六堡茶提取物对高脂小鼠肠道菌群的影响研究

将六堡茶提取物与高脂小鼠粪便进行体外发酵培养,比较正常对照组和体外发酵组的菌群变化情况,探讨六堡茶对高脂小鼠肠道菌群的影响。结果显示,随着发酵时间的延长,总厌氧菌的数量与发酵0 h比较呈现显著增长趋势,且在发酵至24 h,总厌氧菌的数量明显超过了正常对照组,而总需氧菌数量在发酵36 h后,才发生显著性变化,较0 h明显降低了8.4%,并显著低于正常对照组水平。其中,双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌和肠球菌的数量在发酵36 h后,与正常对照组相比无显著性差异,均趋向于正常对照组水平,而大肠杆菌的数量虽呈降低趋势,但仍高于正常对照组。研究结果表明,六堡茶提取物能够促进高脂小鼠肠道菌群中厌氧菌的生长,并抑制需氧菌的繁殖,调节高脂饮食引起的小鼠肠道菌群紊乱。      

六堡茶水提物对小鼠腹泻及肠道菌群的影响

目的 探讨六堡茶水提物对番泻叶诱导的小鼠腹泻及肠道菌群的影响。方法 采用六堡茶水提物对小鼠进行20 d的腹泻预防灌胃,从第16 d开始同时给予小鼠番泻叶煎剂诱导小鼠腹泻模型;试验结束时观察各组小鼠行为状态、体重、腹泻率及腹泻指数,检测盲肠内容物pH值及氨态氮含量、粪便肠道菌群数量,分析空肠绒毛形态结构。结果 与正常组相比,模型组小鼠体重显著减轻(P<0.05)、稀便率和腹泻指数均极显著上升(P<0.01),说明番泻叶诱导小鼠腹泻模型构建成功。与模型组相比,六堡茶防治组特别是高剂量组能明显降低了稀便率和腹泻指数(P<0.05),降低了小鼠盲肠内容物pH值及氨态氮含量(P<0.05),增加了小鼠肠道双歧杆菌数量并减少肠球菌数量(P<0.05),提升了小鼠空肠绒毛长度与隐窝深度的比值(V/C值, P<0.05)。结论 六堡茶对小鼠腹泻具有一定防治作用,其止泻作用可能与改善肠道内环境及修复双歧杆菌和肠球菌数量有关。     

六堡茶工艺的探讨

近年来,随着传统边销黑茶——云南普洱茶需求量和影响力的扩大,同属传统黑茶的捂州六堡茶也为众多爱茶之人所推崇,其独有的风味品质和保健作用逐渐被人们重新认识,六堡茶素以“红、浓、陈、醇”四绝著称,这与它独特的加工工艺过程有关,有必要加强对其加工工艺的探讨和研究。     

六堡茶茶汤中胶体颗粒及沉淀性状研究

黑茶主要由微生物发酵形成,六堡茶是典型的黑茶之一,发酵对茶汤胶体性质与茶乳酪的成分组成是否有影响,尚未明确。本文通过动态光散射、扫描电子显微镜和高效液相色谱等方法比较了六堡茶毛茶以及发酵后的成品茶茶汤的胶体颗粒性质。结果表明,六堡茶毛茶和成品茶的茶汤均存在丁达尔现象,即存在胶体体系。两种茶汤在冷却过程的浊度变化率逐渐减少,接近常温时,成品茶茶汤浊度增加率小于毛茶;两种茶汤中均存在球形或椭球形的胶体颗粒,且胶粒粒径与Zeta电位具有温度响应。室温下成品茶茶汤的胶体颗粒平均粒径(2131 nm)显著低于毛茶(3045.8 nm),成品茶Zeta电位绝对值(-24.8 mV)高于毛茶(-19.2 mV)。两种茶汤成分差异导致二者沉淀差异,成品茶固形物相对沉淀率(2.22%)少于毛茶(2.79%),成品茶沉淀主要成分为茶红素、茶褐素和多糖,占沉淀94.11%,毛茶则为多酚、蛋白质和多糖,占沉淀75.76%,两种茶汤沉淀中酯型儿茶素总量均高于非酯型儿茶素总量,其酯型儿茶素、蛋白质、多糖和黄酮较易参与沉淀形成。因此,发酵使成品六堡茶的茶汤的胶体颗粒的稳定性增加,使其形成的茶乳酪与发酵前存在明显的差异。本研究为黑茶饮料等食品的开发提供了理论基础。     

陈香六堡茶品质特征及香气质量评价方法建立

为探究陈香型六堡茶品质特点,对典型样本进行品质成分分析,采用顶空-固相微萃取法(HS-SPME)结合GC-MS分析香气成分,对26种共有芳香物质进行主成分分析,以不同主成分特征值的方差贡献率为加权系数,结合主成分线性回归方程构建陈香六堡茶的香气质量综合评价函数,并利用所建函数计算样本得分排序进行香气质量评价.结果表明:...     

六堡茶中稀土元素及矿质元素含量特征分析

目的 探究六堡茶以及六堡茶原料毛茶中无机元素的含量特征。方法 以26个六堡茶成品茶和6个原料茶为研究对象, 采用电感耦合等离子质谱法测定稀土元素, 采用电感耦合等离子发射光谱法测定矿质元素。结果 六堡茶成品茶中稀土元素总量范围[(0.72~2.79) mg/kg],原料茶中稀土元素总量范围[(0.42~0.71) mg/kg],其中含量较高的稀土元素为铈(Ce)、镧(La)、钪(Sc)、钕(Nd)、钇(Y),这5种元素含量之和分别占16种稀土元素总量的82.3%(六堡茶成品茶)和89.6%(原料茶);六堡茶成品茶的矿质元素总量范围[(22655.48~37517.18) mg/kg],原料茶中矿质元素总量范围[(22083.48~35647.29) mg/kg], 其中含量较高的矿质元素为钾(K)、磷(P)、钙(Ca)、镁(Mg),这4种元素含量之和分别占19种矿质元素总量的95.6%(成品茶)和95.9%(原料茶)。结论 研究表明六堡茶成品茶中稀土元素含量显著高于原料茶(P<0.05),而矿质元素含量在二者间差异不显著(P>0.05)。     

六堡茶的水溶性成分分析与研究进展

六堡茶独特的感官品质与保健功效与其后发酵过程微生物的参与具有密切联系。为探究六堡茶渥堆与蒸压工艺过程中真菌的多样性及分布规律,利用传统分离培养法与分子生物学鉴定技术对六堡茶毛茶、渥堆各个阶段以及蒸压后共14个样品中的真菌进行研究。结果表明：从研究样品中分离到13个属,39种真菌。其中,22种真菌为首次在六堡茶中报道,包括3种金花菌和6种酵母菌。研究发现六堡毛茶及渥堆茶样中Aspergillus（曲霉属）和Penicillium（青霉属）是主要的优势菌属,蒸压后,样品中只能分离出Aspergillus niger（黑曲霉）、Aspergillus sydowii（聚多曲霉）、Penicillium laeve、Penicillium gerundense四种真菌,其他曲霉属和青霉属真菌几乎无法检测到。蒸压后的样品中以Talaromyces（篮状菌属）为主要的优势菌属。在种水平上,所有茶样中,Aspergillus niger和Arxula adeninivorans是主要的优势菌种。研究结果丰富了六堡茶加工过程真菌多样性的认知,并为进一步探究不同茶源真菌对六堡茶品质影响提供了材料基础和理论依据。     

ICP-MS法测定六堡茶冲泡过程中稀土浸出率的研究

选取5种具有代表性、稀土含量不同的六堡茶进行稀土浸出率的研究。对照六堡茶地方标准中感官检验要求的冲泡方法,利用ICP-MS测定六堡茶冲泡过程中16种稀土元素的总浸出率,同时对六堡茶茶汤摄食安全性进行评估。研究表明,六堡茶冲泡过程中16种稀土元素的浸出率均在24%以下,根据ADI的参考值,处于较低的暴露水平。因此,建议六堡茶中稀土限量放宽到6mg/kg。     

苍梧六堡茶与其他茶叶中酚酸的对比研究

选取苍梧盒装六堡茶、竹篓装六堡茶、云南普洱茶、桂平绿茶,以及福建乌龙茶作为研究对象,旨在探讨苍梧六堡茶与其他茶叶中酚酸含量及种类的不同。通过分离提取,结果说明了苍梧六堡茶的酚酸含量比云南普洱茶要高,比桂平绿茶和福建乌龙茶要低。其中苍梧盒装六堡茶、桂平绿茶和福建乌龙茶的50%甲醇洗脱液中酚酸纯度最高,分别为34.1%、60.0%、66.3%;苍梧竹篓装六堡茶的100%甲醇洗脱液中酚酸纯度最高,为36.8%;云南普洱茶的10%甲醇洗脱液中酚酸纯度最高,为17.8%。最后用HPLC分析检测酚酸,结果表明苍梧竹篓装六堡茶中存在两种含量较高的特征性酚酸,而云南普洱茶中也存在一种含量较高的特征性酚酸。相对于桂平绿茶和福建乌龙茶,属于黑茶的苍梧六堡茶和云南普洱茶中酚酸含量较少,但却存在一些含量较多的特征性酚酸。     

新型陈化技术对六堡茶品质的影响

陈化是提升六堡茶品质的重要工序,为明确新型陈化技术对六堡茶品质的影响,比较了新型陈化技术处理与正常仓储的六堡茶的感官品质与理化成分。结果表明,经过新型陈化技术处理的六堡茶汤色更红,香气滋味更显陈味,水浸出物、茶多酚、游离氨基酸含量低于正常仓储的六堡茶。新型陈化技术为稳定提升六堡茶品质提供了新的便捷途径。     

茶多糖-茶多酚对小鼠肠道氧化应激的改善与作用机制

目的：探究茶多糖-茶多酚混合功能成分（tea extract rich in polysaccharides and polyphenols,TEPP）是否能够改善D-半乳糖诱导的小鼠肠道氧化应激反应,同时探究其抗氧化机制。方法：小鼠腹腔注射质量分数10% D-半乳糖8 周建立氧化应激模型,造模成功后,正常组与模型组灌胃蒸馏水,阳性组灌胃200 mg/kg mb还原型谷胱甘肽,TEPP低、中、高剂量组分别灌胃40、100、250 mg/kg mb的TEPP,茶多酚组灌胃50 mg/kg mb的茶多酚。用酶联免疫吸附试验试剂盒检测各组小鼠肠组织的总抗氧化能力、活性氧质量浓度、谷胱甘肽还原酶活力、血红素加氧酶活力,通过实时荧光定量聚合酶链式反应法（quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR）检测各组肠组织Toll样受体4（toll-like receptors,TLR4）、p38、核因子NF-E2相关因子（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、谷胱甘肽还原酶、血红素加氧酶的mRNA表达量。结果：与模型组相比,TEPP高剂量组的总抗氧化能力上升了约2.2 倍,谷胱甘肽还原酶、血红素加氧酶活力分别上升了2.8、1.7 倍,活性氧浓度降低了72.8%,TLR4、p38的mRNA表达量分别降低了39.1%、82.4%,Nrf2、谷胱甘肽还原酶、血红素加氧酶的mRNA表达量分别升高了83.6%、8.3 倍、96.3%,这些指标变化都与模型组存在显著差异（P＜0.05）。结论：TEPP能够通过TLR4/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK）/Nrf2通路改善D-半乳糖诱导的小鼠肠道的氧化应激反应。     

抗疲劳保健茶的制作及人群试饮效果评估

目的：研制一种用绿茶、红景天、西洋参、枸杞、薄荷制成的抗疲劳保健茶。方法：制备一种抗疲劳茶,并进行人群试饮。按随机抽样法抽取大一军训新生30人,在军训后半段给予服用抗疲劳保健茶,一天两包,共7d,采用自身前后对照研究方法。试饮期后用自制调查问卷进行人群效应评估,确定其最终配方。结果：通过人群效应评估,肢体状况改善的占36．7％、睡眠状态改善的占70％、精神疲劳状况改善的占46．7％。结论：制得的抗疲劳保健茶对于改善实验者疲乏无力、肌肉酸痛、精神疲劳作用效果良好。     

茶叶儿茶素对肠道微生态的调节作用

以中国乌龙茶为材料,通过热水浸提与柱层析分离纯化,制备得到纯度30%EGCG3’’Me、50%EGCG3’’Me、90%EGCG3’’Me和90%EGCG的茶叶儿茶素样品。采用体外厌氧粪样混合培养与荧光原位杂交技术,评价各茶叶儿茶素对于肠道微生物菌群生长的影响。结果显示:甲基化儿茶素能促进肠道有益细菌(双歧杆菌和乳酸菌)的增殖,抑制有害细菌(梭状菌和拟杆菌)的增殖,但对肠道总菌群数量的影响不大。90%EGCG3’’Me样品的益生指数(PI)最高(2.68),50%EGCG3’’Me、30%EGCG3’’Me和90%EGCG的样品PI值依次为2.25、2.14和1.86,而对照组的PI值为0.12。以上结果表明茶叶儿茶素特别是甲基化儿茶素具有一定的调节肠道微生态的能力,甲基化儿茶素的纯度越高,发挥的作用越为明显。     

抗性淀粉癸酸复合物通过肠道菌群对抑郁症小鼠的干预机制

采用抗性淀粉癸酸复合物（resistant starch-capric acid,RS-CA）实现癸酸在结肠的定点释放,研究癸酸对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）引起的小鼠抑郁症的改善作用。选取40 只雄性ICR 小鼠随机分成5 组（空白组、LPS组、LPS+RS 组、LPS+氟西汀组、LPS+RS-CA 组）。所有干预样品均以体积比2∶1 溶解在小鼠的饮水中。最后一次LPS 腹腔注射后,进行行为学实验;随后处死动物,眼球取血保留海马,用于生化指标检测;保留结肠和脑组织进行苏木精-伊红染色;收集粪便进行16S rRNA 检测。结果表明,经RS-CA 预处理的小鼠在悬尾实验和旷场实验中表现良好,同时降低了抑郁小鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平,提高了海马5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）水平,表明RS-CA 对LPS 造成的结肠腺细胞杂乱排列以及海马神经元核浓缩和嗜酸变性具有改善作用。16S rRNA 结果表明,RS-CA 预处理逆转了与抑郁症相关菌群的失衡,包括Firmicutes/Bacteroidetes 比值降低,Prevotella、Parabacteroides、Klebsiella 和Acfinobacteria 恢复至正常水平;同时改善了肠道菌群的均匀性,使肠道微生物组成与正常组一致。以上结果表明,RS-CA 可以通过调节肠道菌群降低下丘脑-垂体-肾上腺素（hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA）轴炎症反应从而实现抗抑郁作用。     

六堡茶乳酸菌多样性及其降胆固醇特性分析

探究六堡茶渥堆发酵过程中乳酸菌多样性并筛选具有降胆固醇活性菌株,旨在评价其作为潜在益生菌的体外降胆固醇能力,预防人体因饮食不均衡导致的高血脂症。采用高通量测序、纯培养法分析不同渥堆发酵时期六堡茶中乳酸菌多样性,并对其体外降胆固醇能力、胃肠耐受性进行研究。结果表明,从25 个样品中共检测到乳酸菌4 个属（乳杆菌属（Lactobacillus）、魏斯氏菌属（Weissella）、乳球菌属（Lactococcus）和肠球菌属（Enterococcus））5 个种,其中乳杆菌属为优势菌。共分离得到76 株乳酸菌,包括55 株戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus）、3 株铅黄肠球菌（Enterococcus casseliflavus）、5 株类肠膜魏斯氏菌（Weissella paramesenteroides）、8 株希腊魏斯氏菌（Weissella hellenica）、5 株台湾乳球菌（Lactococcus taiwanensis）。通过乳酸菌体外降胆固醇实验,发现胆固醇去除率为0%～30%,其中戊糖乳杆菌L131的去除胆固醇率最高,为（29.56±0.37）%;在pH值分别约为3.0、8.0的人工胃液、人工胰液中,L131有最高存活率,分别为（92.70±0.71）%和（77.54±4.81）%,显著高于其他菌株（P＜0.05）。本研究探明六堡茶渥堆发酵过程中乳酸菌的多样性,且发现具有降胆固醇特性的优良乳酸菌株,为健康黑茶产品和茶源益生菌的开发提供理论基础。     

茶叶膳食纤维作为益生元对肠道菌群的影响

茶叶膳食纤维是茶加工业的副产物,其中富含对人体有益的膳食纤维,但是目前对茶叶膳食纤维的综合利用程度不高。该研究通过考察茶叶膳食纤维的持水力、持油力、膨胀力等指标评价其理化性质,并借助扫描电镜、红外光谱、X射线衍射等对其官能团结构和微观结构进行表征。体外发酵过程中,茶叶膳食纤维可显著增加乳酸菌、双歧杆菌数量,而抑制肠杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌的数量。随着茶膳食纤维浓度的增加,发酵液的pH值显著降低。利用气相色谱质谱联用技术测定发酵液内短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)的种类和数量的变化,随着茶膳食纤维浓度的增加,SCFAs各酸含量不断增加,乙酸、丙酸、丁酸和乳酸含量最高分别为(20.65±0.93)、(2.88±0.14)、(10.89±1.01)mmol/L和(19.91±1.38)mmol/L。结合肠道菌群和SCFAs结果,最优膳食纤维比例为2%茶膳食纤维可对肠道菌群有益生调节作用。     

合生元制剂对抗生素诱导肠道紊乱的改善作用

为探究早期使用合生元制剂对头孢曲松诱导的幼年期小鼠肠道菌群失调的改善效果,将45只4周龄雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、抗生素组、实验组（n=15/组）。实验组小鼠灌胃头孢曲松及合生元制剂菌悬液,抗生素组灌胃等量头孢曲松,对照组灌胃等量生理盐水。干预1周,后3周停止干预,实验共4周。研究发现,头孢曲松可显著破坏幼年期小鼠的肠道菌群结构和短链脂肪酸代谢功能,未发现其对受试小鼠生长发育和免疫功能有显著影响;合生元制剂可恢复短链脂肪酸代谢水平并起到免疫调节的作用,而对抗生素诱导的菌群紊乱无显著改善作用。     

六堡茶渥堆过程中可培养微生物的分离与鉴定

采用传统微生物分离和分子鉴定技术对六堡茶渥堆过程的样品中微生物多样性进行研究。从不同渥堆阶段的样品中分离出细菌13个属、27个种,放线菌7个属、8个种,真菌11个属、23个种,其中黑曲霉、塔宾曲霉、Blastobotrys adeninivorans和芽孢杆菌属在整个渥堆过程中都检出。本研究所有分离鉴定得到的细菌22种、放线菌7种和真菌9种均为六堡茶中首次发现与报道。本研究有利于了解六堡茶渥堆工艺的微生物作用,并对六堡茶的纯种发酵和微生物安全性分析提供理论依据。     

‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠肠道屏障和肠道菌群的影响

为探讨‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠的肥胖调控作用及其与肠道屏障和菌群的关系,将SD雄性大鼠分为正常饮食组、高脂饮食组以及平阳黄汤低、中、高剂量组（75、150、300 mg/kg mb）,建立预防肥胖模型。通过分析大鼠体质量变化、摄食量、脂肪指数、血清指标、肝脏指标和肝脏、结肠组织切片评估‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠的肥胖调控作用;通过分析肠道的病理形态、杯状细胞数量和紧密连接蛋白的表达评估肠道屏障作用;通过分析微生物多样性和菌群结构评估对肠道菌群的影响。结果：高剂量‘平阳黄汤’能极显著降低高脂饮食大鼠的体质量增长量、附睾和肾周脂肪质量（P＜0.01）,降低血清血脂、脂肪因子和氧化应激水平（P＜0.01）,降低肝脏甘油三酯和总胆固醇水平（P＜0.01）,有效调节肝脏的脂质堆积和炎症损伤。同时,高剂量平阳黄汤还显著改善了高脂饮食大鼠结肠的形态,减少绒毛脱落和炎症浸润现象,显著恢复肠道杯状细胞数量,提高闭锁小带蛋白和闭锁蛋白的表达（P＜0.01）,有效降低了血清中脂多糖、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平（P＜0.01）,有效预防代谢性内毒素和全身慢性炎症,提高了大鼠肠道菌群的丰度和多样性,促进了与肥胖发生相关有益菌的增殖,抑制有害菌的生长。结论：‘平阳黄汤’能通过维护肠道屏障和调节肠道菌群紊乱,有效调控高脂饮食引起的肥胖。     

六堡茶发酵前后多酚氧化酶的分离及酶学性质

为探索六堡茶发酵过程中多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)的来源及其酶学活性,采用不同pH值缓冲液、保护剂和液料比对发酵前后六堡茶PPO进行提取,通过(NH4)2SO4沉淀、透析和Sephadex?G-100凝胶过滤层析纯化PPO.结果表明:从六堡茶中分离纯化得到2个PPO同工酶,分子质量分别为5...