姜黄素超分子包合物改善乙醇诱导LO2肝细胞DNA损伤的作用机制

该文主要考察了姜黄素超分子包合物(curcumin/β-cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)保护乙醇诱导LO2肝细胞损伤的分子机制.采用流式细胞仪检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞损伤后细胞周期分布的影响;Western blot检测CUR/CDP预处理对乙...     

姜黄素超分子包合物抑制HepG2肝癌细胞的增殖

对姜黄素超分子包合物抑制HepG2肝癌细胞增殖的作用进行研究。采用MTT法考察不同浓度的姜黄素超分子包合物(40～640μg/mL)处理HepG2细胞不同时间(24h、48h和72h)后对其细胞存活率的影响。然后,采用流式细胞术和测定Caspase 3/8/9酶活来探讨姜黄素超分子包合物抑制HepG2细胞增殖的作用机理。实验结果表明,随着姜黄素超分子包合物处理时间和浓度的增加,HepG2细胞的存活率呈现出逐渐下降的趋势,当处理时间为72h,姜黄素超分子包合物浓度为640μg/mL时,细胞的存活率达到最低为9.81%±1.00%。进一步的流式细胞术分析得知,HepG2细胞内的凋亡细胞数目随着姜黄素超分子包合物浓度的增加而增加,当细胞经640μg/mL姜黄素超分子包合物处理72h后,其细胞内凋亡细胞的数目(Sub-G1)达到最高为93.43%。通过对Caspase 3/8/9的酶活进行检测发现,Caspase 3/8/9的酶活也是随着姜黄素超分子包合物浓度的增加而增加,当640μg/mL姜黄素超分子包合物处理细胞72h后,Caspase 3/8/9的酶活达到最大。进一步地Western blot实验结果也表明,随着姜黄素超分子包合物浓度的增加,Caspase 3/8/9的蛋白表达水平呈升高趋势。上述实验结果表明,姜黄素超分子包合物是通过线粒体途径和死亡受体途径来诱导细胞发生凋亡从而抑制HepG2细胞增殖。     

玉米谷蛋白水解物对乙醇诱导损伤LO2细胞的保护作用

采用复合蛋白酶(protamex)和碱性蛋白酶(alcalase)协同水解玉米谷蛋白,制备玉米谷蛋白水解物(corn gluten hydrolysate,CGH),研究了玉米谷蛋白水解物的体外抗氧化活性,利用乙醇诱导LO2细胞氧化损伤模型对玉米谷蛋白水解物的抗氧化应激作用进行研究.结果表明,玉米谷蛋白水解物具有良好的...     

姜黄素超分子包合物的体外抗肿瘤活性评价

对姜黄素超分子包合物的体外抗肿瘤活性进行评价。采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)比色法检测包合物(40、80、160、320、640 μg/mL)对不同肿瘤细胞(A375黑色素瘤细胞、A549肺癌细胞、Hela宫颈癌细胞和MCF-7乳腺癌细胞)处理不同时间(24、48、72 h)后对其细胞存活率的影响,并进一步运用Annexin-V/PI双染检测包合物抑制肿瘤细胞增殖的原因。结果表明,四种细胞的存活率均随着包合物浓度和处理时间的增加呈下降趋势,并且包合物对A375细胞的增殖具有最强的抑制作用,其IC₅₀达到最低,为476.4 μg/mL。进一步的检测发现,当包合物处理A375细胞后,细胞凋亡的数量随着包合物浓度的升高而升高,从对照组的3.3%上升到35.0%,这表明,包合物通过诱导细胞凋亡来抑制A375细胞增殖。     

油酰乙醇酰胺改善LO2细胞中脂肪酸诱导的氧化应激

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是最常见的慢性疾病之一,氧化应激在其发病和发展过程中起着关键作用。油酰乙醇酰胺(OEA)作为一种天然存在的脂质信号分子,具有多种药理学特性。研究探讨了油酰乙醇酰胺对脂肪酸诱导的LO2细胞氧化应激的影响及作用机制。通过0.4 mmol/L油酸和棕榈酸混合物(摩尔比2∶1)诱导LO2细胞产生氧化应激,添加不同浓度的OEA共同处理24 h。结果表明,OEA能够显著降低LO2细胞内ROS和MDA含量,提高抗氧化酶(SOD、CAT和GPx)活性。进一步的研究表明,OEA主要通过上调Nrf2和HO-1蛋白及mRNA的表达水平来改善氧化应激。     

姜黄素环糊精分子包合物的构建和优化

构建、优化和计算机模拟可增溶姜黄素(CCN)的环糊精分子包合物(CCIC)。采用研磨法制备CCIC,显微观察法、差示量热扫描法、红外光谱法验证包合物的形成。以溶解度为评价指标,通过正交设计优化CCIC的制备工艺。用计算机进行CCIC的分子结构模拟。结果表明:CCIC最优制备工艺为包合投料比(摩尔比)为1∶1,研磨温度为40℃,包合时间为1.5 h。最优化处方工艺下姜黄素溶解度较游离药物提高了3.82×10~4倍。分子模拟结果显示分子包合可降低包合系统能量。因此,可成功构建、优化和计算机模拟CCIC,其溶解度较CCN大大提高。     

富锶茶多糖提取物的抗氧化活性及其对H2O2诱导LO2细胞氧化损伤保护研究

目的 探明富锶茶多糖最佳提取工艺,并分析其体外抗氧化活性及对H2O2诱导LO2细胞氧化损伤的保护作用。方法 本研究采用热水超声辅助法从茶叶中提取富锶茶多糖,通过Box-Behnken响应面实验法对富锶茶多糖的提取工艺条件进行了优化;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基、羟基自由基(·OH)、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) ammonium salt, ABTS]阳离子自由基的清除能力和Fe3+的还原能力来为指标,分析富锶茶多糖的体外抗氧化活性;并以过氧化氢(H2O2)建立LO2细胞损伤模型,研究富锶茶多糖对LO2细胞氧化应激损伤的改善机制。结果 富锶茶多糖的最佳的提取工艺条件为：浸提时间57 min、料液比1:25 g/mL、提取温度67℃,富锶茶多糖得率为3.50%±0.12%。在体外抗氧化方面,富锶茶多糖对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH和对Fe3+的还原能力具有较好的清除能力;在改善LO2细胞氧化应激损伤方面,随着多糖质量浓度升高,细胞存活率也显著提高,当多糖质量浓度为50 μg/mL时,细胞存活率达到99.5%;在清除机体过氧化机制上,相对于模型组,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)在低、中、高实验组中均有所增强,氧化氢酶(catalase, CAT)活力在中、高实验组中有显著提高,从细胞水平表明富锶茶多糖对LO2细胞氧化损伤具有明显的改善作用。结论 富锶茶多糖具有良好的抗氧化性以及对H2O2诱导LO2细胞氧化损伤有很好的保护作用,为富锶茶多糖功能性产品开发提供了理论基础。     

软枣猕猴桃原花青素对H2O2诱导细胞损伤的预保护作用

研究软枣猕猴桃中原花青素类化合物对过氧化氢损伤人永生化表皮细胞(Ha Cat)的保护作用。以浏阳市大围山软枣猕猴桃为试材,以体外培养的Ha Cat细胞为实验对象。试验分为3组,分别为对照组、过氧化氢损伤组、处理组(软枣猕猴桃原花青素5～1000μg/mL预处理),以细胞内细胞存活率(凋亡率)、SOD(超氧化物歧化酶)、GSH-PX(谷胱甘肽过氧化物酶)、ROS(活性氧簇)、Nrf2基因及其蛋白表达水平为综合评价指标,评价其抗氧化性强弱。实验结果表明:当加入原花青素类化合物对细胞进行预保护后,5～500μg/L浓度的原花青素对损伤细胞的存活率为77%左右,较模型组提高了2.88倍。处理组细胞内SOD(10.46 U/mg prot)、GSH-PX水平(33.83 U/mg prot)较模型组升高了108.28%、137.48%,且存在明显差异(p0.05);而ROS水平显著下降,与模型组(96.21)相比细胞内平均荧光强度下降了48.60%。此时Nrf2基因及其蛋白表达量分别为1.40、35.11较模型组分别提高了63.93%、80.70%。这说明软枣猕猴桃中原花青素类化合物对H_2O_2造成Ha Cat细胞的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天然有效抗氧化剂产品应用于市场中。     

姜黄素超分子包合物的结构鉴定及其抗氧化活性

采用β-环糊精聚合物制备姜黄素超分子包合物并对其抗氧化活性进行测定。应用高效液相色谱法（HPLC）检测包合物中姜黄素的含量,并运用差示扫描量热仪（DSC）、傅立叶红外光谱仪（FT-IR）和X-射线衍射仪（XRD）对包合物进行结构鉴定。运用分光光度法测定包合物对ABTS和DPPH自由基的清除能力。研究表明,所制备的包合物得率和包合率分别为63.5%和34.5%。经DSC、FT-IR和XRD鉴定包合物已形成。抗氧化活性实验表明,包合物对ABTS自由基和DPPH自由基具有较好的清除能力,呈浓度和时间依赖性。实验结果表明,采用本实验方法可以成功获得具有一定抗氧化活性的姜黄素超分子包合物,这为姜黄素的剂型改善及其应用提供了新的技术手段和理论参考数据。      

软枣猕猴桃黄酮对过氧化氢诱导HaCaT细胞损伤的保护作用

研究软枣猕猴桃中黄酮类化合物对过氧化氢（H2O2）损伤人永生化表皮细胞（HaCaT细胞）的保护作用。 以湖南省浏阳市大围山软枣猕猴桃为实验材料,以体外培养的HaCaT细胞为实验对象。实验分为空白对照组、H2O2 模型组、阳性对照组（VC组）和黄酮处理组（软枣猕猴桃黄酮0.1～1.0 mg/mL预处理）,以细胞内超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase,SOD）活力、活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平为综合评价指标,并以VC作 为阳性对照评价其抗氧化活性。实验结果表明：当H2O2浓度为30 μmol/L时,细胞相对存活率为40%左右,较好地 诱导了HaCaT细胞氧化损伤模型。当加入黄酮类化合物对细胞进行预保护后,质量浓度0.3、0.6 mg/mL的黄酮处理 组细胞相对存活率为60%左右,较模型组均提高了20%左右。0.3 mg/mL黄酮处理组细胞内SOD活力（6.33 U/mg） 较模型组升高了约1 倍,且存在明显差异（P＜0.05）;ROS水平显著下降,与模型组（677.80）相比下降了13%左 右。说明软枣猕猴桃中黄酮类化合物对H2O2造成的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天 然抗氧化剂产品投入市场。     

光甘草定/环糊精固体包合物的制备和性质

采用分子对接和相溶解度结合的方法研究不同环糊精（cyclodextrin,CD）与光甘草定（glabridin,GLD）之间的包合能力,筛选出适宜包合GLD的CD;制备GLD/CD固体包合物,考察不同干燥方法、不同投料比对固体包合物的包合率、载药量和溶解度的影响;通过扫描电子显微镜、差示扫描量热法、傅里叶变换红外光谱法和分子对接技术分别对包合物的形貌、包合物中GLD的存在形式、GLD与CD的相互作用和空间构象进行研究;采用体外溶出实验考察GLD在包合前后溶出特性的变化;采用噻唑蓝法比较GLD及其包合物对人肝癌细胞株（HepG-2）细胞增殖的抑制作用。结果表明：多种CD都能与GLD形成物质的量比1∶1的包合物,其中2-磺丁基-β-环糊精（2-sulfobutyl-β-cyclodextrins,2-SBE-β-CD）包合GLD的能力优于其他CD及其衍生物;不同制备方法制备的GLD/2-SBE-β-CD固体包合物的包合率和载药量均无显著差异,但包合物的水溶性有一定差异。适当提高GLD与2-SBE-β-CD物质的量比,包合率虽有一定程度下降,但可显著提高载药量。GLD与2-SBE-β-CD物...     

绿原酸对UVB损伤人永生化表皮角质细胞的保护作用

为研究绿原酸（chlorogenic acid,CGA）对UVB损伤人永生化表皮角质细胞（HaCaT）的保护作用及机制,通过MTT法建立细胞紫外损伤（光老化）模型及绿原酸的处理方式,采用酶标仪检测绿原酸的紫外吸收,流式细胞术检测细胞的凋亡水平,ABTS法检测绿原酸的自由基清除能力。结果表明：UVB辐射剂量为21.6 mJ/cm²,绿原酸浓度为100.000、150.000 μmol/L,预处理1 h后细胞培养12 h,绿原酸在UVB波段（280~320 nm）内有较强的吸收;100.000 μmol/L和150.000 μmol/L 绿原酸均能显著降低UVB引起的细胞凋亡;150.000 μmol/L 绿原酸能有效增加UVB处理细胞的ABTS⁺自由基清除能力,达到了53%。由此可知,绿原酸在UVB诱导的HaCaT光老化模型上,具有很强的抗皮肤光老化活性,其机制可能与绿原酸的紫外吸收以及抗氧化能力相关,为富含绿原酸的食品资源开发利用提供科学依据。     

Effect of Ethanol on Formation of Cyclodextrin from Soluble Starch by Bacillus macerans Cyclodextrin Glucanotransferase

Formation of cyclodextrin (CD) from soluble starch by Bacillus macerans CGTase (cyclodextrin glucanotransferase) was studied experimentally in both systems with and without the addition of ethanol. The yields of α-, β- and γ-CD after long time reaction were almost independent of initial concentration of starch (5–50 g/l) in both the systems. The α-CD yield in the presence of ethanol was increased by 1.8–1.9 times of that in the absence of ethanol, while the β-CD yield was decreased by the amount almost comparable to the increase in α-CD yield. Initial rates of CD formation were decreased with increasing ethanol concentration, which was remarkable especially for α-CD.     

饱和水溶液法制备核桃油包合物工艺

以收率和包合率为指标,采用饱和水溶液法制备核桃油-β-环糊精包合物,通过单因素和正交试验确定优化工艺条件,并考察产品氧化稳定性和水溶性。结果表明：最佳制备工艺条件为核桃油与β-环糊精质量比1:4、包合时间4.5h、包合温度65℃,此条件下包合率达81.6%、收率达61.6%;经紫外分光光度法检测,核桃油-β-环糊精已形成包合物,核桃油-β-环糊精包合物可明显提高核桃油的氧化稳定性和水溶性。     

紫芜菁乙醇提物对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

探讨紫芜菁乙醇提取物(BREE)的体外抗氧化能力及其对人肠上皮Caco-2细胞氧化损伤保护效果。二苯代苦味酰基自由基(DPPH)、羟基自由基(·OH)清除率与总还原力评估BREE的体外抗氧化力。过氧化氢(H_2O_2,150μmol/L)建立Caco-2细胞氧化损伤模型评估BREE的细胞保护效果。受损细胞生存率的影响以MTT法测定。细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平依说明用试剂盒测定。硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量。2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠法测定细胞内活性氧(ROS)水平。酶联法测定白介素(Interlukin,IL)-1β和IL-8的水平。BREE具有较强的自由基(DPPH和·OH)清除力和总还原力。BREE能显著抑制H_2O_2造成的细胞死亡,提高受损细胞中抗氧化物酶(SOD、CAT和GSH-Px)活性,降低受损细胞内MDA与ROS的生成,并抑制IL-1β和IL-8的分泌。结果提示,BREE具有较强的体外抗氧化能力,能增强细胞内源性抗氧化酶的活力显著改善H_2O_2引发的Caco-2细胞氧化应激损伤并降低炎症反应。     

花色苷对LO2细胞核受体报告基因的影响

研究花色苷矢车菊素-3-O-β-D-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-β-D-glucoside,C3G)及其苷元矢车菊素(cyanidin)对代谢综合征紧密相关的一系列核受体转录活性的影响。将维甲酸X受体(RXR)、孕烷X受体(PXR)、雌激素受体(ER)、法尼醇X受体(FXR)、肝脏X受体α和β(LXRα,LXRβ)、3种过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPARα、PPARγ、PPARδ)等核受体-萤光素酶报告基因和绿色荧光蛋白基因内参转染至人肝细胞LO2建立模型,分别以1、10、100μmol/L的Cyanidin或C3G干预培养细胞24h,筛选可被Cyanidin或C3G激活的核受体类型。结果显示,与溶剂对照组(0.1%DMSO)相比,3种浓度的Cyanidin对RXR都有抑制作用,但是仅在100μmol/L浓度条件下对PXR有较弱的激活作用(1.42±0.19,P<0.05);C3G则对PXR、ER、LXRα、LXRβ、PPARγ、PPARδ等多种核受体有激活作用(P<0.05),其中对PXR、LXRα、LXRβ、PPARγ等核受体的激活倍数超过对照组50%以上。实验结果提示,花色苷改善代谢综合征的作...     

无花果乳浆石油醚萃取产物对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

该文研究了药食两用植物无花果所含有的乳浆对于高糖所致人脐静脉血管内皮细胞（Huvec）损伤的保护作用,并初步探讨作用机制。采用系统溶剂萃取法制得无花果乳浆的不同极性供试品,建立Huvec细胞高糖损伤模型,分别采用MTT法、“划痕实验”、Transwell侵袭实验、流式细胞仪凋亡检测、血管生成试验和ELISA法考察无花果乳浆的保护效果及作用机制。结果显示,高糖环境使Huvec细胞48 h内增殖率、迁移率、侵袭率分别下降至76.04%、28.36%、22.09%（p<0.001）,凋亡率上升至24.23%（p<0.001）,血管形成能力下降,乳酸脱氢酶（LDH）、血管内皮生长因子（VEGF）和内皮素-1（ET-1）含量分别升高至20.96 μg/L、90.03 ng/L、839.41 ng/L（p<0.01）,超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）含量分别下降至3.52 μg/L、184.75 μmol/L、0.59 IU/mL（p<0.01）,100、200、400 mg/L无花果乳浆石油醚萃取产物可显著性提高Huvec细胞增殖、迁移和侵袭能力及降低凋亡率（p<0.001）,恢复紊乱的血管生理因子水平。无花果乳浆的石油醚萃取产物可以减轻高糖引起的Huvec损伤,具有明显的细胞保护作用。     

环糊精包合物表征手段的研究进展

环糊精分子具有独特的空间结构和高度选择性,在荧光分析、药物控制释放、手性识别、模拟酶、分子开关、超分子构筑等方面起着重要作用.环糊精与药物形成包合物后能大大增加药物的溶解度、生物利用度及实现靶向作用.现对研究环糊精和药物形成包合物的常用表征手段及其优缺点作一综述.     

环糊精包合物表征手段的研究进展

环糊精分子具有独特的空间结构和高度选择性,在荧光分析、药物控制释放、手性识别、模拟酶、分子开关、超分子构筑等方面起着重要作用。环糊精与药物形成包合物后能大大增加药物的溶解度、生物利用度及实现靶向作用。现对研究环糊精和药物形成包合物的常用表征手段及其优缺点作一综述。     

基于环糊精衍生物的新型双元絮凝/络合体系的研究

本文研究了阳离子改性环糊精和环糊精星形聚合物两种环糊精衍生物与阴离子聚丙烯酰胺共聚物组成的双元絮凝／络合体系对高岭土悬浊液的絮凝作用及其影响因素，同时研究了两种双元体系对甲苯的络合去除作用。研究表明，两种双元絮凝／络合体系同时具备絮凝和吸附功能，都对高岭土悬浊液具有良好的絮凝作用，但环糊精星形聚合物双元体系在用量极低的条件下就可以达到很高的絮凝效率。环糊精星形聚合物对甲苯的去除作用远大于阳离子改性环糊精，两种双元体系组分的加入顺序对甲苯的去除效果影响不大。由于环糊精星形聚合物具有独特的星形臂结构和较高的电荷密度，使其与阴离子组分间的静电相互作用增强，从而极大地促进了絮凝和去除作用。