厚皮甜瓜果实对链格孢侵染抵抗能力的差异

以伽师瓜和86-1甜瓜为实验材料,研究贮藏期间甜瓜对病原菌抵抗能力的差异。用打孔器在果实赤道部位等距离打孔6个,每孔接种20 μL链格孢,于7 ℃冷库贮藏,研究果皮与果肉病斑直径、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羟化酶和4-香豆酸-辅酶A连接酶活性的变化。结果表明:贮藏期间,86-1甜瓜果实病斑直径大于伽师瓜,且果肉病斑直径大于果皮;甜瓜接种链格孢后,果实病程相关蛋白及苯丙烷代谢酶活性均高于对照,在贮藏期间整体呈现先升高后下降的变化趋势。研究表明,伽师瓜果实抗病相关酶活性高于86-1甜瓜,果皮酶活性高于果肉,伽师瓜的抗病能力强于86-1甜瓜,果皮的抗病能力强于果肉。     

链格孢侵染对甜瓜病程相关蛋白活性及基因表达的影响

以抗病能力强的伽师瓜和抗病能力较弱的86-1甜瓜作为实验材料,研究甜瓜果实应答链格孢侵染过程中对几丁质酶（CHT）、β-1,3-葡聚糖酶（GLU）活力变化的影响及基因表达规律。伽师瓜和86-1甜瓜接种浓度为1×106个/m L A.alternata孢子悬浮液20μL,置于6⁸℃冷库贮藏,测定病斑大小,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力及基因相对表达量。结果表明:损伤接种A.alternata后,伽师瓜和86-1甜瓜均在15 d发病,贮藏过程中伽师瓜果实的发病率及病斑大小均低于86-1甜瓜;甜瓜应答侵染过程中,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力呈现先升高后下降的趋势,分别于21 d,18 d达到酶活高峰,且接种伽师瓜酶活力显著高于86-1甜瓜（p<0.05）,伽师瓜通过增强病程相关酶活力来抵御链格孢的侵染;伽师瓜CHT1、CHT2、GLU基因表达量显著高于86-1甜瓜,分别在贮藏18、18、15 d表达量最大;贮藏0²1 d病程相关蛋白活力及基因相对表达量与病斑直径呈正相关,说明病程相关蛋白在植物抵御病原微生物侵染早期与中期中起到了关键作用,并且在侵染中期作用显著。      

链格孢菌侵染采后甜瓜果实组织几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因表达分析

以伽师瓜（抗病性强）和86-1甜瓜（抗病性一般）果实为实验材料,研究链格孢菌（Alternaria alternata）侵染后几丁质酶（chitinase,CHT）和β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-glucanase,GLU）基因表达规律。甜瓜果实接种A. alternata,7?℃贮藏,测定病斑大小,荧光定量聚合酶链式反应测定CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量。结果表明：伽师瓜和86-1甜瓜接种A.?alternata,在侵染9?d时出现病斑,9～24?d病斑直径不断扩大,86-1甜瓜病斑直径大于伽师瓜,侵染24?d时86-1甜瓜病斑直径是伽师瓜的1.12?倍,伽师瓜对A.?alternata侵染的抵抗能力要强于86-1甜瓜。在侵染期间,伽师瓜和86-1甜瓜CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量显著提高,呈先升高后降低的变化趋势,伽师瓜和86-1甜瓜CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量最高峰出现时间分别相差3、6、3?d,伽师瓜CmCht1、CmCht2相对表达量始终高于86-1甜瓜,CmGlu相对表达量在侵染12～24?d高于86-1甜瓜。在侵染期间CmCht1、CmCht2和CmGlu表达规律存在差异,侵染前期CmCht1、CmCht2相对表达量较高,侵染中期和后期CmGlu相对表达量较高;A.?alternata侵染前期主要诱导了CHT基因的表达,中期和后期主要诱导了GLU的基因表达,CHT和GLU的基因协同表达,起到抗病性的作用。伽师瓜抗病性强于86-1甜瓜与CHT和GLU的基因的表达密切相关。     

链格孢菌侵染采后伽师瓜抗病关键酶活性变化规律

该文将链格孢菌无损接种于采后伽师瓜大、小、无网纹处,通过研究苯丙烷代谢相关酶及细胞壁降解酶活性变化规律,比较伽师瓜不同网纹处、不同组织抗病性差异。结果表明：大网纹组发病率显著高于其他组,在侵染18 d时病害发生率为大网纹组89.00% 、小网纹组83.33% 、无网纹组78.00% 。苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase,PAL）、4-香豆酰辅酶 A 连接酶（4-coumaroyl-Coa ligase,4CL）、几丁质酶（chitinase,CHT）、β-1,3 葡聚糖酶（β-1,3-glucanase,GLU）均呈先上升后下降的趋势,接种组均高于对照组,差异显著（p＜0.05）;无网纹组外、内果皮的PAL活性峰值均高于大网纹组和小网纹组,活性为135.16、221.81 U/g,小网纹组果肉处PAL峰值高于大网纹组和无网纹组,活性为44.42 U/g;无网纹组外、内果皮及果肉的4CL活性峰值均高于小网纹组和大网纹组,活性为44.42、131.28、221.13 U/g;无网纹组外、内果皮及果肉的CHT及GLU活性峰值均高于大网纹组和小网纹组,CHT活性分别为170.30、153.60、121.48 U/g,GLU 活性分别为 29.84、19.27、15.71 U/g。 PAL、4CL、CHT、GLU 活性可以在一定程度上反映伽师瓜对于链格孢菌侵染的抵抗能力,无网纹最强,小网纹次之,大网纹最弱;外果皮最强,内果皮次之,果肉最弱。     

链格孢侵染采后甜瓜病程相关蛋白基因表达及酶活性变化规律

以伽师瓜和86-1甜瓜为试材,损伤接种链格孢菌,比较两种甜瓜果皮与果肉抗病性差异。甜瓜果实接种链格孢,（7±1）℃、相对湿度85%～90%冷库贮藏,测定病斑直径,观察病斑组织显微结构,实时聚合酶链式反应比较CmGLU、CmCHT1、CmCHT2相对表达量,测定几丁质酶（chitinase,CHT）和β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-glucanase,GLU）活性。结果表明：链格孢侵染两种甜瓜,伽师瓜病斑直径小于86-1甜瓜,果皮小于果肉,第30天时,86-1甜瓜果皮和果肉病斑直径是伽师瓜的1.28 倍和1.29 倍;观察病斑组织显微结构,发现伽师瓜和86-1甜瓜果皮通过细胞壁增厚抵御链格孢侵染,果肉组织细胞壁抵抗能力较弱,侵染末期果皮与果肉组织细胞壁分层、皱缩,细胞内布满菌丝体和分生孢子,部分果肉细胞解体,无法辨认细胞结构;伽师瓜CHT和GLU基因始终高于86-1甜瓜,果皮高于果肉,CmCHT1相对表达量在侵染初期至侵染中期较高,CmCHT2相对表达量在侵染中期较高,表明病原菌在侵染初期至侵染中期诱导了CHT基因的表达;CmGLU相对表达量在侵染中期至侵染末期较高,表明病原菌在侵染中期至侵染末期诱导了GLU基因的表达;链格孢侵入伽师瓜和86-1甜瓜后,果皮和果肉组织CHT和GLU活性随贮藏时间延长呈升高-降低的变化趋势,伽师瓜高于86-1甜瓜,果皮高于果肉。表明伽师瓜更强的抵御能力与CHT、GLU基因与酶活性密切相关。     

链格孢侵染对厚皮甜瓜抗菌物质及活性氧代谢相关酶活性的影响

以伽师瓜为材料,研究贮藏期间果皮与果肉对病原菌抵抗能力的差异。分别采用3 mm(果皮)、5 mm(果皮果肉交界)、10 mm(果肉)深度接种链格孢(Alternaria alternata)后,于7℃贮藏。定期检测果皮与果肉病斑直径、总酚和黄酮含量及多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明:贮藏期间,不同接种深度的果皮病斑直径显著小于果肉(p<0.05),果皮的抗病能力大于果肉;3、5、10 mm接种组果皮与果肉的抗菌物质含量和活性氧代谢相关酶活性显著高于对照(p<0.05),其中3 mm接种组果实具有较高的抗性;甜瓜果皮与果肉协同抵御链格孢的侵染,果皮发挥更大的抗病作用。      

链格孢侵染对伽师瓜果皮活性氧代谢的影响

本文以采后伽师瓜果实为试验材料,无损接种链格孢菌(Alternaria alternata),比较伽师瓜无网纹、小网纹、大网纹果皮组织抗病性差异,研究活性氧代谢及关键酶活性变化规律。结果表明:链格孢菌侵染30 d时,伽师瓜果皮无网纹病害发生率77.77%、小网纹84.17%、大网纹88.02%。各实验组超氧阴离子(O_2·~-)产生速率和还原型谷胱甘肽(GSH)含量呈先升高后降低的变化趋势,过氧化氢(H_2O_2)含量呈升高-降低-升高的变化趋势,丙二醛(MDA)含量外果皮呈升高-降低的变化趋势,内果皮一直升高;且侵染期间外果皮O_2·~-产生速率、GSH、H_2O_2和MDA含量高于内果皮。各实验组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(GR)均呈先升高后降低的变化趋势;SOD活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为49.19 U、39.29 U、31.81 U,内果皮峰值为32.36 U、24.28 U、19.30 U;CAT活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为485.95 U、393.68 U、220.40 U,内果皮峰值为202.67 U、228.30 U、137.93 U;POD活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为28.62 U、24.84 U、23.13 U,内果皮峰值为14.46U、9.73 U、8.58 U;GR活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为378.32 U、170.24 U、196.15 U,内果皮峰值为70.58 U、45.61 U、66.67 U;抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性呈上升趋势,外果皮活性高于内果皮,无网纹活性高于小网纹和大网纹。由此表明,伽师瓜果皮抗病性与活性氧代谢关系密切,外果皮抗病性强于内果皮,无网纹组抗病性强于小网纹组和大网纹组。     

采后果实链格孢属真菌病害防治方法研究进展

链格孢属真菌(Alternaria spp.)可引起多种果实采后发生病害,每年造成的损失异常严重,因此防治由链格孢属真菌引起的采后果实病害显得尤为迫切。文章将着重介绍国内外研究中采后果实链格孢属真菌病害的防治方法,包括采前防治,采后物理、化学和生物方法及联合防治等,并提出在未来的发展中应该使用新的、有效的组合方式来提高防治效果,增强果实抵抗链格孢属真菌的能力,延长果实采后贮藏期,提升其商品价值。     

ε-聚赖氨酸对樱桃采后病原菌橘青霉和链格孢菌的抑菌作用研究

目的 探究ε-聚赖氨酸(ε-polylysine,ε-PL)对樱桃果实采后病原菌橘青霉(Penicillium citrinum)和链格孢菌(Alternaria alternata)的抑菌作用和抑菌机制。方法 本研究测定100、200、400、800 mg/Lε-PL处理对2种病原菌菌丝生长、孢子萌发、细胞膜透性的影响;采用扫描电子显微镜(scanningelectron microscope,SEM)观察ε-PL处理对病原菌孢子的形态的影响;并在樱桃果实上接种2种病原菌,观测ε-PL处理在果体上的抑菌作用。结果 ε-PL对P.citrinum和A.alternata菌落直径扩展的抑制效果随着处理浓度的增加而提高,大于200 mg/L的ε-PL显著抑制孢子萌发;经ε-PL处理后2种病原菌的电导率、OD_{280 nm}、OD_260nm均显著升高(P<0.05),细胞膜通透性增加,蛋白质和核酸等内容物渗漏,细胞膜完整性遭到破坏;经SEM观察发现,ε-PL处理后P. citrinum和A. alternata孢子变形、凹陷,失去正常的细胞形态;...     

采后果实病程相关蛋白研究进展

采后果实病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PRs)是果实受生物或非生物胁迫诱导产生并积累的一类蛋白质总称,是果实防卫体系的重要组成部分,且可在体外表现出一定的抗菌作用。根据近年来对病程相关蛋白的研究,可将其分为17个功能家族。目前,采后果实病程相关蛋白的研究工作多以激发子为主,这些激发子通常是一些物理、化学或生物因素,可激发果实病程相关蛋白基因的表达,增强果实的抗病性。本文综述了采后果实中几种病程相关蛋白研究进展,并对采后果实病程相关蛋白未来的研究方向进行展望。     

烟草抗赤星病（Alternaria alternata）诱导因子的筛选

不同诱导因子的研究结果表明，真菌、细菌和病毒都可诱导烟草对赤星病产生抗性。抗性效应表现为发病率降低、严重度变小和病斑面积减少。真菌诱导因子中，只有弱毒株诱导产生抗性，抗性效应为７．４％～８０．１％；细菌诱导产生的抗性效应为１．３％～８５．８％；病毒及其组合的抗性诱导效应为３．９％～８３．２％。实验发现，真菌和细菌的某些菌株和某些病毒及其组合也可诱导烟草对赤星病的感病性，使病情加重。     

烟草叶围细菌的分离及其对Alternaria alternata的拮抗作用

分离到烟草叶围细菌136株,通过对峙培养实验筛选出对烟草赤星病菌A.alternata有较强拮抗活性的9个菌株.离体叶片生防测定实验表明,9株细菌均能不同程度地减轻烟草赤星病的发生.其中菌株Tpb88具有较强和稳定的拮抗作用,无菌滤液实验表明,叶围细菌Tpb88在一定浓度范围内能有效抑制A.alternata菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长,且浓度越高,抑制能力越强,结果表明Tpb88对烟草赤星病菌的拮抗机制可能为抗菌物质的产生.     

继代培养对链格孢菌生长及产毒的影响

目的 探究连续继代培养对链格孢菌(Alternaria alternata)菌株的生长以及产毒的影响。方法 将10株链格孢菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar, PDA)上连续继代培养,分析菌株的生长、产孢情况;利用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测并分析主要链格孢霉毒素[包括交链孢酚(alternariol,AOH)、交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether, AME)、交链孢烯(altenuene, ALT)、细交链格孢菌酮酸(tenuazonic acid, TeA)]的含量变化。结果 在PDA培养基中,连续继代培养链格孢菌极易出现角变、菌丝变白、菌丝生长速率加快等菌株退化现象。随着继代培养次数的增加,菌株生长速度加快,菌落直径变大,角变率增大;10株链格孢菌中有7株(MY-4、MY-12、MY-15、MY-73、MY-80、MY-103、MY-117)产孢量随着继代次...     

烟草对赤星病菌的抗性与其防御酶系活性的关系

室内对抗病性不同的烟草品种CV 87和NC 89接种赤星病菌 ,分析测定接种后不同时间、不同叶位过氧化物酶 (POD)、过氧化氢酶 (CAT)以及苯丙氨酸解氨酶 (PAL)等同工酶酶活性变化情况。结果表明 ,抗病品种CV 87随接种叶位升高POD与CAT活性增加 ,感病品种NC 89表现先升高后降低的趋势。无论接种与否NC 89的POD活性都高于CV 87;抗病品种CV 87的CAT活性高于感病品种 ;接种赤星病菌后,抗病品种CV 87的PAL活性升高 ,感病品种NC 89的PAL活性降低 ,PAL活性与品种抗病性呈正相关     

烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑的抗药性检测

为了解吉林省和黑龙江省烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑的抗性水平,采用菌丝生长速率法,测定了318株烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑的药剂敏感性,建立敏感基线。运用最低抑制浓度法确定抗性菌株及频率,并比较不同采样地点的抗性水平。结果表明,供试敏感菌株对菌核净的敏感性频率分布呈连续的单峰曲线,接近正态分布,其EC₅₀均值2.916 μg/mL可作为两省烟草赤星病菌对菌核净的敏感基线,抗性频率为21.38%;烟草赤星病菌对苯醚甲环唑的敏感基线为1.198 μg/mL,抗性频率为18.24%。吉林省和黑龙江省烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑产生了不同程度的抗性,不同地点抗性水平存在差异。本研究为烟草赤星病菌的抗药风险评估奠定了基础,为制定吉林和黑龙江两省烟草赤星病科学防治策略和科学用药提供了依据。     

烟草赤星病的生物防治研究进展

综述了植物诱导抗性、微生物拮抗作用、转基因技术在烟草赤星病的生物防治上研究现状,并对植物诱导抗性、植物源杀菌剂的研究与应用和筛选烟草赤星病菌拮抗菌等方面进行了展望。     

防治烟草赤星病药效试验

为了更有效地防治烟草赤星病 ,用 7种药剂进行了大田喷施对比试验。结果表明 :4 0 %“菌核净”可湿性粉剂 5 0 0倍液、4 0 %“菌核铜”可湿性粉剂 5 0 0倍液、4 5 %“菌克”可湿性粉剂 5 0 0倍液、“云岭酶素”30 0倍液、4 5 %“金叶舒”可湿性粉剂 60 0倍液、3%“多抗霉素”可湿性粉剂 30 0倍液、30 %“大力”可湿性粉剂 5 0 0倍液的相对防效依次为 :92 .5 6%、92 .13%、92 .13%、91.18%、90 .36%、87.5 6%、85 .0 2 %、83.91% ,差异达显著水平