均添加回收率分别为92.0%、94.0%, 平均批内和批间变异系数均低于10%; CTN-Kit与五氯硝基苯的交叉反应率(CR%)为1.7%, 与其他竞争物几乎没有反应性; 试剂盒在4 ℃可保存6个月以上。结论 CTN-Kit灵敏度高、准确性、重现性好, 可用于农产品中CTN的残留检测。     

甲拌磷残留检测间接竞争ELISA试剂盒的研制

研制用于检测甲拌磷残留量的间接竞争ELISA试剂盒。甲拌磷包被抗原的最佳工作质量浓度为4mg/L,抗体的最佳稀释倍数为8000,甲拌磷多克隆抗体交叉反应率小于20%,甲拌磷抑制率回归曲线为y=18.846x＋6.9949,在1～5000μg/L范围内呈线性关系,检测限为4.90μg/L,IC50为191.37μg/L。甲拌磷试剂盒的添加回收率均高于75%,供试样品检测结果的批内和批间变异系数均低于10%。试剂盒在4℃或－20℃下有效期为270d。     

高效液相色谱法测定乳与乳制品中双氰胺的残留

建立了乳与乳制品中双氰胺残留的高效液相色谱测定方法.采用水-乙腈提取样品、氨基色谱柱分离、紫外检测器检测、外标法定量测定双氰胺残留.该方法的检出限为牛奶0.01mg/kg,乳粉为0.05 mg/kg(均为质量分数),线性范围为0.25.0 mg/L,并确定了回归方程,相关系-R2=0.9998,样品加标回收率在90％~8％,相对标准偏差为1.2％~2.3％.该法具有样品处理简单方便,灵敏度高,分析时间短等优点,可以满足乳与乳制品中双氰胺残留的测定.