ATP荧光法快检系统实现细菌总数的快速检测

在细菌总数的检测中,传统的培养法由于检测时间较长,已经不能满足食品企业实施HACCP体系时实时监控的要求。为此,沈阳中科靓马生物工程有限公司从中科院遗传与发育所引进了“含虫光素基因的新型菌株及虫光素酶的生产方法”发明专利,成功研发了具有我国自主知识产权的“ATP荧光法细菌总数快速检测系统”,系统采用了先进的ATP生物发光技术,只要测定出相对荧光值,     

ATP荧光法细菌总数快速检测系统

全面提高我国食品卫生水平是解决食品安全问题的重要方面,不仅需要法制建设、执法管理、科技保障和全民科学、道德教育等诸多方面的努力,还要赖于建立一套能对食品原料、生产设备、流通营销环节的包装材料、窗口等进行有效卫生监督和预警的技术手段。ATP荧光法细菌总数快检仪是一种利用新型微生物ATP生物发光法测定食品中     

细菌总数快速检测研究进展

细菌总数作为判定食品被细菌污染程度的标记，具有重要的卫生学意义。本文详述了近年来细菌快速检测方法的进展，并对今后的检测方向作了展望。     

电导率法快速检测食品细菌总数的研究

电导率法是最近发展起来的应用于微生物检验的一项电化学技术。本研究先建立了利用电导率法测定几种常见食品细菌总数的标准曲线,然后通过平行实验验证了电导率法快速检测食品细菌总数的重现性,再通过配对实验比较了电导率法与国标法测定结果符合率;经统计学卡方检验,结果 P〉0.05,表明两种方法无显著性差异,结果符合率为92.7%;说明电导率法作为一种快速检测方法用于食品细菌总数的检验是可行的。     

ATP生物荧光法及其应用的研究进展

综述了ATP生物荧光法的原理、测定步骤,探讨了现有的ATP荧光检测系统存在的问题及改进的思路,并介绍了其在食品工业中的应用。      

ATP生物荧光法及其应用的研究进展

综述了ATP生物荧光法的原理、测定步骤,探讨了现有的ATP荧光检测系统存在的问题及改进的思路,并介绍了其在食品工业中的应用。     

食品中细菌总数快速检测技术的研究进展

主要介绍快速测试片技术、电阻抗技术、微茵落技术、发射测量法、微热量技术、三磷酸腺苷(ATP)生物发光技术、色谱法等几种细菌总数快速检测技术的原理和特点,并对今后的检测方向作了展望.     

电阻抗法快速检测鲜牛奶中细菌总数

采用阻抗法监控鲜牛奶中的细菌总数,建立了利用阻抗法检测供港鲜牛奶中细菌总数的标准曲线及计算方程。同传统平板计数方法相比,阻抗法检测鲜牛奶中细菌总数不仅快速、准确,且操作简便。     

原料乳细菌总数快速检测方法研究进展

概述了原料乳细菌总数快速检测方法的研究现状及最新研究进展,对电导微生物技术、PCR技术、ATP生物发光技术、流式细胞技术、直接表面荧光过滤技术、酶联免疫法、生物传感器法、智能化图像识别技术进行了归纳,并对国内的研究方向进行了展望。     

应用流式细胞技术快速检测液态商品中的细菌总数

建立应用流式细胞技术(flowcytometry,FCM)快速检测液态商品牛奶、果汁中的细菌总数的方法。采用膜过滤、离心技术对果汁样品进行前处理,去除影响FCM检测的基质颗粒,使样品达到FCM可检测状态,检测限达到101CFU/mL数量级。对液态商品牛奶进行重复性和验证实验,检测结果经Q检验法和方差分析,在一定范围浓度下,FCM检测液态商品中的细菌总数与平板法成线性相关。FCM是一种比平板法检测细菌总数更加快速、准确的方法。     

基于ATP再生体系快速检测乳品中微生物

基于焦磷酸（pyrophosphoric acid,PPi）再生三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）建立乳品中微生物快速检测方法。通过单因素试验优化PPi再生ATP反应条件,并考察方法的灵敏度、准确度、精密度和稳定性。结果表明,PPi再生ATP最佳反应条件为腺苷酰硫酸（adenosine phosphosulfate,APS）浓度10 μmol/L,ATP硫酸化酶（ATP sulfurylase,ATPS）活力0.15 U/mL、反应pH7.8。在最佳的ATP再生条件下偶联生物发光法,对ATP标准品、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的检测限分别为10－17mol/mL、102CFU/mL和102CFU/mL。工作曲线在102～107CFU/mL范围内线性关系良好,对乳品基质的回收率为81.33%～97.78%,变异系数为14.24%～22.17%,与国标平板计数法对比显示两种方法检测结果相关性良好,相关系数为0.96。本方法快速、简单、灵敏、稳定,适用于乳品中微生物快速监测。     

微生物ATP提取方法及其在微波灭菌效果快速评价中的应用研究

本文对ATP发光技术中微生物ATP提取方法进行了优化研究,通过对不同提取剂提取效率的比较,发现苯扎溴铵提取效果好,并且无需稀释,能真实体现微生物细胞内的ATP水平。通过对苯扎溴铵提取时间和提取浓度的优化,结果显示采用体积分数为0.05%苯扎溴铵溶液与菌液混合3~4 min,即可将细胞内的ATP最大限度地释放出来。将该提取方法与ATP生物发光反应体系偶联,实现了对微波灭菌效果的快速评价,在短时间内即可得到可靠结果。试验比较了不同微波功率和微波时间的灭菌效果,实验结果表明,大肠杆菌ATCC25922在用2450 MHz 650w微波照射60 s时可被完全杀灭,而金黄色葡萄球菌ATCC25923则需70 s才能被杀灭。当用2450 MHz微波同样处理60 s时,650 w即可杀灭大肠杆菌ATCC25922,而金黄色葡萄球菌ATCC25923则需700 w才可被完全杀灭。     

ATP生物发光法在饮料微生物检验中的应用分析

ATP生物发光法是一种快速的微生物检测方法,具有准确、简便、可实时检测等优点。ATP生物发光法与涂抹法结合能够实现饮料行业在原辅料、机械设备表面、人员及其装备、包装材料、生产环境等关键控制点的卫生状况现场监测与跟踪测定,测定结果与国标法相吻合,该方法能够帮助饮料企业提高日常的卫生管理工作水平,指导对工厂设施、设备、环境等实施清扫、洗涤和杀菌作业,及时发现卫生不良事故并提出解决方案。与滤膜法结合,可增加取样量,快速测定含菌量低的液体样品,又能消除样品中抑菌物质的干扰,能够对CIP系统清洗效果进行评估和指导。     

生物发光快速测定生乳菌落总数的方法

为消除利用ATP生物发光法测定生乳菌落总数时非细菌ATP对测定结果的干扰,建立了一种样品前处理方法。利用ATP生物发光法对经过前处理的生乳样品进行检测,结果表明,生乳菌落总数对数值与生乳细菌ATP发光对数值呈现较好的线性关系(R2=0.982),相关程度为显著相关(P<0.01),说明该前处理方法能够有效排除非细菌ATP的干扰,有利于提高ATP生物发光法定量测定生乳菌落总数准确性。     

量热法快速测定糕点、面包中细菌总数的实验研究

以保质期短、易受微生物污染变质的糕点、面包为研究对象,采用检测微生物生长热的方法对其中的细菌总数进行快速检测,并与传统的平板计数法测试结果进行比较,结果发现,在标定的标准曲线(0～1.0×10~5cfu/mL),量热法所得结果与常规平板计数法所得结果基本相符;t-检验分析表明,两种方法没有显著差异;但前者所需时间仅为3h,是常规方法的1/16。     

胶体金免疫层析法快速检测黄曲霉毒素B1的研究

本文应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测食品中黄曲霉毒素B1的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,黄曲霉毒素B1偶联抗原和二抗鼠抗驴分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条并装入检测卡中。测试结果表明黄曲霉毒素B1快速检测试纸条的灵敏度为5ng/ml,检测时间为10min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。使用简单方便,非常适合现场快速检测黄曲霉毒素B1。     

酶联免疫吸附法快速检测黄曲霉毒素

结合间接竞争反应机制,运用酶联免疫吸附技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),从抗原(antigen,Ag)包被时间、体系反应温度、酶标二抗作用时间、显色时间等主要因素开展快速检测黄曲霉毒素改进方法的研究。研究结果表明适宜的优化条件为:采用Ag包被20 h、反应温度24℃左右、酶标二抗作用时间30 min、底物显色时间15min。通过对饲料等11种样本的检测得出:半抑制浓度IC50<0.1μg/L,添加回收率在67%~116%,灵敏度达到0.03μg/L,线性系数>0.99,板内变异小于5%。检测试验结果良好,表明该改进方法具有可行性。     

在线近红外光谱系统快速检测整块鸡胸肉菌落总数含量

以整块鸡胸肉为研究对象,利用在线近红外光谱系统采集其900~1650 nm波长范围内的光谱信息,探究光谱信息与细菌菌落总数(Total Viable Count,TVC)之间的定量关系。对采集的原始光谱信息进行高斯滤波平滑(Gaussian Filter Smoothing,GFS)等五种预处理后,建立全波段偏最小二乘(Partial Least Squares,PLS)回归模型。采用回归系数法(Regression Coefficient,RC)和连续投影算法(Successive Projections Algorithm,SPA)筛选最优波长,构建优化的PLS模型和多元线性回归(Multiple Linear Regression,MLR)模型。结果表明,基于全波段GFS光谱构建的GFS-PLS模型预测鸡胸肉TVC效果最佳(r_P=0.964,RMSE_P=0.806 lg CFU/g)。基于SPA法从GFS光谱中筛选出的25个最优波长(907.0、913.7、923.8、927.2、937.2、947.3、974.0、987.3、997.3、1007.3、1040.4、1080.1、1099.9、1132.9、1155.9、1185.5、1215.0、1241.2、1270.6、1358.2、1380.8、1403.3、1419.3、1578.9和1615.2 nm),建立的SPA-GFS-MLR模型预测性能(r_P=0.944,RMSE_P=1.022 lg CFU/g)最接近GFS-PLS模型。基于在线近红外光谱系统可实现对大批量整块鸡胸肉细菌总数含量的快速无接触检测。     

Evaluation of Beauvericin Toxicity with the Bacterial Bioluminescence Assay and the Ames Mutagenicity Bioassay

ABSTRACT: The bacterial bioluminescence assay was used to determine the acute toxicity level of beauvericin, which was found to be moderate with an EC₅₀ of 94 ± 9 μg/ml. The Ames test was used to evaluate mutagenicity of this mycotoxin. Assays were carried out on 5 Salmonella typhimurium standard tester strains. The spot test was performed on a single beauvericin concentration of 2 μg/plate. The plate incorporation test was done over a range of concentrations (0.2 to 500 μg/plate), both with and without S9. A negative control and 3 positive controls, 2-aminofluorene, sodium azide, and dexon, were included in the assays. Beauvericin was nonmutagenic to any of the standard tester strains used, either with or without metabolic activation.