乳糖酶在海藻酸钙上的固定化研究

以海藻酸钙为载体、戊二醛为交联剂,对乳糖酶进行固定化。研究了戊二醛浓度、给酶量及温度对酶固定化的影响,并对固定化酶酶促反应的最适pH、温度等进行了测定。结果表明,0.3%戊二醛,4%的海藻酸钠,在4℃条件下对30%的乳糖酶的固定化率较高。酶促反应特性测定结果表明,固定化后乳糖酶的稳定性增强,最适温度范围较非固定化乳糖酶大,最适pH不变。     

共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶的研究

研究了明胶-戊二醛法在共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶中的应用,并与开孔明胶法、卡拉胶包埋法进行了比较.进一步研究pH、明胶质量浓度、前交联中戊二醛的体积分数和二次交联的时间对明胶-戊二醛法共固定乳糖酶和葡萄糖异构酶的影响.结果表明,共固定化的最佳条件为:pH8.6,明胶浓度27%(w/w),前交联戊二醛体积分数0.15%和二次交联时间10min.在此条件下共固定化,乳糖酶的活力回收率为30.85%,葡萄糖异构酶的活力回收率为83.48%.共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶用于制备乳果糖,间歇操作6批次后酶活力仍然保持在初始活力的75%以上.     

固定化乳糖酶的研究

用明胶作为固定化乳糖酶的载体，研究比较载体的用量、交联剂的浓度，用酶量、制备的pH值。结果表明，选择150g／L质量浓度的明胶为载体，体积分数为0．5％的戊二醛为交联剂，用酶量为0．5g／L，在pH值为7．2．混和搅拌时间为3min的条件下制备固定化果胶酶．其酶活力回收率可达78．12％，重复回收使用7次后，酶活力还可以保留75％以上，是乳糖酶固定化的一种较好的方法。     

改性磁性壳聚糖微球固定化乳糖酶

通过反相悬浮聚合法,以甲基丙烯酸2-羟乙酯(HE-MA)与甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,过硫酸铵为引发剂制备得到改性磁性壳聚糖微球。进一步以改性磁性壳聚糖微球为载体,通过吸附、共价结合以及戊二醛交联反应三方协同作用固定乳糖酶。对影响固定化的各种因素进行优化,确定固定化乳糖酶最适条件为:载体在0.1 mol/L、pH 7.0的磷酸缓冲液中充分溶胀后,按2.0 U/mg载体的添加量加入乳糖酶,4℃吸附3 h,再添加0.1%戊二醛交联4 h;最终所得的固定化乳糖酶活为685 U/g载体,酶活回收率为34.3%。固定化后的乳糖酶的pH稳定性和热稳定性都较游离酶有明显提高;连续操作10次后,固定化酶活仍保持在70%以上,具有良好的操作稳定性。     

固定化Neutrase中性蛋白酶的研究

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂固定化Neutrase中性蛋白酶。通过单因素实验，分析了壳聚糖浓度、戊二醛浓度、交联时间对微球制备的影响及戊二醛加入量对酶固定的影响。由正交实验确定制备固定化酶的最佳工艺参数为：壳聚糖浓度为3％、戊二醛与葡胺糖残基摩尔比为1：2、制备微球交联时间为1h，微球与酶振荡吸附12h，再加入2．5％戊二醛交联，使戊二醛最终浓度达到0．9％，制备得固定化中性蛋白酶活力为112．69U／g。固定化蛋白酶的热稳定性和对酸碱的稳定性均较游离中性蛋白酶有所提高。     

脱乙酰壳聚糖固定碱性蛋白酶的研究

以脱乙酰壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂制备固定化碱性蛋白酶。研究了戊二醛的浓度、给酶量、固定化温度、时间、pH对固定碱性蛋白酶的影响。结果表明：碱性蛋白酶最佳固定化条件是戊二醛浓度为0．2％：给酶量11000U／g；pH为10；在温度为50℃交联时间12h。     

小麦酯酶固定化条件的研究

考察了小麦酯酶固定化条件的影响因素，并对固定化酶的性质进行了研究。结果表明，其固定化最佳条件为：固定化时间12h、海澡酸钠浓度为3％、戊二醛浓度6％、氯化钙浓度为0．5mol／L。     

聚糖凝胶固定β-D-半乳糖苷酶方法研究

以壳聚糖凝胶为载体,戊二醛为交联剂固定β-D-半乳糖苷酶,对壳聚糖凝胶的制备条件及乳糖酶的固定化条件进行了研究,确定了乳糖酶固定的最佳条件为:2.5%壳聚糖与2%戊二醛、1.0mg/mL的溶液酶,(pH值为7.0)固定9h,酶活力回收率为61.05%     

聚糖凝胶固定β-D-半乳糖苷酶方法研究

以壳聚糖凝胶为载体,戊二醛为交联剂固定β-D-半乳糖苷酶,对壳聚糖凝胶的制备条件及乳糖酶的固定化条件进行了研究,确定了乳糖酶固定的最佳条件为:2.5%壳聚糖与2%戊二醛、1.0mg/mL的溶液酶,(pH值为7.0)固定9h,酶活力回收率为61.05%     

海藻酸钠包埋法固定L-阿拉伯糖异构酶的研究

以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂,对L-阿拉伯糖异构酶进行固定化。研究海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、戊二醛浓度以及硬化时间等因素对固定化效果的影响。结果表明最佳固定化条件为:海藻酸钠浓度3.5%,氯化钙浓度3.0%,戊二醛浓度0.2%,硬化时间7 h,该条件下制备的固定化酶与游离酶相比,最适宜反应温度和pH值基本没有变化,并且具有较好的操作稳定性和贮存稳定性。