ATP生物发光法快速测定生乳中微生物总数的研究

对ATP生物发光法应用于生乳中微生物检测进行了初步摸索,确定了加体细胞裂解液次数为三次;乳样最佳稀释倍数为20倍;用ATP生物发光法对大批乳样进行检测,同时用国标法进行了平皿菌落培养,结果显示,乳中微生物总数对数与光值对数呈正的直线相关（r=0.9485）,相关程度为显著相关（P<0.001）,二者回归方程为y=1.0496x+2.4。      

生物发光快速测定生乳菌落总数的方法

为消除利用ATP生物发光法测定生乳菌落总数时非细菌ATP对测定结果的干扰,建立了一种样品前处理方法。利用ATP生物发光法对经过前处理的生乳样品进行检测,结果表明,生乳菌落总数对数值与生乳细菌ATP发光对数值呈现较好的线性关系(R2=0.982),相关程度为显著相关(P<0.01),说明该前处理方法能够有效排除非细菌ATP的干扰,有利于提高ATP生物发光法定量测定生乳菌落总数准确性。     

ATP生物发光法快速测定物体表面的菌落总数

以大肠埃希氏菌作为指示菌考量了ATP生物发光法测定物体表面卫生状况的准确性,并在实验室内模拟食品企业卫生管控,采用ATP生物发光法对具有代表性的台面进行细菌总数测定,与国家标准微生物检测方法进行了比对分析。结果显示:大肠埃希氏菌的ATP荧光值与菌落总数的线性相关性良好,相关系数R2为0.982 6;以实验室内指定台面作为盲样进行对比测定,其ATP荧光值与菌落总数的线性相关性良好,相关系数R2达到0.915 9,说明ATP生物发光法能够准确评估和测定物体表面的卫生状况。     

生乳细菌总数检测仪测定生乳细菌总数的应用

以还原法为理论基础,研制生乳细菌总数检测仪进行生乳细菌总数快速检测,以克服经典还原法目测比色主观性强的缺点,而且检测结果可以定量表示。该仪器连续检测加入试剂后的生乳样品颜色(RGB),通过数理统计分析,采用斜率法以R值斜率表示样品颜色的变化速度。研究以标准平板计数法(SPC法)为标准,建立了R值斜率与菌落总数之间的标准方程,经验证生乳细菌总数检测仪检测结果与SPC法检测结果差异不显著。与流式细胞仪比较,在与SPC法的相关性、运行成本及便携性等方面具有一定优势。     

生乳细菌总数检测仪测定生乳细菌总数的应用

以还原法为理论基础,研制生乳细菌总数检测仪进行生乳细菌总数快速检测,以克服经典还原法目测比色主观性强的缺点,而且检测结果可以定量表示。该仪器连续检测加入试剂后的生乳样品颜色(RGB),通过数理统计分析,采用斜率法以R值斜率表示样品颜色的变化速度。研究以标准平板计数法(SPC法)为标准,建立了R值斜率与菌落总数之间的标准方程,经验证生乳细菌总数检测仪检测结果与SPC法检测结果差异不显著。与流式细胞仪比较,在与SPC法的相关性、运行成本及便携性等方面具有一定优势。      

ATP生物发光法检测布拉氏酵母菌总数的研究

利用ATP生物发光法建立了布拉氏酵母菌与相对发光值的定量线性模型,对比研究了十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和苯扎溴铵(BAB)两种提取剂在不同的浓度、提取时间下对酵母菌相对发光值的影响。结果表明,浓度为0.015%CTAB作用时间4min的提取效果最好。同时,对检出的RLU值的对数值与菌落总数的对数值作统计学线性相关分析发现,R~2=0.9919,具有统计学意义。ATP生物发光法对布拉氏酵母菌的最低检测限是10~3cfu/mL。      

采用ATP生物发光法分析6株常见细菌ATP含量差异

以ATP生物发光法为基础,辅以国标平板计数法,分析和测定了大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、乳酸链球菌、乳酸片球菌等6株常见细菌中ATP含量的差异。结果显示:当单位体积菌悬液的ATP荧光值相同时,6株细菌菌落总数无明显差异;当菌悬液的菌落总数相同时,6株细菌的单位体积菌悬液ATP含量无明显差异。研究结果同时说明ATP生物发光法能够定量测定常见区域中的细菌总数。     

ATP生物发光法检测布拉氏酵母菌总数的研究

利用ATP生物发光法建立了布拉氏酵母菌与相对发光值的定量线性模型,对比研究了十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和苯扎溴铵(BAB)两种提取剂在不同的浓度、提取时间下对酵母菌相对发光值的影响.结果表明,浓度为0.015％ CTAB作用时间4min的提取效果最好.同时,对检出的RLU值的对数值与菌落总数的对数值作统计学线性相关分析发现,R2 =0.9919,具有统计学意义.ATP生物发光法对布拉氏酵母菌的最低检测限是103cfu/mL.     

ATP生物发光法评价餐饮具的微生物污染研究

目的对ATP生物发光法与平板计数法在评价餐饮具微生物污染的检出限及检出率进行评价,并对2种方法的相关性进行研究。方法应用3家国内公司生产的ATP生物发光检测仪,分别对不同浓度的ATP标准溶液检测并绘制标准曲线;以不同浓度的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌液及人工接种大肠杆菌的餐饮具作为被检品,分别应用ATP生物发光法和平板计数法进行检测,绘制ATP生物发光法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌检测的标准曲线,并对2种检测方法在人工污染餐饮具检测的相关性绘制曲线。结果 3家公司的ATP生物发光检测仪对ATP标准溶液、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的检出限差异较大;但在某一检测范围内,3家公司ATP生物发光检测仪的检测RLU值与ATP标准溶液、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌量均有良好的线性相关性。3家公司ATP生物发光检测仪对人工接种大肠杆菌餐饮具的检测显示,ATP生物发光法与平板计数法有良好的线性相关性。结论3家公司的ATP生物发光法对ATP、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的检出限存在不同检测仪的仪器误差,且差异较大,目前,ATP生物发光法不能替代传统的平板计数法来评价餐饮具的微生物污染状况。     

ATP生物发光法在饮料微生物检验中的应用分析

ATP生物发光法是一种快速的微生物检测方法,具有准确、简便、可实时检测等优点。ATP生物发光法与涂抹法结合能够实现饮料行业在原辅料、机械设备表面、人员及其装备、包装材料、生产环境等关键控制点的卫生状况现场监测与跟踪测定,测定结果与国标法相吻合,该方法能够帮助饮料企业提高日常的卫生管理工作水平,指导对工厂设施、设备、环境等实施清扫、洗涤和杀菌作业,及时发现卫生不良事故并提出解决方案。与滤膜法结合,可增加取样量,快速测定含菌量低的液体样品,又能消除样品中抑菌物质的干扰,能够对CIP系统清洗效果进行评估和指导。     

ATP生物发光技术快速检测牛乳体细胞数

探索利用ATP生物发光技术快速检测牛乳体细胞数的可行性.利用ATP生物发光技术测定牛乳体细胞ATP浓度,根据体细胞中ATP的浓度与体细胞数成正比的原理,推算出牛乳中的体细胞数,并与显微镜计数法对比,分析两种方法之间的相关性.结果表明:ATP生物发光技术的检测结果与显微镜计数法有很好的相关性,是一种快速、简便的检测牛乳体细胞的方法.     

Rapid detection of antibiotics in raw milk by ATP bioluminescence

The increasing availability of relatively low cost, portable and sensitive A T P bioluminometers has prompted exploration for other applications of A T P bioluminescence in the dairy industry. A protocol for detecting antibiotic residues in raw milk by A T P bioluminescence is described which is less complex than similar procedures described previously. The traditional assay based on acid production is slower and less sensitive but still has a significant cost advantage.     

微生物抑制法快速检测鲜牛乳中红霉素残留

目的利用微生物抑制法快速检测鲜牛乳中红霉素残留。方法将待测的牛奶样品和空白样品经杀菌后接入乳酸菌,经过相同时间发酵后,计算待测牛奶样品发酵前后的pH变化差值与空白样品发酵前后的pH变化差值,从而判断鲜牛奶中红霉素残留的含量。结果经过单因素及正交实验,确定乳酸菌发酵产酸条件如下:接种量0.15 U/L、发酵温度40℃、菌粉溶解时间25 min、发酵时间3.5 h,利用乳酸菌发酵产酸建立了检测鲜牛奶中红霉素残留的标准曲线Y=0.024X-0.013(其中,Y为△pH,X为鲜牛乳样品中的红霉素浓度),线性相关系数R~2=0.9949,检测的灵敏度IC_(50)为29.71μg/L,检测的线性范围为0~50μg/L,加标回收率为103.54%~124.58%,同一批次内检测的变异系数为4.39%~16.46%。结论建立的检测方法可用于筛选鲜牛乳中是否有抗生素残留并进行定量检测。     

Rapid assessment of the bacteriological quality of raw milk using ATP bioluminescence

Research was conducted to assess the practical use of an ATP bioluminescence assay to evaluate the bacteriological quality of raw milk. Filtration was used to precondition samples before ATP determination, which was measured in relative light units (RLUs). The Lumac ATP bioluminescence assay results were compared with standard plate counts (SPCs) of samples to estimate the microbial load for 246 raw milk samples that were split and either tested immediately or subjected to two preliminary incubation temperatures, 12.8 and 15.6 degrees C, for 18 h. Linear regression analysis procedures were used to analyze the data. Preincubation treatments were analyzed separately. For all treatments, linear regression coefficients were significantly different from zero (P < 0.01). The R2 values calculated using log10-transformed SPC and log10-transformed RLUs for samples tested immediately and samples preliminarily incubated at 12.8 and 15.6 degrees C were 0.58, 0.78, and 0.80, respectively. The R2 for all samples combined was 0.78. Differences in regressions among treatments were tested using a multiple slope and intercept model. Treatment intercepts and slopes were significantly different (P < 0.01). A linear regression equation was used to predict SPC from ATP values. Comparison of predicted values with actual SPCs indicated that ATP could be useful in predicting SPC in raw milk.     

Comparison of a rapid ATP bioluminescence assay and standard plate count methods for assessing microbial contamination of consumers' refrigerators

The feasibility of using an ATP bioluminescence assay for assessing microbial contamination of home refrigerators was evaluated and compared with the standard culture methods. Samples of refrigerator surfaces were collected from 123 households by swabbing an area of 100 cm2 on three locations in the refrigerator with premoisturized sterile swabs. Microbial contaminations were determined by aerobic plate count (APC; incubated at 35 degrees C for 48 h) and psychrotrophic plate count (PPC; incubated at 7 degrees C for 10 days) on plate count agar. The results were compared to the readings from the microbial ATP (mATP) bioluminescence assay. The correlation coefficient (r) between mATP and PPC (r = 0.851) was slightly higher than that between mATP and APC (r = 0.823). Our results indicated a potential discrepancy in the population of mesophilic and psychrotrophic bacteria in the refrigerator samples. Nevertheless, mATP appeared to be a reliable indication of the average of APC and PPC (r = 0.895). The mATP bioluminescence assay would provide a rapid and convenient test for researchers in field studies to assess microbial contamination in refrigerators.     

原料乳中微生物的多样性

牛乳营养丰富,适合各种微生物的生长繁殖。该文介绍了原料乳中微生物的种类,综述了国内外近年来关于原料乳中微生物多样性的研究进展。并对非培养微生物学在研究原料乳中微生物多样性的应用进行了总结,高度评价了非培养方式的快速、敏感以及可定义纯培养方式无法发现的微生物的特点。     

酯酶试验法检测牛乳体细胞的研究

以酯酶试验法原理为基础,研究了乳体细胞的检测方法.结果表明,酯酶试验法检测结果与显微镜直接计数结果相关性高.该法操作简便,可实现乳体细胞的在线检测,在监测乳房炎、划分原料乳等级等方面具有较大的应用价值.