国标TTC法与AOAC纸片法检测乳中β-内酰胺类抗生素残留对比研究

对乳中抗生素残留的两种微生物检测法进行了比较,确定2种标准方法对6种广谱β-内酰胺类抗生素的检测限,同时指出国标TTC法在检测灵敏度方面的缺陷.建议乳中抗生素残留检测过程中,采用特异性与灵敏度高、经济简便、检测限达到MRLS规定的AOAC纸片法作为国标TTC检测法的补充.     

牛乳中β-内酰胺类抗生素残留及检测方法的比较

介绍了牛乳中抗生素残留的原因及危害，描述了β-内酰胺类抗生素在牛乳中的残留特性及残留现状，阐述了不同抗生素残留检测方法的优缺点，为牛乳中抗生素残留的检测提供理论参考。     

牛乳中β-内酰胺类抗生素残留及检测方法的比较

介绍了牛乳中抗生素残留的原因及危害，描述了β-内酰胺类抗生素在牛乳中的残留特性及残留现状，阐述了不同抗生素残留检测方法的优缺点，为牛乳中抗生素残留的检测提供理论参考。     

牛奶中β-内酰胺类抗生素残留的快速检测方法

将微生物方法与仪器分析方法相结合，用嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌，通过“阻抗分析仪”的自动检测、分析，根据DT时间的产生，判断牛奶中抗生素的残留情况。结果表明，该方法操作简单、快捷，灵敏度高、结果易判断，全部检测过程可在2～3h内完成。本方法检测牛奶中青霉素G的检测限可达3μg／kg。     

嗜热脂肪芽孢杆菌试管法检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留

采用嗜热脂肪芽孢杆菌试管法对牛乳中6种最为常见的β-内酰胺类抗生素残留进行检测,指出嗜热脂肪芽孢杆菌试管法为半定量检测法,对牛乳中β-内酰胺类抗生素残留具有较好的灵敏性.牛乳中青霉素G、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素的检测限为6μg/kg,头孢氨苄的检测限为150μg/kg,苯唑青霉素的检测限为15μg/kg、头孢匹林的检测限为30μg/kg.在检测时间、操作难易程度上较BSDA法具有一定的优越性,可应用于牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的检测.     

牛奶中β-内酰胺类抗生素残留检测试剂盒的研制

以牛奶中残留的β-内酰胺类抗生素为检测目标,开发一种能快速检测其残留的试剂盒。利用嗜热脂肪芽孢杆菌BS 10208对酸和β-内酰胺类抗生素敏感的特点,优化其最优的生长条件,并制成在2.5 h内能发生显色反应的检测试剂盒。单因素结果表明,当菌液接种量5%、生长初始pH 8.0、培养温度55℃、蛋白胨添加量0.50%,其菌落数对数值分别为2.9、7.5、7.3、5.8。正交结果表明,在外加入0.5%蛋白胨营养肉汤中,接种5%种子液,在65℃恒温振荡器中培养24 h,其菌落数对数值为7.6。优化后检测试剂盒在2.5 h内能检测牛奶中β-内酰胺类抗生素残留,其各项参数为:反应体积为0.5 mL,1.5%琼脂,0.01 g/L溴甲酚紫浓度,BS 10208细胞总数为1.30×108 cfu,最适反应温度65℃,青霉素钠的限值为2～4μg/L。该试剂盒还能检测牛奶中残留的四环素类、磺胺类、大环内酯类、氨基糖苷类等抗生素。     

乳品中β-内酰胺类抗生素快速检测试纸条研制

通过β-内酰胺类抗生素-载体蛋白偶联物的合成,单克隆抗体的制备与纯化,胶体金标记物的制备,β-内酰胺类抗生素单克隆抗体-胶体金标记物的制备并冻干到微孔试剂,样品吸收垫和反应膜的制备等研究过程,研制出乳制品中β-内酰胺类抗生素的快速检测试纸条。检测限分别为:青霉素G2μg/L、氨苄青霉素4μg/L、阿莫西林5μg/L、苯唑青霉素/邻青霉素/双青霉素均为6μg/L、头孢洛宁10μg/L、萘夫西林20μg/L、头孢喹肟20μg/L、头孢曲松25μg/L、头孢哌酮50μg/L、头孢噻呋90μg/L;本试纸条特异性好、假阳性率不高于3%、假阴性率为0,检测时间不超过15min,检测限量达到了我国和欧盟的要求,适用于乳品流通环节乳品中β-内酰胺类抗生素残留的检测。      

乳品中β-内酰胺类抗生素快速检测试纸条研制

通过β-内酰胺类抗生素-载体蛋白偶联物的合成,单克隆抗体的制备与纯化,胶体金标记物的制备,β-内酰胺类抗生素单克隆抗体-胶体金标记物的制备并冻干到微孔试剂,样品吸收垫和反应膜的制备等研究过程,研制出乳制品中β-内酰胺类抗生素的快速检测试纸条。检测限分别为:青霉素G2μg/L、氨苄青霉素4μg/L、阿莫西林5μg/L、苯唑青霉素/邻青霉素/双青霉素均为6μg/L、头孢洛宁10μg/L、萘夫西林20μg/L、头孢喹肟20μg/L、头孢曲松25μg/L、头孢哌酮50μg/L、头孢噻呋90μg/L;本试纸条特异性好、假阳性率不高于3%、假阴性率为0,检测时间不超过15min,检测限量达到了我国和欧盟的要求,适用于乳品流通环节乳品中β-内酰胺类抗生素残留的检测。     

液相色谱-质谱联用检测乳中β-内酰胺类抗生素研究进展

β-内酰胺类抗生素是畜牧和牛乳生产中最广泛应用的、治疗动物细菌感染的抗生素。由于它们常用作治疗细菌感染的兽药,因此对于动物性食品和乳中β-内酰胺类抗生素的残留量分析是很重要的。论述了在检测牛乳中β-内酰胺类抗生素中的最新应用状况,表明液相色谱-质谱联用法(LC-MS)是一种高灵敏度和选择性的检测方法,具有广阔的发展前景。     

液相色谱-质谱联用检测乳β-内酰胺类抗生素研究进展

β-内酰胺类抗生素是畜牧和牛乳生产中最广泛应用的、治疗动物细菌感染的抗生素。由于它们常用作治疗细菌感染的兽药，因此对于动物性食品和乳中β-内酰胺类抗生素的残留量分析是很重要的。论述了在检测牛乳中β-内酰胺类抗生素中的最新应用状况，表明液相色谱-质谱联用法(LC-MS)是一种高灵敏度和选择性的检测方法，具有广阔的发展前景。     

Detection limits of four antimicrobial residue screening tests for β-lactams in goat's milk

This study was conducted to compare the detection limits (DL) of several antibiotic residue screening tests with the maximum residue limits (MRL) authorized by the EU according to the guidance for the standardized evaluation of microbial inhibitor tests of the International Dairy Federation. Composite antibiotic-free milk samples from 30 primiparous Murciano-Granadina goats in good health condition were used to prepare test samples spiked with different concentrations of each antimicrobial. In total, 5,760 analytical determinations of 10 β-lactam antibiotics (penicillin-G, ampicillin, amoxicillin, cloxacillin, oxacillin, dicloxacillin, cefadroxyl, cefalexin, cefoperazone, and cefuroxime) were performed using 4 antibiotic residue screening tests: the brilliant black reduction test BRT AiM (AiM-Analytik in Milch Produktions-und Vertriebs GmbH, München, Germany), Delvotest MCS (DSM Food Specialties, Delft, the Netherlands), Eclipse 100 (ZEU-Inmunotec SL, Zaragoza, Spain), and the Copan Milk Test (CMT; Copan Italia SpA, Brescia, Italy). For each method, we estimated the detection limits of the antimicrobial agents using a logistic regression model. Using the CMT and Delvotest on samples spiked with the 8 antibiotics for which MRL were available, DL were at or below the MRL. The BRT test provided DL at or below the MRL for all of the agents except cefalexin, whereas the Eclipse 100 method failed to detect 4 antibiotics (ampicillin, amoxicillin, cloxacillin, and cefoperazone) at MRL or below. Logistic regression-determined levels of agreement were highest for the CMT method (98.6 to 100%) and lowest for Eclipse 100 (66.3 to 100%). In general, agreement levels indicated good correlation between observed results and those predicted by logistic regression. The lowest b values (closely related to test sensitivity) were recorded for the cephalosporins (0.074 to 0.430) and highest for penicillin G, ampicillin, and amoxicillin (11.270 to 11.504). Delvotest and CMT best fulfilled IDF criteria for the ideal test for detecting antibiotic residues in milk.     

ATP生物发光法快速测定生乳中微生物总数的研究

对ATP生物发光法应用于生乳中微生物检测进行了初步摸索,确定了加体细胞裂解液次数为三次;乳样最佳稀释倍数为20倍;用ATP生物发光法对大批乳样进行检测,同时用国标法进行了平皿菌落培养,结果显示,乳中微生物总数对数与光值对数呈正的直线相关(r=0.9485),相关程度为显著相关(P<0.001),二者回归方程为Y=1.0496x 2.4.     

化学发光酶免疫分析法快速测定牛奶中恩诺沙星的含量

目的 建立快速测定牛奶中恩诺沙星的化学发光酶免疫检测方法.方法 采用竞争法,即将牛奶样品中的恩诺沙星与标记有碱性磷酸酶的恩诺沙星同时与限量的特异性固相恩诺沙星抗体进行竞争结合反应,通过分离未结合的标记抗原,测定标记抗原与抗体复合物化学发光强度,经相应的数学函数计算出待测抗原的含量.根据这一基本原理,利用金刚烷类体系作为化学发光底物,快速地测定牛奶中恩诺沙星残留量.结果 检出限可达239.9 pg/ml,检测范围为350～1 000 pg/ml,批内与批间相对标准偏差均小于15％.结论本方法在抗生素恩诺沙星残留检测及监控等领域有很好的应用前景.     

Evaluation of the Delvo-X-Press assay for detecting antibiotic residues in milk samples from individual cows.

Performance of the Delvo-X-Press beta-lactam antibiotic assay was examined using bulk-tank milk samples and milk samples from individual cows. Bulk-tank milk samples fortified with bovine lactoferrin at a concentration of 1 mg/ml or more consistently tested positive. False-positive results were also obtained from bulk-tank milk samples fortified with bovine plasma at concentrations of 20 and 40%. The assay yielded positive results for milk with antibiotic concentrations as low as 2 ppb. Individual milk samples were collected from 144 healthy lactating cows and from 34 cows with chronic Staphylococcus aureus mastitis. Specificity estimates for samples from healthy and mastitic cows were 0.88 (95% confidence interval [CI], 0.82, 0.93) and 0.94 (95% CI, 0.86, 1.00), respectively. Individual milk samples were collected from three cows with experimentally induced mastitis for 21 consecutive days. False-positive results occurred as late as 12 days postchallenge. A moderate but significant (P < 0.01) positive linear correlation (r = 0.61) was observed between test result and somatic cell count (SCC) values in milk samples with SCCs of >10(6)/ml.     

牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1的快速测定

采用免疫亲和柱－荧光光度法快速测定了牛乳及乳制品中黄曲霉毒素M1。试样经过离心、脱脂、过滤后滤液经过键合有黄曲霉毒素M1特殊抗体的免疫亲和柱净化，此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一的识别能力，黄曲霉毒素M1键合在分离柱中的抗体上，用甲醇与水之比为10：90的混合液将免疫亲和柱上杂质除去；以甲醇与水之比为80：20的混合液通过分离柱洗脱；加入溴溶液衍生，以提高测定灵敏度，衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒素M1，检测低限为0．1μg/kg；在0．1－1．0μg/kg范围内，回收率为89．6％－96．1％，变异系数为0．52％－5．8％，分析一个样品的时间小于30min，分析过程中不使用黄曲霉毒素M1标准物质，结果表明，本方法具有准确、简单、快速、安全等优点，可以满足少量和批量样品的检测需要。     

原料乳中微生物的多样性

牛乳营养丰富,适合各种微生物的生长繁殖。该文介绍了原料乳中微生物的种类,综述了国内外近年来关于原料乳中微生物多样性的研究进展。并对非培养微生物学在研究原料乳中微生物多样性的应用进行了总结,高度评价了非培养方式的快速、敏感以及可定义纯培养方式无法发现的微生物的特点。     

用阻抗分析法快速检测牛奶中抗生素残留的研究

研究立足于牛奶中抗生素的快速检测,用嗜热乳酸链球菌作为指示菌,通过“阻抗分析仪”的自动检测、分析,根据DT时间的产生,判断牛奶中抗生素的残留情况。试验表明,方法操作简单、快捷,结果易判断,全部检测过程可在2 h之内完成。该方法的检测灵敏度与GB方法相类似,可检测牛奶中的青霉素为0.04U/mL。     

原料乳中药物残留和掺假物质检测方法的研究进展

原料乳中药物残留或掺假物质的存在造成的安全事件屡屡发生,这使我国乳品行业面临着巨大的挑战。本文主要综述了常规检测法、免疫分析法、仪器检测分析法、生物传感器和蛋白质芯片技术等对原料乳中常见聚醚类抗生素、类固醇激素、苯二氮卓类药物、苯基脲类除草剂、四环素类抗生素和青霉素类抗生素等药物残留、物理性质与原料乳相近的物质、常见电解质、非电解质、防腐剂等掺假物质的检测方法,以及对单一成分掺假物和多种成分掺假物的检测方法,并比较了不同检测方法的准确度、灵敏度、成本等优缺点,以期为相关检测部门进行质量监测或生产厂家牛乳收购提供技术参考。     

标准菌株在微生物检测中的作用

随着国民经济的快速发展和人民生活水平的不断提高, 对食品和药品质量安全的要求也随之提高。在食品和药品生产中, 微生物污染引起的食源性疾病和药物安全问题频出。在质量安全要求方面, 对微生物污染的防控越来越严格, 微生物检测结果的准确性起到至关重要的作用。标准菌株是具有稳定的生物学特性并具有溯源性的, 在微生物检验中可为确保检测结果的准确性提供参考依据。本文综述了标准菌株在检验方法的确认、作为实验对照、培养基和试剂性能验证、仪器设备验证、能力验证等方面的应用, 探讨了商业派生菌株作为标准菌株在微生物检测中的发展应用, 为提高微生物检测技术, 确保检测结果的准确性提供参考依据。