基于高通量测序分析黄酒对D-半乳糖致衰老小鼠模型肠道微生物菌群的影响

该文用D-半乳糖颈脊皮下注射建立衰老小鼠模型,评价黄酒对衰老小鼠模型肠道菌群结构的影响。通过设立空白对照、模型组、黄酒组,6周后测定其抗氧化酶活力,同时采用Morris水迷宫对小鼠的认知能力进行测试。收集小鼠粪便,利用IonS5TMXL高通量测序平台对肠道细菌16S rDNA基因进行测序,探索黄酒摄入对衰老小鼠肠道微生物菌群的影响。结果表明,致衰老小鼠模型的抗氧化相关酶活性明显降低,丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平显著增高;黄酒干预后,各剂量组小鼠体内多种抗氧化酶活性升高,MDA含量显著下降(0.05);在行为学实验中,适量黄酒干预能够显著提高致衰老小鼠的认知能力;高通量测序发现黄酒干预显著改善了致衰老小鼠的肠道菌群结构;进一步分析菌群组成发现,黄酒显著改善了衰老小鼠模型的Firmicutes和Bacteroidetes的相对丰度,显著提升了Bacteroides、Lactobacillus、Bifidobacterium、Lachnospiracea和Butyricicoccus的相对丰度。适量黄酒摄入可一定程度上改善衰老所致的肠道菌群结构失衡现象,有助于延缓衰老...     

原花青素B2对D-半乳糖模型小鼠肠道菌群的影响

以D-半乳糖皮下注射诱导小鼠衰老模型,探究原花青素B2对衰老小鼠肠道菌群结构的影响。将C57/BL小鼠随机分为对照组、衰老组和原花青素B2组,7 周后测定其十二指肠及结肠组织中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活力、过氧化物酶活力和丙二醛含量,利用Illumina MiSeq高通量测序技术检测其肠道菌群16S rDNA基因,探索原花青素B2与衰老小鼠肠道菌群之间的关系,利用气相色谱-质谱联用仪检测小鼠粪便短链脂肪酸（shortchain fatty acids,SCFAs）含量。结果表明：D-半乳糖模型小鼠的十二指肠及结肠的抗氧化酶活力显著下降,MDA含量显著上升（P＜0.05）;在原花青素B2干预后,小鼠体内的多种抗氧化酶活力上升,MDA含量显著降低（P＜0.05）,与对照组没有显著差异（P＞0.05）;利用高通量测序技术发现3 组小鼠肠道菌群中主要发生变化的是norank-f-Bacteroidales-s24-7、Bacteroides、Blautia、unclassified-Lachnospiraeae、Ruminiclostridium、Lachnospiraeae-NK4A136、Roseburia 7 种菌属;相比于对照组,衰老组norank-f-Bacteroidales-s24-7的相对丰度显著降低,其他菌属的相对丰度显著上升（P＜0.05）;与衰老组相比,原花青素B2组norank-f-Bacteroidales-s24-7、Roseburia、Lachnospiraeae-NK4A136和Bacteroides的相对丰度显著上升,而Blautia、unclassified-Lachnospiraeae和Ruminiclostridium的相对丰度显著降低（P＜0.05）。原花青素B2可提高衰老小鼠体内SCFAs含量,改善肠道环境,进而延缓衰老进程。     

桑叶生物碱对D-半乳糖诱导小鼠肠道菌群紊乱的调节作用

目的:探究桑叶生物碱对D-半乳糖诱导小鼠肠道菌群失衡的改善作用,为桑叶生物碱的开发利用提供依据.方法:采用D-半乳糖诱导建立小鼠氧化损伤模型,然后灌胃低(50?mg/kg?mb)、中(100?mg/kg?mb)、高(200?mg/kg?mb)剂量的桑叶生物碱,45?d后测定小肠组织中活性氧(reactive oxyge...     

红花籽油对D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗衰老作用

为了研究红花籽油的抗衰老作用,采用红花籽油灌胃D-半乳糖致衰老小鼠模型,利用试剂盒测定这些小鼠脑肝组织的丙二醛(MDA)含量,单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。统计分析各组之间与衰老和抗衰老有关成分含量的差异显著性。结果表明:红花籽油组小鼠脑肝组织MDA含量和MAO活性显著(P0.05)或极显著(P0.01)低于衰老模型组;GSHPx、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性极显著高于衰老模型组。红花籽油的抗衰老机制可能是:通过清除自由基,抑制自由基诱导的脂质过氧化反应,减少脂质过氧化物产生;通过改善机体新陈代谢,促进D-半乳糖分解和代谢,改善物质能量代谢,调节与衰老有关的基因表达,抑制MAO基因表达,降低脑肝组织的MAO含量;促进GSHPx、CuZn-SOD和Mn-SOD基因表达,提高脑肝组织GSHPx、CuZn-SOD和Mn-SOD含量。红花籽油能显著降低衰老模型小鼠脑肝组织MDA含量和MAO活性,显著提高GSH-Px、SOD-1和SOD-2活性,具有显著的抗老作用。     

管花肉苁蓉提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠的影响

探究管花肉苁蓉提取物对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用,将实验动物分为空白组、模型组、V_C阳性组（1.70 mg/10 g）、管花肉苁蓉提取物低（1 mg/10 g）、中（2 mg/10 g）、高（4 mg/10 g）剂量组,持续灌胃给药30 d,测定肝、脑组织脏器指数以及各组动物肝、脑组织和血清中谷胱甘肽过氧化物歧化酶（glutathione peroxide dismutase,GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;HE染色肝、脑组织并观察结构的变化。结果表明,与模型组相比,给药组动物体质量均高于模型组。管花肉苁蓉提取物低、中、高剂量组及V_C阳性组肝、脑脏器指数升高（P<0.05）,中剂量组小鼠肝、脑脏器指数升高最为明显,分别为模型组的1.62和2.31倍。管花肉苁蓉提取物低、中、高剂量组肝、脑组织及血清中GSH-Px和SOD的活性均显著升高（P<0.05）,低剂量肝组织、中剂量脑组织、高剂量血清中GSH-Px活性升高最为明显分别为模型组的1.37、1.18、1.46倍,中剂量肝组织、高剂量脑组织、中剂量血清中SOD活性升高最为明显分别为模型组的1.11、1.14、1.74倍。管花肉苁蓉提取物中、高剂量组肝、脑组织及血清中MDA含量均极显著降低（P<0.01）,中剂量肝组织、高剂量脑组织、中剂量血清中MDA含量降低最为明显分别比模型组减少23.86%、41.68%和38.30%。HE染色发现管花肉苁蓉提取物对衰老导致小鼠肝、脑组织细胞及结构损伤具有保护作用。因此,推测管花肉苁蓉提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠有较好的保护作用。     

普洱生茶和普洱熟茶对小鼠减肥降脂作用的差异

普洱茶及其成分的减肥、降脂效果早已众所周知,然而对普洱茶不同品系的减肥、降脂效果研究较少。本实验采用两种差异比较明显的普洱茶,即普洱生茶和普洱熟茶,制备茶汤来饲喂高脂饮食的C57BL6/J小鼠,观察两种茶汤干预效果的差异。结果表明,两种茶叶不仅能够在血液中的脂肪指标、脏器组织变化、以及肠道菌群方面表现出有效的抗肥胖作用,而且两种茶叶之间的干预功效也有较大差异。用普洱生茶饲喂小鼠2周后可以降低其血液中TC和TG水平,而用普洱熟茶饲喂小鼠8周后才出现该效果。普洱生茶能够降低血液中LDL-C的水平,而普洱熟茶能够提高HDL-C的水平。在肝脏脂质代谢中,普洱生茶与普洱熟茶都能有效减少小鼠肝脏中脂肪液滴的生成。饲喂小鼠8周后,普洱生茶显著上调了其肠道菌群中的阿克曼氏菌属、norank＿f＿＿Muribaculaceae、拟杆菌属的丰度,显著下调了罗伯布茨菌属的丰度;普洱熟茶能够显著上调了肠道菌群中的乳酸杆菌属、norank＿f＿＿Muribaculaceae的丰度,显著下调了罗伯布茨菌属、Erysipelatoclostridium的丰度。     

准噶尔山楂残渣多糖对D-半乳糖衰老模型小鼠的影响

研究准噶尔山楂残渣中的多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的影响。采用水提醇沉法从准噶尔山楂残渣中提取多糖,对D-半乳糖致衰老小鼠灌胃不同剂量（200、400、800 mg/kg）的多糖,测定小鼠肝、脑组织及血清中谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力、总抗氧化能力（total antioxidative capability,T-AOC）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,并观察肝、脑组织病理形态学变化。结果表明：与模型组相比,多糖高剂量组小鼠肝组织和血清中GSH-Px活力显著升高（P＜0.05,P＜0.01）;脑组织和血清中T-AOC显著升高（P＜0.01,P＜0.05）;肝、脑组织和血清中MDA含量显著降低（P＜0.05,P＜0.01）。多糖中、高剂量组小鼠肝索结构完整,肝细胞内无明显脂肪空泡;海马区神经元结构较为清晰,细胞排列整齐。因此准噶尔山楂多糖对D-半乳糖引起的小鼠衰老有一定抑制作用,这为新疆特有植物准噶尔山楂的高效利用提供了依据。     

黑豆多肽对D-半乳糖衰老小鼠抗氧化能力的影响

采用蛋白酶复合水解黑豆分离蛋白制备黑大豆多肽(BSP),将50 只昆明小鼠随机分为5 组(对照组、模型组、VC 阳性组和低、高剂量组),除对照组外,其余4 组分别腹腔注射400mg/kg bw·d D- 半乳糖建立氧化衰老模型;多肽组分别灌胃BSP(400、800mg/kg bw·d),实验周期56d。实验结束后,处死小鼠,取脾、肾、肝脏及胸腺称质量,计算脏器指数;测定血清及肝脏中丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及肝脏脂褐质(LPF)含量。结果表明,BSP 能使小鼠胸腺指数和脾脏指数升高,血清和肝脏MDA 含量明显下降,GSH-Px 活力显著提高;并且使肝组织中LPF 含量明显下降。提示BSP 能显著提高亚急性衰老小鼠的抗氧化能力,尤以高剂量组效果最好,具有一定延缓衰老的作用。     

玉米麸皮3种处理产物对D-半乳糖诱导衰老小鼠肠道菌群的影响

玉米麸皮是玉米淀粉加工的副产物,富含膳食纤维。选用D-半乳糖建立衰老小鼠模型探究精制玉米麸皮(Refined corn bran, RCB)、RCB酸解产物(Hydrolysate of acid, HOA)、HOA过XAD-2大孔树脂的洗脱物(XAD-2 macroporous resin elute, XE)对小鼠肠道菌群的丰富度、多样性等多方面的影响。结果表明,与衰老模型组相比,3种处理产物均能增加菌群多样性、增加乳酸菌目及乳酸菌科的丰度;XE组能提高菌群丰富度。RCB组与HOA组能降低厚壁菌门的数量、增加拟杆菌门的数量,且能降低厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)值。RCB与XE能提高小鼠肠道菌群的抗老化、细胞活性、排泄能力等功能,且XE的效果更佳。研究结果可为玉米麸皮处理产物改善衰老人群肠道菌群及其他疾病提供一定的理论依据。     

沙棘多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

评价PBP(polysaccharide from Hippophae rhamnoides,PBP)对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的抗氧化作用。小鼠分为空白组、衰老模型组、阳性组(V_E 170 mg/kg)、PBP低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组,连续灌胃30 d,测定其脏器指数、肝、脑组织及血清的SOD、GSH-Px活性及MDA含量;HE染色观察各组动物肝脏及脑组织细胞及结构变化。结果表明,与模型组相比,PBP高剂量及V_E组小鼠体质量增长幅度最大,PBP高、中及V_E组的脑、心脏及脾脏指数与模型组相比均显著提高(P<0.05,P<0.01);PBP高、中剂量组中肝、脑及血清中的GSH-Px均极显著高于模型组(P<0.01),PBP高剂量中肝、脑及血清中的SOD均极显著高于模型组(P<0.01),PBP高剂量及V_E组中肝、脑及血清中的MDA均极显著低于模型组(P<0.01)。组织切片HE染色发现PBP对衰老导致小鼠肝、脑组织细胞及结构损伤具有保护作用。PBP对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的保护作用可能与其具有抗氧化作用有关。     

不同等级普洱熟茶的代谢物差异分析

为探究不同等级晒青茶对其制备的普洱熟茶品质的主要化学成分影响,通过分筛机械把机采机制晒青茶原料分为三个等级,加工得到A、B和C三个不同等级普洱熟茶,应用茶叶感官审评和代谢组学技术对其进行检测。结果表明：B等级的感官审评最优;PCA分析中A明显区别于其余试样;共筛选出的238个差异代谢物中有12个标志性代谢物,除了D-麦芽糖的相对定量是与等级呈负相关,其余都是与等级呈正相关;四类重点物质中氨基酸及其衍生物的相对总量为A（0.053 mg/g）>B（0.007 mg/g）>C（0.006 mg/g）,生物碱为A（0.072 mg/g）>B（0.042 mg/g）>C（0.028 mg/g）,黄酮及类黄酮为A（0.516 mg/g）>C（0.221 mg/g）>B（0.245 mg/g）,儿茶素及其衍生物为A（1.808 mg/g）>B（0.668 mg/g）>C（0.482 mg/g）,都是随等级的降低而减少;苯丙氨酸代谢是所有差异代谢物里相关性较强的通路。这些差异代谢物的变化规律可为机采机制晒青茶在后续普洱熟茶加工中的品质提升提供理论依据和科学指导。     

普洱茶对小鼠血糖的干预作用

将昆明种雄性小鼠随机分为5 组, 每组8 只, 分别为阴性对照组、阳性对照组和普洱茶低（0.45 g/（kg·d））、中（0.90 g/（kg·d））、高（1.35 g/（kg·d））剂量组。每天灌胃给药,测体质量,连续处理30 d后,禁食24 h,取血测血糖、胰岛素、α-葡萄糖苷酶活力,以研究普洱茶对小鼠血糖的干预作用。结果显示：普洱茶能显著降低小鼠的体质量、脂肪系数、血糖、胰岛素和α-葡萄糖苷酶活力。与阳性对照组比较,普洱茶低、中、高剂量处理组小鼠的血糖分别降低为16.86%、29.64%、49.58%;胰岛素依次降低为17.17%、32.32%、47.47%;α-葡萄糖苷酶活力分别降低了8.86%、17.86%、32.43%。因此,普洱茶具有减肥降脂作用,同时降低血清中的胰岛素、α-葡萄糖苷酶活力水平,有效改善胰岛素抵抗作用,可作为预防治疗糖尿病和高糖症的潜在保健饮品。     

菌方普洱熟茶水提物和茶褐素的组成及其降脂作用

研究菌方普洱熟茶水提物和茶褐素的组成及对大鼠肥胖的调节作用。基于居里点热裂解气相色谱-质谱联用技术及高效液相色谱技术,分析菌方普洱熟茶水提物和茶褐素的组成成分。设置正常对照组、高脂模型组、菌方普洱熟茶水提物组和菌方茶褐素组,连续灌胃16周,分析SD大鼠生长指标、血清生化指标、氧化应激及炎症相关指标,并对肝脏组织HE和油红O染色切片进行观察。结果表明：菌方普洱熟茶水提物与茶褐素粗品中茶褐素、蛋白质和多糖占较大比重;没食子酸、表儿茶素和表没食子儿茶素没食子酸酯等儿茶素及衍生物类化合物含量存在明显差异（P<0.05）,菌方普洱熟茶水提物中生物碱类咖啡因和可可碱含量显著高于茶褐素粗品（P<0.05）;在不同居里点热裂解温度下,菌方普洱熟茶水提物与茶褐素的裂解产物分别有7种（380℃）和12种共同成分（600℃）,两者在不同温度下的裂解产物中,酚类种类最多,含量最高的化合物是咖啡因。与高脂模型组相比,菌方普洱熟茶水提物组和茶褐素组体质量、Lee’s指数显著减轻（P<0.05）,血清甘油三酯、血清空腹血糖、肝脏甘油三酯和胆固醇水平显著降低（P<0.05）,脂肪累积减少,血清...     

‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠肠道屏障和肠道菌群的影响

为探讨‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠的肥胖调控作用及其与肠道屏障和菌群的关系,将SD雄性大鼠分为正常饮食组、高脂饮食组以及平阳黄汤低、中、高剂量组（75、150、300 mg/kg mb）,建立预防肥胖模型。通过分析大鼠体质量变化、摄食量、脂肪指数、血清指标、肝脏指标和肝脏、结肠组织切片评估‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠的肥胖调控作用;通过分析肠道的病理形态、杯状细胞数量和紧密连接蛋白的表达评估肠道屏障作用;通过分析微生物多样性和菌群结构评估对肠道菌群的影响。结果：高剂量‘平阳黄汤’能极显著降低高脂饮食大鼠的体质量增长量、附睾和肾周脂肪质量（P＜0.01）,降低血清血脂、脂肪因子和氧化应激水平（P＜0.01）,降低肝脏甘油三酯和总胆固醇水平（P＜0.01）,有效调节肝脏的脂质堆积和炎症损伤。同时,高剂量平阳黄汤还显著改善了高脂饮食大鼠结肠的形态,减少绒毛脱落和炎症浸润现象,显著恢复肠道杯状细胞数量,提高闭锁小带蛋白和闭锁蛋白的表达（P＜0.01）,有效降低了血清中脂多糖、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平（P＜0.01）,有效预防代谢性内毒素和全身慢性炎症,提高了大鼠肠道菌群的丰度和多样性,促进了与肥胖发生相关有益菌的增殖,抑制有害菌的生长。结论：‘平阳黄汤’能通过维护肠道屏障和调节肠道菌群紊乱,有效调控高脂饮食引起的肥胖。     

不同氨基酸对普洱熟茶呈味物质和香气成分的影响

氨基酸是普洱茶发酵过程中重要的中间物质,对普洱茶内含物质的转化和品质都有着重要的影响。本文探讨了在发酵时添加不同氨基酸对普洱熟茶产品的主要呈味物质和挥发性香气成分的影响。结果表明,添加外源氨基酸组的水浸出物含量在34.82～39.46%之间,茶褐素含量在6.31～7.17%之间,游离氨基酸的含量在6.31～7.17%之间,这三项指标均高于对照组;茶多酚含量在7.76～8.73%之间,水溶性糖在3.07～3.89%之间,均低于对照组,咖啡碱含量与对照组相差不大。挥发性香气成分分析表明,醇类占香气成分的21.17～25.47%、醛类占15.64～18.71%、杂氧化合物类占13.75～17.92%、酯类占7.17～10.25%,这几类物质是主要的香气成分;实验组香气成分中的酯类和杂氧化合物类含量大于对照组,而它们又是陈年普洱茶的主要的特征香气成分。实验表明外源氨基酸对普洱茶汤中的呈味物质以及香气成分的形成有显著影响,能加快普洱茶特殊品质的形成。     

基于HS-SPME-GC-MS的不同品种普洱熟茶香气成分的比较分析

为解析云南优良茶树品种的普洱熟茶的香气品质和成分特点,该研究选择云抗10号、清水3号、紫娟和勐海大叶种的一芽二三叶经晒青、渥堆发酵制成的普洱熟茶,进行了感官审评,并基于HS-SPME-GC-MS检测,利用方差分析、热图分析、正交偏最小二乘判别分析等方法分析不同品种间的成分异同。云抗10号主要呈现陈香,清水3号为陈香甜香,紫娟为甜香花香,勐海大叶种为陈香花果香木香。共鉴定出82个挥发性成分,从云抗10号、清水3号、紫娟和勐海大叶种中分别鉴定出68、56、54和54个挥发性成分。紫娟香气成分中酮类化合物占比最高,其他三个品种都是甲氧基苯类占比最高。不同品种间的香气成分及相对含量存在明显差异,基于OPLS-DA模型筛选出13个标志差异性香气成分,其中甲氧基苯类是陈香的重要标志性成分,β-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮环氧化物是紫娟花香甜香的重要贡献者。综上,4个品种普洱熟茶的香气品质各具特色,筛选出的13个香气成分在各品种的含量差异可能是其品质差异形成的重要原因。     

一款10年陈熟普洱茶中可培养微生物的分离鉴定

在贮存过程中微生物的种类和数量对普洱茶的品质有很大影响。本实验用4种不同的选择性培养基对一款10年陈熟普洱茶中的微生物进行选择性培养和计数;不同的微生物菌落被分离,并用显微镜进行形态观察和初步鉴定,根据细菌的16S rRNA进行分类。结果表明：该款普洱茶的细菌总数为4.3×103CFU/g;霉菌数约为20CFU/g,未发现该普洱茶中存在酵母和放线菌;根据菌落形态分离到的7株细菌都是革兰氏阳性菌,分别属于5个种,即枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 2株、解淀粉芽孢杆菌(B. amyloliquefaciens) 1株、地衣芽孢杆菌(B. Licheniformis) 2株、嗜热芽孢杆菌(B. sporothermodurans) 1株和 B. shackletonii 1株;用显微镜进行的形态观察鉴定只分离到两种霉菌,即黑曲霉(Aspergillus niger)和产黄青霉(Penicillium chrysogenum)。     

活性肽-N对D-半乳糖致衰老小鼠的作用效果

为了探讨一种新型抗衰老活性因子——活性肽-N食用后的抗衰老作用,本研究通过给小鼠连续皮下 注射D-半乳糖（200 mg/（kg·d）,以体质量计,下同）建立衰老模型,造模的同时开始灌胃2.5、25.0、 125.0 μg/（kg·d）活性肽-N复乳,连续9 周。分别采用旷场实验和Morris水迷宫实验检测小鼠的运动探究能力和学 习记忆能力。上述行为学实验后,对小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力、丙 二醛（malondialdehyde,MDA）含量及脑组织中的乙酰胆碱酯酶（acetyl cholinesterase,AChE）活力进行测定。结 果表明,与衰老模型组相比,活性肽-N复乳高剂量组能显著提高衰老小鼠的运动探究能力,改善其学习记忆能力, 提高血清中的GSH-Px活力28.38%（P＜0.05）,降低MDA含量26.19%（P＜0.05）,同时降低脑组织中的AChE活 力23.26%（P＜0.05）。综合结果表明该活性肽-N对D-半乳糖致衰老小鼠具有明显的抗衰老作用。