无载体固定化少根根霉产脂肪酶发酵培养基的优化

通过单因子和正交实验,对无载体固定化少根根霉N-103产脂肪酶的发酵培养基进行研究,获得摇瓶发酵的最优培养基条件为:花生油5mL/L、麸皮多糖水解液75mL/L、棉籽蛋白15g/L、(NH4)2SO42g/L、MgSO41g/L、K2HPO42.5g/L.在此条件下进行摇瓶验证实验,少根根霉脂肪酶酶活可达100U/mL,为基础培养基配方对照组的1.33倍.     

1株产耐热脂肪酶根霉突变株的选育

采用紫外线、硫酸二乙酯、紫外线和硫酸二乙酯复合对实验室保藏的1株高产耐热脂肪酶的根霉SFE-L01菌株进行诱变处理,筛选获得1株突变株UD-23,产耐热脂肪酶活力比出发菌株提高了112.39%,达24 000.00 U/mL。对突变株UD-23的产酶条件及部分酶学性质进行了研究,结果表明,突变株UD-23所产脂肪酶最适作用温度为60℃,且具有良好的热稳定性。条件优化后,该突变株产酶酶活达30 000.00 U/mL,比优化前提高了25%。     

根霉ZZ-3脂肪酶发酵条件的优化及酶学性质研究

对根霉ZZ-3脂肪酶产酶条件的优化及脂肪酶酶学性质进行了研究。结果表明,250 mL三角瓶液体培养,培养基装液量100 mL,根霉ZZ-3产脂肪酶的最佳培养基为：黄豆粉3 g/100mL,（NH4）2S040.3 g/100mL,MgS04 0.2 g/100mL,K2HPO4 0.2 g/100mL,花生油0.3 g/100mL,pH自然。在温度28℃、转速150 r/min,摇床培养时间2 d,发酵酶活力达到124.60 U/mL。对该酶的酶学性质进行了初步研究,该酶最适pH7.5,最适反应温度37℃,在pH7～9、温度低于40℃条件下酶活稳定。     

里氏木霉高产纤维素酶菌株的选育及产酶培养基的优化

通过对里氏木霉DWC原生质体紫外线诱变,筛选产纤维素酶活力高的突变株并对该菌株的产酶培养基进行优化.研究原生质体最佳诱变时间以筛选高产纤维素酶的突变株.同时分别对产酶培养基中不同种类碳源和氮源、Vogel's母液、表面活性剂对cMc酶活(CMCA)、FP酶活(FPA)的影响进行了研究.结果表明:原生质体经过90 s诱变,得到产纤维素酶活力高的突变株DWC5,其CMCA、FPA分别达到410.2 ms/mL·0.5 h和23.2 mg/mL·h分别为原菌株的1.5倍和1.2倍.DWC5突变株的CMCA、FPA达到最高水平的培养基条件是:氮源NH4>C10.2%、碳源微晶纤维素1%、Vogel's母液4.0%、吐温80 0.1%～0.15%、微量元素母液0.01%.     

氮源对红曲霉突变株产黄色素的影响

本文对诱变得到的红曲霉突变株MYM2产黄色素进行培养基氮源的优化,研究了几种常见的无机氮源和有机氮源对MYM2产黄色素的影响.结果表明,有机氮源玉米浆和无机氮源氯化铵有利于MYM2产黄色素,最佳质量分数均为1 %左右,该条件下产黄色素色价分别达到84.12 U/mL和72.17 U/mL.使用这两种氮源混合来培养MYM2,最终黄色素产量达到96.51 U/mL,其胞外色调和胞内色调都达到3以上.     

广式腊肠中高产脂肪酶葡萄球菌的选育

从广式腊肠中的28株葡萄球菌中,经初筛和复筛,获得产脂肪酶活力较高的菌种M1和M14.以M1和M14为起始菌株,经过微波和紫外单独诱变、微波复合紫外和紫外叠加诱变,选育一株产脂肪酶活力高、酶活的遗传性稳定的菌株M14-W-UV-Ⅰ,酶活为5.26 U/mL,是初始菌株M14的8倍.产酶培养基的初步优化结果表明,M14-W-UV-Ⅰ产酶最适的碳源和氮源分别是1%可溶性淀粉和1%蛋白胨,最适的诱导剂是1%橄榄油,优化后获得的最高酶活为17.54 U/mL.     

一株毛霉菌产脂肪酶特性及发酵条件研究

文中观察了一株产脂肪酶毛霉(Mucor sp.)菌株在橄榄油罗丹明B鉴定平板上的菌落形态,对其产脂肪酶进行了酶学特性研究,并探讨了该菌株产脂肪酶的发酵条件,优化了产酶发酵培养基和产酶发酵条件,得出了该菌产酶的最佳发酵条件为以1%全脂大豆粉为氮源,1%玉米浆为碳源,添加0.5%橄榄油和0.1% Tween-80,控制起始pH值为6.0.     

Bacillus subtilis CICC20034产脂肪酶的培养条件研究

目的 优化Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养组分和发酵条件,为后续深入研究提供数据资料.方法 优化不同碳源、氮源、金属离子和培养基复配发酵培养组分;优化培养温度、pH、培养时间进一步提升菌株产酶能力.结果 最佳利用碳源为甘油,无机氮源比有机氮源更有利于脂肪酶生产,优化培养组分为:10g/L甘油,10 g/LNH4Cl,8g/LNa2HPO4· 12H2O,2 g/L K2HPO4,0.5 g/L MnSO4.最适培养pH 6.0,温度30℃,发酵周期28 h.结论 通过前期优化筛选,获得脂肪酶活性达24.16 U/mL,为后续深入优化和代谢调控提供了良好的数据资料.     

一株绿色木霉产纤维素酶摇瓶发酵条件优化研究

本文研究了利用纤维素刚果红分离培养基从废纸液里筛选出一株纤维素酶高产菌株,经鉴定为绿色木霉。同时对绿色木霉摇瓶发酵产酶进行了条件优化,实验结果表明其最佳发酵条件为:碳源纤维素粉:麸皮为12g∶8g;氮源(NH4)2SO4:玉米浆:豆饼粉为2g∶2g∶1g;起始pH2.5;接种量8%;转速200r/min;乳糖诱导添加量0.2%;发酵时间4d。在最佳产酶条件下CMCA酶活达到735.06U/mL,比未优化条件下酶活234.21U/mL提高了213.8%。     

褶皱假丝酵母产脂肪酶条件及酶学性质研究

对一株来源于海洋有产脂肪酶能力的褶皱假丝酵母产酶条件进行研究,探讨了碳源、氮源、pH、培养温度对该菌产脂肪酶的影响。结果显示:在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:蔗糖5 g/L,橄榄油5 g/L,MgSO4·7H2O1 g/L,K2HPO41 g/L,(NH4)2SO410 g/L,起始pH为7.0,接种量10%,在30℃、200 r/min下培养36 h,产酶能力达到4 351.6 U/mL。该菌所产脂肪酶的最适反应pH为7.0,最适反应温度为37℃,Ca2+、Mg2+对酶活有一定的促进作用。     

脂肪酶水解壳聚糖作用研究

通过还原端基含量测定、粘度测定研究了脂肪酶非专一性对壳聚糖的降解作用,探索了酶反应过程中温度、pH、加酶量、底物浓度、反应时间、金属离子等因素对脂肪酶降解壳聚糖的影响,以及不同脱乙酰度和不同分子量的壳聚糖与脂肪酶降解反应的关系。结果表明,以壳聚糖为底物的脂肪酶的一些催化特性为最适温度50～55℃,最适pH5～5.5,反应时间在3～4h范围内;降解作用随着酶用量和底物浓度的增加而增加,水解反应不符合Michaelis-Menten方程;3mmol/L的Cu2 ,10mmol/L的Mg2、Ca2 对脂肪酶有一定的激活作用,10mmol/L的Ba2 、Zn2 、Fe3 对该酶有一定的抑制作用,随着底物壳聚糖脱乙酰度的提高,降解速度降低。     

脂肪酶位置选择性的影响因素

为开发高效、绿色、低成本的脂肪酶应用于结构脂质的制备，从内源性(脂肪酶的来源、基因序列、空间位阻)和外源性(底物空间结构、反应介质、固定化条件及反应pH)两方面讨论了脂肪酶位置选择性的影响因素。脂肪酶催化特异性由内源性因素和外源性因素共同决定。改变底物空间结构、反应介质、固定化条件和反应pH,常被用作提高脂肪酶催化性能的处理方式。只有充分考虑内外两方面因素的影响，才能充分提高脂肪酶的位置选择性和催化效率。该综述有望为高选择性脂肪酶的开发开辟新的研究方向，为后续结构脂质的高效合成提供启发性的研究思路。     

水相体系酶法制备甘油磷脂酰乙醇胺的研究

研究了水相体系中脂肪酶Thermo 4S-3水解大豆粉末磷脂制备甘油磷脂酰乙醇胺(L-α-GPE)的可行性,探讨了反应条件对磷脂酰乙醇胺(PE)转化率和L-α-GPE得率的影响.确定脂肪酶Thermo4S-3催化制备L-α-GPE的最佳反应条件为:pH 7,底物质量浓度5 mg/mL,反应温度40℃,酶添加量30 U/mL,CaCl2添加量3.33 mg/mL,反应时间6h.在最佳反应条件下,PE转化率为95.5％,L-α-GPE得率为93.6％.     

固定化脂肪酶研究进展

固定化脂肪酶由于其易与底物分离且可重复使用而备受关注。综述了常用的固定化方法,包括物理吸附法、共价交联法和包埋法,不同的固定化方法对酶的性质有不同的影响。     

脂肪酶固定化新材料

脂肪酶因其在油脂工业中的重要作用而成为酶研究领域的重点。脂肪酶的不稳定性和高昂的价格是限制其广泛应用的主要原因。对脂肪酶进行固定化是增强其稳定性、降低应用成本的关键。改进脂肪酶固定化工艺的一个重要方面就是选择和开发适合相应脂肪酶的固定化材料。从脂肪酶的固定化材料方面,对无机、有机、复合载体等固定化材料进行了综述,特别是对各种新型的固定化材料予以了归纳,对脂肪酶固定化材料的选择有一定的指导意义。     

Milk lipase and off-flavour development

The origins of milk lipases and free fatty acids are discussed, together with properties of the principal enzyme responsible for lipolysis in raw milk. Variations in milk free fairy acid levels are shown to result from the net effect of several factors which influence overall enzyme activity and the nature of the fat globule surface. Possible forms of damaged fat are described with evidence suggesting that gross damage such as clumping or coalescence does not necessari 1.v give rise to high free fatty acid values. The risks of lipolysis both with types of milking installation and during the handling. storage and processing of milk are assessed. Levels of free fatty acids likely lo produce detectable rancid flavour are given with typical values for milk and cream in the UK     

莽草酸对脂肪酶抑制作用的研究

研究莽草酸对脂肪酶的抑制作用。结合酶动力学方法和荧光光谱法,研究了莽草酸对脂肪酶的抑制动力学和抑制机理。研究结果表明,当脂肪酶浓度为1.00 mg/mL时,反应时间为15 min,莽草酸对脂肪酶的半抑制浓度(IC_(50))为3.16mg/mL,最适温度由37℃增大到41℃,抑制类型为混合型脂肪酶抑制剂,抑制常数为Ki=4.30mg/m L,Ki’=3.28mg/mL。在发射波长为300～450nm,激发波长为240～300nm范围内,扫描得出的荧光光谱图可以看出,莽草酸对脂肪酶有荧光淬灭效应,能使酶的内源生色基团(Tyr、Trp、Phe)由蛋白质内部的疏水区向亲水环境暴露,从而改变酶的结构,抑制其催化效果。研究莽草酸对脂肪酶的抑制特性,为开发减肥药物和保健食品提供了思路和依据,具有潜在的应用价值。     

脂肪酶对大米凝胶特性的影响研究

米饭、米粉和年糕都是以大米为原料制作的深受消费者喜爱的凝胶食品.凝胶食品的品质与凝胶的硬度、粘弹性等特性有密切的关系.在贮存过程中,凝胶食品的老化及品质摔制一直是有待解决的重要课题.酶可以改变凝胶体系中的网络结构特性,从而起到改变凝胶特性,延缓凝胶老化的作用.本文以大米为材料制作凝胶,研究了脂肪酶不同的添加量、酶作用温度和酶作用时间对大米凝胶特性的影响,为米粉的生产和品质控制提供依据.结果表明,脂肪酶添加到大米凝胶中可以在一定程度上起到延缓凝胶老化的作用.而且,不同的加酶量、酶作用温度和酶作用时间都对大米凝胶特性有很大的影响.脂肪酶抗老化的最佳工艺参数为:加酶量0.1%、酶作用温度40℃、酶作用时间1h.     

固定化脂肪酶催化酯交换合成生物柴油研究

以苯乙烯为单体,二乙烯苯为交联剂,过氧化苯甲酞为引发剂,明胶为分散剂,采用悬浮聚合法制备St-DVB-CBA三元共聚高分子微球,将其作为固定化脂肪酶载体,通过共价结合法进行脂肪酶固定化,探讨固定化脂肪酶催化大豆油酯交换反应活性。实验结果表明:固定化脂肪酶在醇油摩尔比为3∶1,分三次加入;固定化酶加入量15wt.%(油重);反应时间24 h;反应温度40℃;正己烷加入量15wt.%(油重);水分含量4wt.%(油重);转化率最高,可达90.08%;固定化脂肪酶重复使用时显示出较好稳定性和催化活性。     

Enzymatic preparation of chitooligosaccharides by commercial lipase

The effect of a commercial lipase on chitosan degradation was investigated. When four chitosans with various degrees of deacetylation were used as substrates, the lipase showed higher optimal pH toward chitosan with higher DD (degree of deacetylation). The optimal temperature of the lipase was 55 °C for all chitosans. The enzyme exhibited higher activity to chitosans which were 82.8% and 73.2% deacetylated. Kinetics experiments show that chitosans with DD of 82.8% and 73.2% which resulted in lower K_m values had stronger affinity for the lipase. The chitosan hydrolysis carried out at 37 °C produced larger quantity of COS (chitooligosaccharides) than that at 55 °C when the reaction time was longer than 6 h, and COS yield of 24 h hydrolysis at 37 °C was 93.8%. Products analysis results demonstrate that the enzyme produced glucosamine and chitooligosaccharides with DP (degree of polymerization) of 2–6 and above, and it acted on chitosan in both exo- and endo-hydrolytic manner.