HPLC法检测牛初乳中lgG含量

建立了牛初乳中IgG的高效液相色谱检测法,并测定了 初乳中IgG的经时变化过程。结果显示,IgG浓度在0.2～ 15mg/mL的范围内峰面积与浓度呈现良好的线性关系, 回收率实验平均大于98.5％。采用本法测定了六头幽门螺 杆菌免疫牛初乳中IgG及两头正常牛初乳中IgG的经时 变化过程。母牛分娩后24h内,初乳中免疫球蛋白IgG平 均含量在40～70mg/mL之间;3d后,初乳中免疫球蛋白 总量下降较快;至第7d,初乳中免疫球蛋白含量平均在 1～5mg/mL之间。     

发酵法去除牛初乳中酪蛋白提高IgG含量的研究

利用乳酸菌发酵牛初乳从而降低pH达到酪蛋白等电点,通过离心去除酪蛋白,提高免疫球蛋白G(JgG)含量。结果表明,发酵法去除酪蛋白的最适pH为4.65,离心条件为1500×g,30min;随着pH的下降,酪蛋白被去除.初乳中的IgG含量上升,pH由4.70降低到4.65时,IgG含量有显著性变化(P<0.01)。2-7d原料初乳中IgG含量平均为20.09mg/g,经发酵后乳清IgG含量提高约1.5倍,平均达到52.07mg/g。     

牛初乳中免疫球蛋白的测定

以单向免疫扩散法测定了牛初乳中的IgG。结果表明,产犊后第1次挤乳,初乳gG平均为67.23mg/mL,之后随泌乳进行迅速下降,24h后降到小于5mg/mL,到第5天已降到常乳水平。     

胎次及天数对牦牛初乳活性成分的影响

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA),研究了五个胎次的天祝白牦牛初乳中免疫球蛋白G(IgG)、乳铁蛋白(LF)以及胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在产后七天的浓度变化规律,为探讨白牦牛初乳的营养价值及其资源的合理开发和利用提供理论依据.结果表明:天祝白牦牛初乳中IgG、LF和IGF-Ⅰ在分娩后第1天且四胎浓度最高,分别为2404.41、2001.53和1206.48U/L,其后都随产后泌乳天数的增加急剧下降,5天以后下降速度趋于平缓.产后四天内牛初乳的IgG、LF和IGF-Ⅰ含量仍可达较高水平,营养价值丰富,具有一定的开发价值,因此在开发利用牦牛初乳产品时,为扩大牛初乳的利用率,可采集四天内初乳进行加工利用.     

山羊初乳成分及其免疫球蛋白构成变化的研究

动物初乳对其后代健康的作用已经得到了广泛的证实,其对人类健康的影响也受到了越来越多的重视.本研究探讨了阿尔卑斯山羊产后一周内乳成分和其中免疫球蛋白(Ig)含量的变化.结果表明:产后48h内山羊奶的蛋白质、总固形物和免疫球蛋白含量均快速下降;脂肪含量在前三次的初乳中逐渐升高,随后又缓慢下降;乳糖含量保持相对稳定于4%～5%;经产山羊前三次初乳的蛋白含量分别达到了16.5%、10.7%和6.8%,显著地高于初产山羊前三次初乳的蛋白含量(7.0%、4.8%和4.1%);经产山羊前两次初乳的IgG含量达到了59.9mg/ml和34.7mg/ml,IgM含量达到了6.14mg/ml和2.37mg/ml,显著地高于初产山羊前两次初乳的IgG含量(18.1mg/ml和13.9mg/ml)和IgM含量(1.95mg/ml和0.98mg/m1);经产和初产山羊初乳的IgA含量无显著差异.     

双抗体夹心酶联免疫法测定水牛初乳中的IgG

为快速、准确地测定水牛初乳中IgG活性质量浓度,建立了双抗体夹心酶联免疫分析法(ELISA)。结果表明,IgG活性质量浓度的对数值与吸光值存在很好的线性关系,其标准曲线方程式为γ=-0.2907x2+2.0819x+0.8689,相关系数R2=0.9937,线性范围在7.8～1000ng/mL,平均回收率在84.40%～96.71%之间,灵敏度高、重现性好,可用于水牛初乳及其制品中IgG活性质量浓度的检测。     

高静水压处理对牛初乳中IgG的影响

采取不同的高静水压条件（处理压强、施压温度、保压时间）处理产犊后48 h内的牛初乳,研究高静水压处理牛初乳对免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）活性的影响。将牛初乳离心去除酪蛋白、乳脂肪等,取上清液进行高静水压处理,采用高效液相色谱法和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（sodium dodecyl sulfatepolyacrylamidegel electrophoresis,SDS-PAGE）对处理后的样品进行检测。结果表明：高静水压处理后的样品,经高效液相色谱仪检测,其与亲和色谱柱发生特异性吸附的能力下降,IgG检出质量浓度降低;经SDS-PAGE检测和凝胶电泳成像仪扫描处理,不同处理条件下IgG的轻链和重链的质量变化不显著。因此,当牛初乳在200 MPa、30 ℃和20 min的高静水压处理条件下,IgG的活性最好,检出质量浓度为16.843 9 mg/mL。     

一定工艺下牛初乳生产投料IgG含量与对应产品IgG含量关系的探究

牛初乳中含有大量的免疫球蛋白(Ig),其中IgG的含量最高。作为食用功效成分,准确控制牛初乳粉中的IgG含量是牛初乳生产的核心,而投料生鲜牛初乳IgG在生产过程中的保留比率不稳定,经常出现投料IgG含量较高,得到对应产品并不理想的问题。因此,在一定工艺下了解牛初乳生产投料IgG含量与产品牛初乳粉IgG含量之间的关系,有利于提升产品质量的一致性,以及内控标准的符合性。     

水牛初乳中免疫因子和生长因子质量浓度的研究

研究水牛初乳中免疫球蛋白IgG,IgA和类胰岛素样生长因子(IGF-I)质量浓度的变化特点。用ELISA方法检测水牛分娩后7d内初乳样品的IgG,IgA和IGF-I质量浓度,同时检测3种成分在水牛常乳中的质量浓度。结果表明:分娩后3h的水牛初乳IgG,IgA和IGF-I质量浓度最高,分别为78.22g/L,8.83g/L和1099.78μg/L,常乳中的质量浓度分别为1.87g/L,0.71g/L和358.30μg/L。IgG在泌乳的第1天内下降91.18%,IGF-I下降57.02%,IgA在头2d内下降85.84%,之后缓慢下降接近常乳。因此,水牛泌乳最初的1~2d内初乳含有丰富的IgG,IgA和IGF-I,具有很高的开发利用价值。     

牛初乳中免疫球蛋白G双抗夹心ELISA检测方法的建立

将牛免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、筛选获得分泌抗牛IgG单克隆抗体的细胞株。制备小鼠腹水抗体,进一步纯化获得抗牛IgG单克隆抗体。建立双抗夹心酶联免疫吸附法检测牛初乳中IgG质量浓度,该方法在7.8～1 000 ng/mL范围内有良好的线性关系,最低检出限为7.06 ng/mL,批内变异系数为4.52%,批间变异系数为4.94%,回收率为91.85%～102.45%。此法操作简便、准确度高、稳定性好,可用于实际牛初乳样品的快速检测。