异甘草素抑制α-葡萄糖苷酶的分子机制

α-葡萄糖苷酶活性与糖尿病患者的餐后血糖水平有重要关联,寻找食源性的α-葡萄糖苷酶抑制剂是当前功能性食品研究的热点。异甘草素是甘草的重要活性成分,相关研究表明甘草提取物具有α-葡萄糖苷酶抑制活性,推测与异甘草素有关。鉴于此,本实验通过酶抑制、荧光猝灭以及分子对接等方法研究异甘草素抑制α-葡萄糖苷酶活性的机制。结果表明,异甘草素以竞争性与非竞争性相混合的方式抑制α-葡萄糖苷酶,其抑制效果明显优于阿卡波糖。荧光猝灭分析结果表明在疏水作用力驱动下异甘草素可与α-葡萄糖苷酶结合生成复合物,结合位点数为1。分子对接结果验证了相关实验结论：异甘草素位于酶的疏水口袋中,与残基Asp202和Arg400以氢键结合,并与周围众多的疏水残基存在疏水作用,共同维持该复合物结构。本研究对于开发新型的食源性α-葡萄糖苷酶抑制剂、推动异甘草素在功能性食品和医药领域的应用具有一定的参考意义。     

壳聚糖固定化α-转移葡萄糖苷酶研究

本文以高脱乙酰度壳聚糖为载体,进行固定化α-转移葡萄糖苷酶最佳条件研究,并探讨了固定化α-转移葡萄糖苷酶的酶学性质.固定化酶的最适pH为5.0,最适作用温度为65 C,连续反应的稳定性好.     

应用α-葡萄糖苷酶制异麦芽低聚糖的研究

从十几种霉菌中筛选出1株产α-葡萄糖苷酶活性较高的黑曲霉M-1。采用不同培养方式,液体培养2d或固体培养3d,均有较高的酶活。当种量为5％,29℃酶促反应72h,异麦芽低聚糖含量可达86％以上。     

水果酵素体外抗氧化及抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的研究

为明确水果酵素在自然发酵过程中体外抗氧化活性和对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制作用,以DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除能力为指标,研究酵素的抗氧化活性;以可溶性淀粉和4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物测定酵素对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用。试验结果表明,酵素在发酵结束后DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率分别达到87.19%和100.00%;对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率分别达到99.57%和81.67%。酵素对DPPH自由基、ABTS自由基的清除作用和对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制作用明显,表明具有较好的抗氧化活性和降血糖潜力。     

典型甜菊糖苷的抗氧化和抗炎活性

本文以6种代表性甜菊糖苷及其肠道代谢物甜菊醇以及甜菊醇的重排异构体异甜菊醇为对象,研究了上述甜菊化合物的抗氧化性及其对鼠巨噬细胞Raw264.7的细胞毒性和抗炎活性。结果表明,所试甜菊糖苷在100 μg/mL内对鼠巨噬细胞的Raw264.7均无细胞毒性,也不会诱导炎症反应;其中异甜菊醇抗炎效果最优,100 μg/mL时相对于脂多糖刺激后产生的NO含量降低了约30.7%。所试甜菊糖苷对DPPH·和·OH两种自由基的清除率最高分别为24.8%和13.8%,其对DPPH·的清除能力具有结构相关性,但对·OH清除率均低,无结构相关性;而甜菊酚对DPPH·和ABTS+·清除率分别为92.1%和29.6%,即甜菊提取物的自由基清除率主要由甜菊酚产生。     

抑制α-葡萄糖苷酶的花生蛋白活性肽制备工艺研究

目的研究超声波辅助蛋白酶酶解制备抑制葡萄糖苷酶的花生蛋白活性肽工艺方法。方法以冷榨花生蛋白粉为原料,以底物浓度、pH值、加酶量、温度、时间、超声波功率为考察因素,以α-葡萄糖苷酶抑制率为考察指标,在单因素实验基础上,通过响应面的Box-Benhnken实验设计进行工艺优化。结果超声波辅助蛋白酶酶解制备的α-葡萄糖苷酶抑制活性肽复合物的最优工艺条件为底物浓度11.13%、pH值9.45、加酶量1.2%、温度42℃、时间44min、超声波功率1200W;此工艺条件下的α-葡萄糖苷酶抑制率的响应面模型预测值为91.07%,验证实验的抑制率为(88.70±0.63)%,与模型预测值相差2.60%,说明模型与实际情况拟合较好,验证了预测模型的正确性。结论响应面法对超声波辅助蛋白酶解制备抑制α-葡萄糖苷酶的花生蛋白活性肽工艺条件参数优化是可行的,得到的工艺条件具有实际应用价值。     

余甘子多酚α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化作用

采用α-葡萄糖苷酶抑制模型,研究余甘子多酚提取物(polyphenol extracts from Phyllanthus emblica L.,PEPs)对α-葡萄糖苷酶抑制作用,并通过PEPs还原能力及自由基清除试验,测定其抗氧化作用。结果表明,PEPs能有效抑制α-葡萄糖苷酶活性,抑制率可达95.71%,半数抑制浓度(IC50)为0.71 mg/m L。PEPs具有一定的还原能力,在0.01 mg/m L~0.03 mg/m L,PEPs的还原能力与维生素C(Vitamin C,VC)相当。PEPs能有效清除自由基,其清除羟基自由基(·OH)和1,1-二苯-2-苦肼自由基(DPPH·)的IC_(50)值分别为0.77 mg/m L、5.23 mg/L,清除DPPH·的能力高于V_C,且PEPs对α-葡萄糖苷酶的抑制及抗氧化作用呈剂量依赖关系,PEPs具有很好的开发价值。     

基于超滤技术的苦荞提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

探究苦荞提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性的物质基础和作用机制。比较研究了苦荞不同溶剂提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用,采用超滤技术,结合HPLC分析鉴定了苦荞中抑制α-葡萄糖苷酶活性的主要成分,并研究了其相互作用机制。结果表明,苦荞80%乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果最为明显,其次为30%丙酮提取物,而水提取物相对较差。进一步研究发现,80%乙醇提取物中主要有3种成分在抑制α-葡萄糖苷酶活性中发挥着主要作用,其中2种物质分别是芦丁和槲皮素,两者可与α-葡萄糖苷酶中的多个氨基酸残基形成氢键,从而"占据"酶的活性中心,抑制其活性。     

芭蕉的α-葡萄糖苷酶抑制活性

利用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型对芭蕉花与根提取物进行活性评价,并与阳性对照Acarbose比较,发现芭蕉花与根提取物均能抑制α-葡萄糖苷酶活性。除芭蕉花的乙酸乙酯和正丁醇提取物外,其他提取物活性均远大于阳性对照Acarbose（IC50=1103.01μg·mL-1）。其中,芭蕉根和花的石油醚提取物的活性最高（IC50=32.03μg·mL-1和49.37μg·mL-1）。不同部位比较,芭蕉根的α-葡萄糖苷酶抑制活性好于花;同一部位不同溶剂的提取物比较,石油醚提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性高于乙酸乙酯和正丁醇提取物。      

α—葡萄糖苷酶合成异麦芽寡糖机理的研究

Ａ．ｃａｒｂｏｎａｒｉｏｕｓ ＣＣＲＣ３０４１４生产的α－葡萄糖苷酶,能够把麦芽糖或其他寡糖非还原端葡萄糖基转移到葡萄糖和其他含有葡萄糖基的寡糖分子上,被转移的葡萄糖基通常连结到６－ＯＨ位置。该酶以３０％麦芽糖作底物,可得到５０％以上的异麦芽寡糖。由Ａ．ｃａｒｂｏｎａｒｉｏｕｓ ＣＣＲＣ３０４１４菌株产生α－葡萄糖苷酶的分离纯化和部分酶学性质已作过报告。α－葡萄糖苷酶不仅能催化水解反应,同时也催     

芭蕉的α-葡萄糖苷酶抑制活性

利用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型对芭蕉花与根提取物进行活性评价,并与阳性对照Acarbose比较,发现芭蕉花与根提取物均能抑制α-葡萄糖苷酶活性。除芭蕉花的乙酸乙酯和正丁醇提取物外,其他提取物活性均远大于阳性对照Acarbose(IC50=1103.01μg·mL-1)。其中,芭蕉根和花的石油醚提取物的活性最高(IC50=32.03μg·mL-1和49.37μg·mL-1)。不同部位比较,芭蕉根的α-葡萄糖苷酶抑制活性好于花;同一部位不同溶剂的提取物比较,石油醚提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性高于乙酸乙酯和正丁醇提取物。     

芦荟醇提物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果

为探讨芦荟醇提物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,从5种芦荟中筛选出对α-葡萄糖苷酶抑制效果最好的品种,以期从该芦荟中获得降低餐后血糖的功能成分。采用α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选模型,通过抑制率高低确定抑制作用最好的芦荟品种,以酶浓度—反应速度及Lineweaver-Burk作图法确定酶抑制类型。结果发现,5种芦荟中木立芦荟醇提物抑制率为87.95%,效果最好;芦荟提取物是α-葡萄糖苷酶的非竞争性抑制剂,且呈剂量依赖性关系,其Km为0.442mmol/L;酶抑制动力学进程曲线表明其反应初速度的时间为18 min。以上结果提示,芦荟中含有活性较高的α-葡萄糖苷酶抑制剂,可开发用于糖尿病及其并发症的治疗与预防。     

45种蔬菜水果对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制活性研究

比较了不同的水果、蔬菜对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。结果表明,水果中,杏、猕猴桃对α-葡萄糖苷酶的抑制作用明显,柠檬、青提、红富士也具有比较好的抑制作用;蔬菜中洋葱抑制效果好。但整体来看,水果对α-葡萄糖苷酶的抑制效果明显优于蔬菜。不同种类的蔬果对α-淀粉酶抑制作用有所不同,较强的是猕猴桃、芹菜、胡萝卜,总体来看,蔬菜对α-淀粉酶抑制作用优于水果。混合食用果蔬可为降低餐后血糖提供依据。     

裙带菜α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备

通过响应面法优化裙带菜α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备工艺,以期得到一种调控餐后血糖的新型有效成分。选择五种蛋白酶酶解裙带菜蛋白筛选最佳水解酶,研究底物浓度、加酶量、pH、酶解温度、酶解时间对产物抑制率和水解度的影响,并根据单因素实验结果运用Box-Behnken设计原理进行三因素三水平的响应面优化试验,测定酶解液的分子量并绘制酶抑制动力学曲线。结果表明,最佳酶解条件为碱性蛋白酶,底物浓度7.11%,pH10.14,温度47 ℃,加酶量10000 U/g,反应时间1 h,在此条件下,酶解液的抑制率为51.17%,与预测值接近;裙带菜酶解液多为小肽,半抑制浓度为46.079 mg/mL,抑制类型为典型的可逆混合型抑制。本研究获得了裙带菜α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的最佳制备工艺和理化性质,为开发新型降血糖活性肽提供理论基础和实验依据。     

桑叶生物碱的活性炭脱色工艺优化及其α-葡萄糖苷酶抑制活性

研究并优化桑叶生物碱的活性炭脱色工艺,考察脱色处理对生物碱α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响。以桑叶生物碱提取液为研究对象,利用加权评分法将脱色率和保留率归一化为Z值,通过单因素和L₉(34)正交试验考察四个因素对活性炭脱色效果的影响,优化出最佳脱色条件;通过体外实验,测定脱色前后生物碱对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。结果表明,最佳脱色条件:桑叶生物碱提取液用4%活性炭在60 ℃脱色25 min,脱色2次,脱色率和保留率分别为79.80%和78.52%,其Z值为100;2.0~8.0 mg/mL脱色后生物碱的α-葡萄糖苷酶抑制率显著高于脱色前(P<0.05),脱色前、后桑叶生物碱的最大抑制率分别为51.37%和63.06%,脱色前、后生物碱对α-葡萄糖苷酶的IC₅₀分别为7.75和4.27 mg/mL。本实验建立了桑叶生物碱活性炭的脱色方法,脱色后生物碱对α-葡萄糖苷酶的抑制活性强于脱色前,为桑叶生物碱提取和纯化提供了实验依据。     

响应面法优化微波辅助酶解制备α-葡萄糖苷酶抑制活性肽工艺

为了优化微波辅助酶解制备α-葡萄糖苷酶抑制活性肽工艺,以冷榨花生蛋白粉为原料,以酶解得到的α-葡萄糖苷酶抑制活性肽复合物对α-葡萄糖苷酶的抑制率为考察指标,在单因素实验基础上,通过响应面Box-Benhnken实验设计进行工艺优化。结果表明,最优工艺条件为底物浓度9.77%、加酶量0.94%、温度59 ℃、时间10 min、pH9.0、微波功率1000 W;此工艺条件下的α-葡萄糖苷酶抑制活性肽复合物对α-葡萄糖苷酶的抑制率的响应面模型预测值为84.80%,验证实验的抑制率为90.21%±0.93%,两者的差异值为6.38%。本研究结果为花生α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的分离、纯化和应用等研究提供了理论基础。     

红果参果化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

为了探究红果参果化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性。本实验以红果参果为材料,采用溶剂法制备红果参果乙醇提取物和粗多糖。采用紫外分光光度法测定其总黄酮、总花色苷、总多酚和多糖含量,进一步通过超高效液相色谱-飞行时间-串联质谱技术分析其化学成分。利用α-葡萄糖苷酶抑制模型考察粗多糖、乙醇提取物及其主要代表成分的体外α-葡萄糖苷酶抑制作用。结果表明,5个批次的红果参果粗多糖多糖含量为27.59%~37.59%;乙醇提取物的总黄酮含量为1.22%~1.77%,总花色苷为0.90%~1.14%,总多酚含量为13.11%~18.85%。红果参果乙醇提取物化学成分丰富多样,从中共鉴定出21个化合物,其中包含10个黄酮、3个有机酸、3个花色苷、3个酚酸、1个氨基酸和1个聚炔类成分。红果参果乙醇提取物、粗多糖和代表化合物木犀草素的α-葡萄糖苷酶的IC₅₀分别为7.52、37.43和8.03 μg/mL,明显高于阳性对照阿卡波糖（616.17 μg/mL）。本研究初步明确了红果参果的物质基础,并首次报道了红果参果具有潜在抗糖尿病活性,为红果参果的开发利用提供理论参考。     

杨梅素对α-葡萄糖苷酶的抑制活性机理研究

为了揭示杨梅素对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用的机理,本文利用现代光谱分析方法,结合原子力显微镜和分子模拟对接技术对杨梅素与α-葡萄糖苷酶之间的相互作用进行了研究。结果表明,杨梅素对α-葡萄糖苷酶的活性具有很强的抑制作用,IC50值为0.99×10-5mol/L。酶抑制动力学研究发现杨梅素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用属于典型的竞争型抑制,α-葡萄糖苷酶中存在一个或一类杨梅素的抑制位点,同时杨梅素可与α-葡萄糖苷酶中的荧光发色团发生相互作用,静态淬灭其内源性荧光。分子模拟对接实验表明,杨梅素可以与TYR158、GLN279、GLU277、ASP215和ASP352氨基酸之间形成氢键,改变α-葡萄糖苷酶周围的微环境,使其产生聚集的现象。从而起到抑制作用。      

柚皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其机制

为研究柚皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,本文采用酶动力学、荧光光谱和分子对接等方法研究了柚皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制效果、抑制作用类型及其抑制作用的分子机制。柚皮素对α-葡萄糖苷酶的IC₅₀为0.174 mmol/L,显著低于阿卡波糖的0.721 mmol/L,为非竞争型抑制剂,K_i值为0.114 mmol/L;柚皮素和α-葡萄糖苷酶的结合导致了酶分子的内在荧光静态猝灭,猝灭常数为0.1598×104 L/mol,结合位点数n为1。分子对接结果显示,在氢键、离子键、疏水作用、π-π T型堆积、静电作用五种作用力的驱动下,柚皮素结合于α-葡萄糖苷酶分子的一个疏水口袋中,结合能为?7.6 kJ/mol。本文研究结果表明,柚皮素是一种较好的食源性α-葡萄糖苷酶抑制剂,在辅助治疗糖尿病功能食品中具有良好的应用前景。     

栀子黄对α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究

栀子黄是传统中药栀子的主要开发产品,在食品、药品等领域得到广泛应用。本文通过单因素实验对底物浓度、酶量和反应时间等进行工艺条件优化。在此基础上,研究了栀子黄对α-葡萄糖苷酶的抑制效果及酶抑制动力学。结果表明:体外研究α-葡萄糖苷酶抑制活性的最佳反应体系为底物浓度为3 mmol/L、酶量为50μL、反应时间为50 min;栀子黄对嗜热芽孢杆菌来源的α-葡萄糖苷酶没有表现出抑制活性,而对猪胰肠来源的α-葡萄糖苷酶、大米α-葡萄糖苷酶和酵母α-葡萄糖苷酶表现出不同的抑制活性,且抑制类型为竞争性抑制。因此,栀子黄具有α-葡萄糖苷酶抑制活性。本研究对提升降糖效果和解析降糖机制的相关研究方面具有重要的参考价值。