二十二碳六烯酸虾青素酯的合成及质谱分析

以二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)与虾青素作为反应底物合成DHA虾青素酯,探索出最佳反应条件为:虾青素250 mg、DHA 282 mg、无水丙酮5 m L、4-二甲氨基吡啶(DMAP)100 mg、1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亚胺(EDCI)100 mg,充氮、避光、磁力搅拌,25℃反应3 h。液相色谱-质谱联用鉴定结果表明:产物中存在游离虾青素、DHA虾青素单酯、DHA虾青素双酯。经高效液相色谱法测定,采用峰面积归一法进行积分计算出各组分含量,结果表明,最佳反应条件下,产物中DHA虾青素酯峰面积可达95.67%,其中主要为DHA虾青素双酯(77.46%)、部分DHA虾青素单酯(18.21%)和少量游离虾青素(3.24%)。用硅胶层析柱进行梯度洗脱,增加溶剂极性(石油醚-丙酮体积比100∶0~92∶8)依次洗脱出DHA虾青素双酯、DHA虾青素单酯,纯度分别为(98.2±0.5)%和(94.0±0.6)%。     

虾青素酯对饲喂高脂高果糖饲料诱导的小鼠慢性炎症的影响

研究了虾青素酯对高脂高果糖饲料（high-fat high-fructose diet,HFFD）饲喂的小鼠慢性炎症的影响。采用高脂高果糖饲养的方法建立慢性炎症小鼠模型,雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组（低脂低糖饲料）、模型对照组（HFFD）、阳性对照组（HFFD+虾青素,6.32mg/kg bw·d）、虾青素酯高剂量组（HFFD+虾青素酯,60.45mg/kg bw·d）、虾青素酯低剂量组（HFFD+虾青素酯,20.15mg/kg bw·d）。连续灌胃60d后,称重小鼠白色脂肪重,检测空腹血糖、葡萄糖耐受量、血清胰岛素水平、血清促炎症因子[游离脂肪酸（FFA）、一氧化氮（NO）、活性氧簇（ROS）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）、C-反应蛋白（CRP）]及血清炎症抑制因子[脂联素（ADPN）、白介素10（IL-10）]的含量。实验结果表明:虾青素酯能有效的降低慢性炎症小鼠的脂肪积累、空腹血糖及血清胰岛素含量（p<0.05,p<0.01）,改善糖耐量及胰岛素抵抗（p<0.01）;显著降低血清中促炎症因子FFA、NO、ROS、TNF-α、IL-6、IL-1β、CRP的含量（p<0.01）,显著提高炎症抑制因子ADPN、IL-10水平（p<0.01）。虾青素酯可显著改善小鼠的慢性炎症反应,作用机制可能与其调节炎症相关因子水平有关。      

虾青素酯对饲喂高脂高果糖饲料诱导的小鼠慢性炎症的影响

研究了虾青素酯对高脂高果糖饲料(high-fat high-fructose diet,HFFD)饲喂的小鼠慢性炎症的影响。采用高脂高果糖饲养的方法建立慢性炎症小鼠模型,雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(低脂低糖饲料)、模型对照组(HFFD)、阳性对照组(HFFD+虾青素,6.32mg/kg bw·d)、虾青素酯高剂量组(HFFD+虾青素酯,60.45mg/kg bw·d)、虾青素酯低剂量组(HFFD+虾青素酯,20.15mg/kg bw·d)。连续灌胃60d后,称重小鼠白色脂肪重,检测空腹血糖、葡萄糖耐受量、血清胰岛素水平、血清促炎症因子[游离脂肪酸(FFA)、一氧化氮(NO)、活性氧簇(ROS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、C-反应蛋白(CRP)]及血清炎症抑制因子[脂联素(ADPN)、白介素10(IL-10)]的含量。实验结果表明:虾青素酯能有效的降低慢性炎症小鼠的脂肪积累、空腹血糖及血清胰岛素含量(p0.05,p0.01),改善糖耐量及胰岛素抵抗(p0.01);显著降低血清中促炎症因子FFA、NO、ROS、TNF-α、IL-6、IL-1β、CRP的含量(p0.01),显著提高炎症抑制因子ADPN、IL-10水平(p0.01)。虾青素酯可显著改善小鼠的慢性炎症反应,作用机制可能与其调节炎症相关因子水平有关。     

虾青素戊二酸酯的酶法合成

为提高虾青素（astaxanthin,AST）的水溶性,该研究采用酯酶Est3-14 催化虾青素和戊二酸酐（glutaric anhydride,GA）酯化合成虾青素戊二酸酯（astaxanthin glutarates,AG）,包括虾青素戊二酸单酯（astaxanthin glutarate monoester,AGM）和虾青素戊二酸二酯（astaxanthin glutarate diester,AGD）,以改善虾青素的水溶性。采用薄层层析色谱、高效液相色谱和质谱对目标产物进行表征,确认虾青素戊二酸酯可经酶催化合成。采用高效液相色谱验证AG 的水溶性,结果表明AG 的水溶性较游离形式虾青素有明显提升。采用单因素试验对催化条件进行优化,确定AG 合成的最优条件为以三氯甲烷为反应溶剂、反应温度50 ℃、AST 与GA 摩尔比1∶4 000、加酶量100 U。在最优条件下反应48 h,虾青素的酯化率达到75.8%,其中,AGM、AGD 的产率分别为29.9%、45.9%。     

竹节参总提物对LPS诱导BV2小胶质细胞炎症反应的保护作用

本文研究了竹节参总提物对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激所致的BV2小胶质细胞炎症反应的保护作用及其机制。MTT筛选不同浓度竹节参总提取对小胶质细胞增殖影响;一氧化氮试剂盒检测NO表达水平;PCR检测IL-1β、TNF-α和iNOS的mRNA表达;免疫荧光检测NF-κB表达及定位。竹节参总提物在3.125~50 mg/L对正常状态及LPS 1 μg/mL诱导的炎症状态下小胶质细胞生长均无明显影响;与正常组比较,模型组NO释放量是其11.82倍,TNF-α、IL-1β和iNOS的mRNA表达量分别是正常组的1.35、1.78和2.50倍,并且NF-κB核移位明显;与模型组比较,竹节参总提物在3.125~50 mg/L均能不同程度抑制NO释放量,并减少IL-1β、TNF-α和iNOS的mRNA表达水平;25、50 mg/L竹节参总提物有效抑制了小胶质细胞中NF-κB的核移位。竹节参总提物可减轻LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,其主要机制为抑制NF-κB的核移位,进而降低了炎症因子的分泌。     

南极磷虾壳中虾青素酯的皂化工艺研究

研究了南极磷虾壳中虾青素酯的皂化条件,以游离虾青素含量为指标,分析了粗提液浓度、皂化温度和碱浓度对皂化效果的影响。结果表明,粗提液浓度在0.1g/mL时,完成皂化所需的时间和碱浓度较为合适;皂化温度和碱浓度越高,完成皂化所需的时间越短,而损失也越大。最适皂化条件为,粗提液浓度0.1g/mL、皂化温度5℃、碱浓度0.020mol/L,皂化时间12h时,此条件下游离虾青素含量为55.75μg/mL。      

南极磷虾壳中虾青素酯的皂化工艺研究

研究了南极磷虾壳中虾青素酯的皂化条件,以游离虾青素含量为指标,分析了粗提液浓度、皂化温度和碱浓度对皂化效果的影响。结果表明,粗提液浓度在0.1g/mL时,完成皂化所需的时间和碱浓度较为合适;皂化温度和碱浓度越高,完成皂化所需的时间越短,而损失也越大。最适皂化条件为,粗提液浓度0.1g/mL、皂化温度5℃、碱浓度0.020mol/L,皂化时间12h时,此条件下游离虾青素含量为55.75μg/mL。     

虾青素保护活性氧所致线粒体损伤的作用

目的研究虾青素保护活性氧(ROS)所致线粒体氧化损伤的作用。方法观察虾青素对过氧化氢系统氧化损伤线粒体中丙二醛(MDA)、一氧化氮、谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)与ATP酶(ATPase)活性的影响,探讨虾青素保护线粒体氧化损伤的作用。结果过氧化氢损伤后,线粒体中MDA和NO含量升高,GSH含量降低,SOD和ATPase活性降低。虾青素(1.0×10-7,1.0×10-6,1.0×10-5 mol/L)能显著降低H2O2引起的线粒体MDA和NO含量升高,抑制GSH减少,提高SOD和ATPase活性。结论虾青素在一定浓度范围内对活性氧所致的线粒体氧化损伤有保护作用。     

虾青素保护活性氧所致线粒体损伤的作用

目的 研究虾青素保护活性氧(ROS)所致线粒体氧化损伤的作用.方法 观察虾青素对过氧化氢系统氧化损伤线粒体中内二醛(MDA)、一氧化氮、谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)与ATP酶(ATPase)活性的影响,探讨虾青素保护线粒体氧化损伤的作用.结果 过氧化氢损伤后,线粒体中MDA和NO含量升高,GSH含量降低,SOD和ATPase活性降低.虾青素(1.0×10-7,1.0×10-6,1.0×10-5mol/L)能显著降低H2O2引起的线粒体MDA和NO含量升高,抑制GSH减少,提高SOD和ATPase活性.结论 虾青素在一定浓度范围内对活性氧所致的线粒体氧化损伤有保护作用.     

天然虾青素对辐射损伤小鼠辅助保护作用

目的:探讨天然虾青素对小鼠辐射损伤的保护作用。方法:将144只小鼠随机分为3个实验组,剂量分别为100、200、600mg/kg·bw,另设一个辐射对照组,每天灌胃1次,连续20d后,各组均以60Co射线进行一次全身照射,并继续给样品。辐照前、辐照后第3d和14d进行外周血细胞计数;辐照后第3d进行骨髓有核细胞计数和骨髓细胞微核实验;辐照后第14d测定血清溶血素。结果:与辐照模型对照组比较,600mg/kg·bw剂量组能增加外周血白细胞计数,增加小鼠血清溶血素含量,200mg/kg·bw和600mg/kg·bw剂量组能增加小鼠骨髓有核细胞数,降低骨髓细胞微核率。结论:天然虾青素对辐射损伤具有一定的保护作用。     

多穗柯三叶苷对脂多糖诱导小鼠炎症反应的保护作用

探讨多穗柯三叶苷对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠炎症反应的抗炎症作用。以3、30、300 mg/（kg·d）3 个剂量组的多穗柯三叶苷灌胃小鼠3 d后,腹腔注射0.1 mg/kg LPS,观察三叶苷预处理对LPS诱导的炎症因子表达的影响。酶联免疫反应测定小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的含量,实时定量聚合酶链式反应法检测肝组织中TNF-α和IL-6的mRNA水平,免疫组织化学染色检测小鼠肝组织中TNF-α和IL-6蛋白水平。结果表明,3 mg/（kg·d）三叶苷剂量组可显著抑制LPS诱导的小鼠血清中TNF-α和IL-6的分泌,降低肝组织中TNF-α和IL-6的表达水平。多穗柯三叶苷对小鼠的炎症反应具有一定的保护作用。     

虾青素酯对高脂高糖饮食致小鼠胰岛素抵抗的影响

目的:研究虾青素酯对小鼠高脂高糖饮食(HFD)导致胰岛素抵抗的影响。方法:采用高脂高糖饲养的方法建立胰岛素抵抗小鼠模型,雄性C57小鼠随机分为6组:正常组(低脂低糖饲料)、模型组(HFD)、溶剂对照组、藻油来源虾青酯组、丁酸虾青素双酯组和硬脂酸虾青素双酯组。灌胃剂量为50 mg/(kg·bw),连续灌胃60 d后,检测空腹血糖、葡萄糖耐受量、血清胰岛素水平、血清内毒素(LPS)水平,生物可接受率以及粪便短链脂肪酸含量,小肠组织切片观察小肠形态。结果:丁酸虾青素双酯能显著降低胰岛素抵抗小鼠的血清胰岛素和LPS的含量(P<0.05),改善糖耐量及胰岛素抵抗(P<0.01);改善小肠形态,显著增加小肠绒毛长度和绒毛长度与隐窝深度比值(P<0.05);明显提高粪便中短链脂肪酸的含量。结论:丁酸虾青素双酯可显著改善高脂高糖饮食导致的小鼠胰岛素抵抗反应,效果优于天然藻油来源虾青素和硬脂酸虾青素双酯,作用机制可能与其改善肠屏障保护功能和调节肠道菌群产物LPS和短链脂肪酸有关。     

虾青素对活性氧所致细胞膜损伤的保护作用研究

目的研究虾青素保护活性氧(ROS)所致细胞膜损伤的作用。方法用ROS建立细胞膜损伤模型,测定细胞膜谷胱甘肽(GSH)含量;细胞膜ATP酶活性;亚硝酸盐法测定细胞膜一氧化氮(NO)含量;细胞内ROS含量变化。结果虾青素可有效地提高损伤细胞膜的GSH含量、恢复ATP酶活性并降低NO和ROS含量。结论虾青素有保护ROS所致细胞膜损伤的作用,其机制与抗氧化作用有关。     

虾青素补充对人体急性高强度运动前后代谢的影响

目的：采用核磁共振代谢组学技术从代谢物及代谢网络调控角度研究天然抗氧化物虾青素对机体机能产生影响的作用途径与机理。方法：选取16 名成年男性,随机分为对照组和实验组,实验组以中等剂量（12 mg/d）服用虾青素28 d,对照组服用安慰剂（淀粉胶囊）28 d。实验第1天清晨两组受试者空腹首次指尖采血测定抗氧化指数与血乳酸质量浓度。实验第29天清晨两组受试者空腹再次指尖采血测定抗氧化指数与血乳酸质量浓度,同时肘静脉采血5 mL,随后进行30 s×3 组间歇3 min蹬骑功率自行车运动,负荷为0.075 kg/kg mb,运动后即刻进行第三次采血。通过氧自由基生化分析仪测定血乳酸质量浓度与抗氧化指数,采用核磁共振谱仪对肘静脉血样进行核磁共振检测,得到指纹图谱,通过MestReNova、SIMCA-P、SPSS等软件对从图谱中提取的数据进行处理与分析。结果表明,安静状态下,实验组与对照组潜在差异代谢物共有15 种,影响较大的代谢通路共有3 条。其中代谢差异物肌酸、甜菜碱及甘氨酸涉及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢通路,乙酰乙酸及β-羟基丁酸涉及酮体合成与分解代谢通路,丙氨酸、谷氨酸及谷氨酰胺涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢通路。实验组抗氧化指数明显升高并显著高于对照组（P＜0.05）,血乳酸质量浓度明显降低并显著低于对照组（P＜0.05）。运动后即刻状态下,两组间潜在差异代谢物有3 种,影响较大的代谢通路共有一条,为代谢差异物谷氨酰胺涉及的丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢通路。运动后两组抗氧化指数较运动前均显著下降（P＜0.05）,且实验组显著高于对照组（P＜0.05）;运动后血乳酸质量浓度较运动前均极显著上升（P＜0.01）,实验组显著低于对照组（P＜0.05）。结论：虾青素补充使人体经急性高强度运动前后血液代谢物含量明显改变,其中涉及人体氨基酸代谢、脂代谢相关通路,这些通路代谢物的变化可能是补充虾青素后机体抗氧化能力提高、运动能力提高的内在机制。     

磷脂型二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸对脂多糖所致小鼠急性肝损伤的保护作用及机制

目的：探讨磷脂型二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid-enriched phospholipids,DHA-PL）和磷脂型二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid-enriched phospholipids,EPA-PL）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）所致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法：以南海鸢乌贼（Sthenoteuthis oualaniensis）卵和冰岛刺参（Cucumaria frondosa）体壁为原料,分离提取DHA-PL和EPA-PL。将C57BL/6J雄性小鼠随机分为Control组、模型组、LPS＋DHA-PL组和LPS＋EPA-PL组,Control组和模型组小鼠每天灌胃20 mL/kg mb生理盐水,其他组以400 mg/kg mb剂量分别每天灌胃受试物,灌胃体积为10 mL/kg mb,连续干预28 d;第29天Control组腹腔注射无菌生理盐水,其他组注射LPS（10 mg/kg mb）,注射体积为10 mL/kg mb,建立急性肝损伤模型;称量小鼠体质量和肝质量,计算肝指数;测定血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）活力;苏木精-伊红染色观察肝组织病理改变情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试剂盒测定肝脏中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α、白细胞介素（interleukin,IL）-1β和IL-6的mRNA相对表达量和含量;采用蛋白免疫印迹法考察肝脏中丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）如细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、p38以及核因子（nuclear factor,NF）-κB p65蛋白磷酸化水平。结果：DHA-PL和EPA-PL预防性干预能有效保护LPS所致小鼠急性肝损伤,降低肝指数以及血清ALT和AST活力,下调肝脏中TNF-α、IL-1β和IL-6含量,降低MAPK和NF-κB p65蛋白磷酸化水平。结论：DHA-PL和EPA-PL预防性干预可保护LPS所致小鼠急性肝损伤,其作用机制可能依赖于其对MAPK和NF-κB信号通路的调控。     

苦荞蛋白源肽AFYRW对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响

目的：探讨苦荞蛋白源肽AFYRW在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的血管内皮细胞损伤中的作用。方法：采用LPS诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）建立血管内皮细胞炎症损伤模型;采用CCK8试剂盒检测AFYRW对细胞增殖活力的影响;Western blot检测血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhension molecule-1,VCAM-1)、细胞内黏附分子-1(intercellular adhension molecule-1,ICAM-1)、白细胞介素（interleukin,IL）-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,e NOS）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase,iNOS）水平及核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)p65的磷酸化水平;酶法...     

虾青素微球对酸奶品质与风味的影响

以虾青素微球、鲜牛乳为原料,制备虾青素微球酸奶,评价虾青素微球对酸奶的乳酸菌活菌数、质构、感官评分、贮藏期虾青素稳定性的影响,并采用顶空气相色谱-离子迁移谱对酸奶挥发性有机物进行分析.结果 表明:虾青素微球对乳酸菌活菌数有积极作用,对酸奶的质构无显著性影响(P＞0.05);当虾青素添加量为6 mg/100 g时,虾青素...     

新型表面活性剂柠檬酸单酯的溶液性能研究及其在凝胶油中的应用

凝胶油不仅在功能食品中得到广泛应用,而且在药物制剂、化妆品领域也有重要应用前景。本文通过直接酯化法合成了两种柠檬酸单酯,并对其作为凝胶因子性能进行了研究。利用表面张力仪、电导率仪以及动态光散射仪等方法对两种柠檬酸酯的溶液聚集行为和胶束形成热力学进行了分析。结果表明,25℃下,柠檬酸月桂醇单酯和柠檬酸异癸醇单酯的临界胶束浓度分别为3.30mmol/L和6.40 mmol/L。同时,研究了离子强度对胶束形成过程的影响,结果表明,无机盐不仅影响胶束聚集数,而且使得柠檬酸异癸醇单酯的胶束尺寸降低约100 nm,柠檬酸月桂醇单酯的胶束尺寸降低约200 nm。凝胶油性能研究结果表明,最低凝胶浓度为7%,溶胶-凝胶转变温度为45~53℃之间,两种柠檬酸酯均能与植物油形成凝胶。生物相容性研究结果表明,两种柠檬酸酯在浓度为200mg/L时对微生物生长没有显著影响,具有良好的生物相容性。     

鞣花酸对马兜铃酸I诱导小鼠急性肾损伤的保护作用

目的:研究鞣花酸(ellagic acid,EA)对马兜铃酸I(aristolochic acids I,AAI)诱导的急性肾损伤的保护作用.方法:40只昆明小鼠(雌雄各半)随机分为健康组、模型组(10?mg/kg?mb?AAI)、EA低剂量组(10?mg/kg mb?AAI+10?mg/kg?mb?EA)和EA高剂量...