大孔吸附树脂纯化栀子蓝色素的工艺研究

探讨大孔吸附树脂对栀子苷发酵液的纯化条件。以栀子蓝色素色价和含量为指标,比较了多种大孔吸附树脂对栀子蓝色素的静态吸附和洗脱效果,筛选出效果较好的D4020树脂进行动态吸附洗脱试验,对栀子蓝色素的纯化工艺进行优选。结果表明:纯化的最终条件为,上样时栀子苷发酵液A590nm为0.71,吸附流速1.5mL/min,树脂的饱和吸附量为6.5BV,用2BV的60%乙醇即可洗脱栀子蓝色素。精制的栀子蓝色素色价为130.82,得率为64.47%。     

栀子黄色素的提取及精制研究

通过正交试验,确定了超声波法提取栀子黄色素的最佳工艺条件为:乙醇溶液60%、温度为45 ℃、提取时间20 min.同时,对几种大孔树脂对栀子黄色素的精制条件和效果进行了研究.结果表明:D3520、D140树脂的精制效果较好,适合制备高色价的栀子黄色素.经D140树脂精制后的栀子黄色素的色价达到401,得率为1.80%;经D3520树脂精制后的栀子黄色素的色价达到434,得率为1.33%.二者比较,D3520精制的栀子黄色素的色价略高,OD比值略低,而D140树脂的吸附容量更大.     

多杀菌素分离纯化工艺的研究

利用大孔树脂吸附结合硅胶柱层析技术对发酵液中多杀菌素的分离纯化进行了研究。首先考察了提取溶剂、发酵液pH和料液比对浸提多杀菌素的影响;然后对7种不同极性的大孔吸附树脂进行了静态和动态吸附性能的研究,考察了不同吸附、解吸条件对大孔吸附树脂性能的影响,最后对硅胶柱层析法精制多杀菌素的工艺条件进行了探索。结果表明:当发酵液pH为8.0,料液比1∶3(g∶v)时,乙醇可高效浸提多杀菌素;大孔吸附树脂DM11对多杀菌素的静态吸附量和解吸率分别为12 508μg/g(湿树脂)和93.47%;大孔树脂动态吸附最佳pH为9.0,最佳载样比为多杀菌素质量(mg):树脂体积(mL)=2.5∶1;采用70%~95%乙醇梯度洗脱,多杀菌素洗脱率为97.5%;多杀菌素精制时硅胶柱以石油醚/乙酸乙酯/甲醇(2∶1∶0.2和1∶1∶0.25)为洗脱剂进行分段洗脱。该工艺得到的多杀菌素回收率为67.25%,纯度为90.58%。     

中等纯度栀子苷的纯化和制备工艺研究

以树脂法分离富集栀子黄色素后的栀子苷粗提液为研究对象,探讨两步吸附树脂法分离纯化栀子苷的制备工艺。考察栀子苷在12种大孔吸附树脂中的静态吸附和解吸性能,并采用吸附动力学模型和颗粒内扩散模型对吸附过程进行预测性拟合。在此基础上选择非极性树脂X-5研究栀子苷的动态纯化,探索不同pH和不同浓度洗脱剂对栀子苷纯化的影响。结果表明:一级吸附动力学Lagergren方程能很好地拟合栀子苷的吸附过程,颗粒扩散是影响栀子苷吸附效果的主要作用因素,饱和吸附量为8.2mg/g(栀子苷/X-5树脂),进一步精制的优化条件为pH 5.5,20%乙醇洗脱。经3次重复性扩大验证实验,洗脱产物中栀子苷纯度可达65.4%,回收率92.3%。大孔树脂分离纯化栀子苷的优化工艺对规模化制备中等纯度的栀子苷及重结晶单体生产提供了科学基础和实验依据。     

栀子黄色素的提取及精制研究

本文通过正交试验,确定了超声波法提取栀子黄色素的最佳工艺条件为:乙醇溶液60%、温度为45℃、提取时间20min。同时,本文对几种大孔树脂对栀子黄色素的精制条件和效果进行了研究。结果表明:D3520、D140树脂的精制效果较好,适合制备高色价的栀子黄色素。经D140树脂精制后的栀子黄色素的色价达到401,得率为1.80%;经D3520树脂精制后的栀子黄色素的色价达到434,得率为1.33%。二者比较,D3520精制的栀子黄色素的色价略高,OD比值略低,而D140树脂的吸附容量更大。     

大孔吸附树脂法精制红花黄色素

对14种大孔吸附树脂进行了筛选,发现X-5、D3020和AB-8这3种树脂适合于红花黄色素的分离精制。研究了X-5树脂对红花黄色素的吸附性能,得到提纯红花黄色素的适宜工艺条件为:上柱液pH值3,吸附流速4.8BV/h,解吸剂采用50%乙醇水溶液,解吸流速2.4BV/h。经过X-5大孔吸附树脂分离精制后,产品中红花黄色素含量提高近5倍,其回收率为93.2%。     

树脂法分离红曲红色素的研究

用阳离子、阴离子交换树脂和大孔吸附树脂吸附红曲霉发酵液,然后用95%乙醇洗脱,结果表明,弱碱性阴离子交换树脂D380对红曲霉发酵液中红曲红色素的吸附能力最强,最大吸附量达52U/g,但难以用乙醇洗脱;大孔吸附树脂的平均吸附量为35U/g,但不能将色素液中的红色素和黄色素分开;弱碱性阴离子交换树脂D301R可用于分离红曲黄色素;弱酸性阳离子交换树脂110H对发酵液中红曲红色素的吸附量为21.6U/g,洗脱量为13.0U/g,洗脱率为65%,是供试树脂中分离红曲红色素效果最佳的树脂。     

HPD-400大孔吸附树脂分离纯化栀子黄色素的研究

文章研究了吸附树脂法精制栀子黄色素的工艺条件.实验结果表明:大孔树脂HPD-400比较适合吸附和分离栀子黄色素,其吸附率为96.88％,pH对吸附率的影响不大,在25℃温度条件下,以适宜的乙醇浓度和速度洗脱,得到的栀子黄色素色价＞400,OD值＜0.4.     

栀子红的制备与精制

本文对栀子红的制备条件与精制方法进行了初步研究。京尼平苷与水的比例应控制在1∶3左右,水量过大则可能因反应物浓度过低而使反应无法进行。栀子红可被非极性大孔树脂良好吸附,水和醇洗脱杂质后,稀氨水液洗脱栀子红,洗脱液很易干燥。精制后的样品色价提高10倍,无吸湿性,溶解性能好。     

栀子黄色素标准品藏红花素的制备

用栀子果实为原料,采用大孔吸附树脂法联合硅胶层析法精制栀子黄色素的标准品藏红花素。其栀子黄色素树脂精制条件:吸附条件为树脂30 mL,栀子黄色素提取液上样量300 mL;吸附流速1.5 mL/min;洗脱条件为提取液杂质洗脱乙醇体积分数30%,洗脱体积150 mL;栀子黄色素洗脱乙醇体积分数50%,洗脱体积150 mL;在此条件下可制得色价≥300,OD值0.4的桅子黄色素,并用其硅胶层析精制藏红花素。硅胶柱层析条件,洗脱流动相:V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)∶V(水)=10∶2∶1;V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)∶V(水)=10∶3∶1,进行梯度洗脱制取藏红花素。栀子黄色素提取液经过分离纯化,红外光谱、质谱测定,确定为藏红花素的结构,经高效液相色谱检测,藏红花素的纯度达98%。