两种双酶切大豆分离蛋白技术路线的比较

本研究以碱性丝氨酸蛋白酶和蛋白酶Ⅱ作为水解酶对大豆分离蛋白进行两步定向酶切,以制备具有改善肝昏迷生物活性的高F值寡肽。本研究设定两种定向酶切的技术路线,即在酶解过程中维持碱性丝氨酸蛋白酶最适pH的时间分别设定为3h（技术路线Ⅰ）和30min（技术路线Ⅱ）,而蛋白酶Ⅱ分别在酸性及中性条件下继续酶解大豆分离蛋白水解液。结果表明,技术路线Ⅰ、Ⅱ蛋白质回收率分别为86.5%、87.8%;酸溶性氮得率分别为83.2%、86.4%;灰分含量分别为11.1%、7.0%;技术路线Ⅰ所得肽的相对分子质量分布范围为：分子量大于5000的肽占肽总量的20.6%,分子量在3000左右的肽占总量的3.3%,分子量在500～600之间的肽占肽总量的61.3%;技术路线Ⅱ所得的产物组分相对分子质量分布范围为：分子量在1000以下的占71.3%,且分子量主要在700～900之间,分子量在2000左右的占5.7%,分子量在5000以上的占12.8%。研究结果表明,技术路线Ⅱ的酶切效果优于技术路线Ⅰ的。     

双酶法制备低苦味大豆寡肽的研究

利用中性蛋白酶和Flavourzyme双酶法,对大豆分离蛋白进行水解制备大豆寡肽,讨论中性蛋白酶和Flavourzyme的最佳酶解条件,以及大豆寡肽的苦味值变化。大豆分离蛋白的预处理条件为温度90℃、时间10min;中性蛋白酶的最佳酶解条件为底物浓度4%、反应温度50℃、时间4h、pH8.5、酶用量6%,水解度(DH)可达21.46%;Flavourzyme的最佳酶解条件为反应温度50℃、时间6h、pH7.0、酶用量3%。采用双酶中性蛋白酶-Flavourzyme生产的大豆寡肽,苦味明显降低。     

玉米黄粉二步酶解制备高F值寡肽的工艺优化

研究玉米黄粉二步酶解制备高F值寡肽的影响因素,优化其工艺参数。结果表明,蛋白酶种类、酶添加量、料液比、pH值、酶解温度和酶解时间对玉米蛋白转化率和活性肽F值产生一定影响。经单因素实验和正交试验设计优化的初次酶解条件为碱性蛋白酶添加量12.5 kU/g (以玉米黄粉质量为基准)、pH值9.0、料液比(g/mL)1∶35,50℃反应3.0 h,此条件下蛋白转化率达到85.61%。以初次酶解液为原料,经单因素实验和正交试验优化的二次酶解条件为复合风味蛋白酶添加量2.7 kU/mL(以玉米黄粉初次酶解液体积为基准)、pH值7.0、酶解温度45℃、反应时间2.5 h。玉米黄粉经二步酶解、活性炭吸附后,样品寡肽得率为35%,F值达到28.30,分子质量为493.46～912.84 Da,高F值寡肽占总含量85%以上。研究结果旨在为玉米黄粉资源综合利用提供理论和技术指导。     

pH值渐变条件下双酶协同水解猪皮制备胶原蛋白寡肽的研究

本文研究了在没有外加碱的pH渐变条件下,用枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)双酶协同水解从猪皮胶原蛋白制备寡肽水解物的可行性。考察了单酶单因素水解条件、双酶加入方式对猪皮降解率和蛋白质水解度的影响,并在此基础上通过正交试验进一步优化出双酶一次性投料方案下水解猪皮的最佳条件:水解温度为60℃,碱性蛋白酶加入量为25μl/g蛋白,酸性蛋白酶加入量为4%(g/g),底物浓度为60g/L,水解时间为12h。在上述最佳条件下,新鲜猪皮的降解率可达94.7%,蛋白质的水解度可达17.7%,水解物中分子量小于1000(10个氨基酸以下的肽)的寡肽选择性达到了42.5%。结果表明,在不外加碱的条件下,采用双酶协同水解方法能够显著提高猪皮降解率,特别是蛋白质水解度。     

复合酶法制备活性大豆寡肽研究

本文简要介绍活性大豆肽的主要生理功能,根据酶促反应动力学原理系统分析了影响大 豆蛋白酶解的主要因子,如反应温度、ｐＨ值、底物浓度、酶用量、酶种类、反应时间、溶液离 子浓度等,并通过试验研究了大豆蛋白水解度与各因子之间的关系并确定最佳的反应条 件,而且对大豆蛋白水解物的脱色、脱苦、脱盐等精制工序进行深入研究。     

高水解度大豆寡肽专用复合酶的配方优化

为提高大豆分离蛋白(SPI)的水解度,实现深度酶解,生产低分子质量寡肽,比较不同蛋白酶与不同配方的复合酶对SPI的水解能力,并采用响应面法对复合酶的组成进行优化。结果表明：不同蛋白酶对SPI的酶解能力不同,其中以碱性蛋白酶的水解度寡肽收率最高。多酶复合水解可以提高SPI的水解度与寡肽收率,其中以同时加入碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶进行水解时水解度最高。由此3种酶组成的复合酶的最佳组成是碱性蛋白酶39.6%、风味蛋白酶25.4%、中性蛋白酶35.0%,最适用量为SPI干质量的3%。以此复合酶在55℃、SPI质量浓度10g/100mL、自然pH值的条件下酶解6h,SPI的水解度可达27.2%,寡肽收率高达83%。     

高F值寡肽的研究与开发

利用玉米黄粉通过蛋白酶水解,制取高F值寡肽,通过高压液相色谱和氨基酸成份分析,所得寡肽的分子质量主要分布区域为2001000道尔顿,游离氨基酸含量4.8%,不含高分子量的肽,F值为21.4,提取率为85%以上。     

双酶分步水解大豆分离蛋白制备缩氨酸

以大豆分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶分步水解技术,结合膜分离技术与传统的纯化工艺制备大豆缩氨酸。通过单因素和正交试验得到最佳制备条件：碱性蛋白酶在pH值为9.0、酶用量为5%（W/V）、底物浓度为5%、温度为55℃条件下水解4h后灭酶,风味蛋白酶pH值为6.5、酶用量为5%（W/V）、温度为50℃,水解时间6h,水解度达到25.3%。在此条件下酶解液中Da〈1 000的多肽得率为49.12%。对其进行氨基酸分析,得出氨基酸总量和游离氨基酸的含量分别占寡肽溶液的3.21%和0.28%。     

双酶法制备大豆肽工艺优化研究

以大豆分离蛋白为原料,通过单因素试验研究蛋白液的浓度、水解的温度、水解时间、酶的加入量及pH等因素对大豆分离蛋白水解度的影响,确定适宜的范围值和因素组合。结果表明,大豆分离蛋白在蛋白液浓度8%,加酶底物比为2%,在55℃水解4 h,水解初始pH为9.0~10.0时水解率最高。水解后pH稳定在7左右。通过苦味值测定,结果表明,风味酶在50℃条件下,水解1 h,苦味值最低。液相色谱检测水解后肽的分子量主要分布在300 Da~1 000 Da范围。小于1 000 Da以下的肽占总量的80.3%,2 000 Da以下的肽含量占91.5%。     

高F值寡肽的研究进展

在氨基酸混合物中,支链氨基酸(Branched chain amino acids,简称BCAA)与芳香族氨基酸(Aromaticamino acids,简称AAA)的摩尔比称为Fischer值,简称F值。高F值寡肽是蛋     

功能性寡肽饼干的研究

本文应用单因素试验和正交实验法，对影响功能性大豆寡肽饼干质量的各重要因素进行了较为详细的研究，得出最优工艺参数，并对工艺的特点作了介绍。     

梨形毛霉蛋白酶在大豆多肽制备中的应用

本文研究了腐乳生产菌种梨形毛霉所产蛋白酶对大豆分离蛋白的降解条件,并分析了酶解产物的疏水性、分子量分布及氨基酸组成。结果表明该蛋白酶酶促降解大豆分离蛋白的最佳条件是温度45℃、反应时间5h、pH6.0、酶用量750U;在此条件下制备的大豆肽经质谱检测其分子量在1000D左右,完全符合大豆肽产品的要求;经品尝,该产品无任何苦涩味,色泽淡黄,无需脱盐处理,可直接调配成酸性蛋白肽饮料。     

超声处理对大豆分离蛋白功能特性的影响

采用超声仪对大豆分离蛋白(SIP)溶液进行超声处理,研究了不同超声处理时间,不同功率处理后SIP功能特性的变化。结果表明超声处理后大豆分离蛋白的溶解性,起泡性,乳化性和凝胶性都有明显的提高。     

两种脱毛蛋白酶活力的研究

本文对两种常用的脱毛蛋白酶（2709碱性蛋白酶与A．S1398蛋白酶）在不同pH值、温度等条件下的活力变化情况进行了研究。结果表明：2709蛋白酶的活力最适pH值为9．5～10，A．S1398蛋白酶为7．5～8．0且2709酶的pH值适应范围更广，对pH值的敏感度更低；两种酶活力的温度变化曲线具有相似性，温度越高，它们的活力衰减得也越快；两种蛋白酶受Mn抖强激活，Cu^2＋、Cr^3＋、Fe^2＋、Zn^2＋等离子则对其有抑制作用；表面活性剂如洗衣粉、平平加和JFC等对两种酶具有一定的激活作用。     

玉米高F值寡肽的分离纯化及抗氧化活性研究

目的研究玉米高F值寡肽混合物的分离纯化及抗氧化作用。方法采用碱性蛋白酶Protex 6L、中性蛋白酶Protex 7L和木瓜蛋白酶3种酶复合酶解玉米黄粉(CGM),经超滤得到寡肽混合物,用Sephadex G-15凝胶分离纯化,测定寡肽混合物及其分离纯化组分的相对分子质量(Mr)及抗氧化活性。结果寡肽混合物的F值为28.40。寡肽混合物经Sephadex G-15测定其Mr为231~2392,并分离得到3个组分:P1、P2和P3,其Mr分别为2392,1581,231。寡肽混合物对邻苯三酚自氧化的抑制率达73.31%,3个组分对邻苯三酚自氧化的抑制率分别为22.10%,18.86%和75.75%,抗氧化活性最高的为二肽组分P3。结论玉米高F值寡肽混合物有良好的抗氧化活性,P3为主要抗氧化组分。     

低变性大豆蛋白生产工艺

该工艺利用液化烃（丙烷，丁烷混合物）作浸出溶剂，在提取大豆油后，低温（３５℃）脱除豆粕中的溶剂，可获得水溶性蛋保持率９０％以上的低变性豆粕，该产品可制备各种蛋白食品如分离蛋白粉，浓缩蛋白粉等。它的应用将主植物油料蛋白的开发利用提供新的途径。     

大豆分离蛋白乳化性影响因素的研究

本文对影响大豆分离蛋白乳化性的外部因素进行了研究,实验证明大豆分离蛋白的乳化能力与蛋白质浓度、加热温度、pH值、NaCl浓度、卡拉胶浓度、搅拌时间密切相关。因此,在表征大豆蛋白的乳化特性及乳化稳定性(ESI)和乳化活性(EAI)时,应考虑这些因素。     

蛋清高F值寡肽对受试小鼠皮肤中羟脯氨酸含量影响的研究

蛋清高F值寡肽就是一种由2～5个氨基酸残基所组成的混合小肽体系,已知具有辅助治疗肝性脑病,抗疲劳、耐缺氧、降血脂等生理功能。本实验主要针对蛋清高F值寡肽是否对小鼠皮肤中羟脯氨酸含量存在影响进行实验研究,综合分析了不同浓度蛋清高F值寡肽液对小鼠灌胃30d和90d的小鼠皮肤中羟脯氨酸含量的变化。研究发现:不同浓度蛋清高F值寡肽均可以明显提高受试小鼠皮肤中羟脯氨酸含量,其中浓度为10%的蛋清高F值寡肽液无论是对灌胃30d还是灌胃90d的小鼠皮肤中羟脯氨酸含量影响都是极显著。     

双酶复合改性增强大豆分离蛋白溶解性研究

传统方法对大豆分离蛋白(SPI)进行改性,一般只可改善一个或几个功能性,而SPI溶解性和分子量不能兼得。利用中性蛋白酶和谷氨酰胺转胺酶(TG)对大豆分离蛋白进行复合改性,通过单因素和正交实验研究,中性蛋白酶酶解最佳工艺条件:温度60℃,时间0.5小时,pH7.0,酶用量4000u/g,SPI溶解性可达97.9%;再经TG改性,所得聚合物虽有很大分子量,但还可改善SPI溶解性,并且乳化性、发泡性均有提高。