超声辅助碱性蛋白酶提取鸡爪胶原蛋白肽理化性质及功能特性

以超声波辅助碱性蛋白酶提取所得鸡爪胶原蛋白肽作为实验材料,首先研究鸡爪胶原蛋白肽的理化特性（外观色泽、等电点、分子质量分布、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、氨基酸组成及水解度）,进一步对其起泡性和起泡稳定性、乳化性和乳化稳定性等功能特性进行研究。结果表明：鸡爪胶原蛋白肽的分子质量分布范围小于α2-链,小分子质量肽段比例较高;氨基酸种类丰富,甘氨酸和脯氨酸在总氨基酸含量中占比最高;优化提取的鸡爪胶原蛋白肽水解度约28.65%,起泡性和起泡稳定性高达133.33%和126.67%,且具有较好的乳化性和乳化稳定性。     

氨基酸组成及溶剂环境对淡水鱼胶原蛋白热稳定性能的影响

本文探讨了氨基酸组成、分布以及溶剂环境对鱼源胶原蛋白蛋白热稳定性能的影响。利用不同鱼类的胶原蛋白为实验样本,测定胶原蛋白氨基酸组成和热变性温度,通过相关性分析明确了影响胶原蛋白热变性温度的主要氨基酸种类和分布指标。结果表明,胶原蛋白中脯氨酸羟基化率、碱性氨基酸、带电荷极性氨基酸和总极性氨基酸含量与胶原蛋白热变性温度呈正相关,而亚氨基酸与非极性氨基酸含量与胶原蛋白热变性温度呈负相关(p0.01)。运用逐步多元回归分析方法,建立了脯氨酸羟基化率和带电荷极性氨基酸与胶原蛋白热变性温度之间的相关性数学模型,经验证,该模型能较好的预测鱼源胶原蛋白的热变性温度。在此基础上,进一步研究了胶原蛋白所处溶剂环境对其热稳定性能的影响。结果表明,提高水分子浸润胶原蛋白程度和体系离子强度,或降低体系pH均会显著降低胶原蛋白热稳定性能。     

比色法测定鱼鳞中羟脯氨酸的研究

以比色法测定鱼鳞中的羟脯氨酸,具有较好的稳定性和较高的回收率,由氨基酸自动分析仪法验证此方法是可行的。鱼鳞经过脱钙处理,羟脯氨酸的保留率为96.19%,经过第一次提取胶原蛋白后,提取率达到了总胶原蛋白的70%以上,同样的条件下进行第二次提胶,胶原蛋白的提取率较低。     

中华鳖裙边胶原蛋白的提取、鉴定及其理化性质

为增加中华鳖产品附加值,开发新型胶原蛋白资源,该研究以中华鳖裙边为原料,采用不同提取方式,分别提取酸溶性胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)和胃蛋白酶可溶性胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,PSC),并对2种胶原蛋白结构和理化性质进行分析。利用扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、圆二色光谱(circular dichroism specturm,CD)对胶原蛋白的结构进行分析,采用SDS-PAGE凝胶电泳、肽指纹质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight,MALDI-TOF)和氨基酸分析仪对ASC和PSC进行蛋白质和氨基酸比较分析,利用差示量热扫描(differential calorimetry scanning,DSC)对胶原蛋白进行热稳定性分析。结果表明,ASC和PSC的得率分别为26. 79%和37. 50%; PSC与ASC相比存在更完整的三级螺旋结构; ASC和PSC均为I型胶原蛋白,且具有较高的亚氨基酸和精氨酸含量; ASC和PSC的热变性温度分别为38. 39和38. 11℃,高于常见的猪皮和鱼皮胶原蛋白,具有较好的热稳定性。该研究为深入研究和开发中华鳖的裙边资源提供了理论依据。     

巴西科学家研究一种通过碱水解、羟脯氨酸分析能快速、灵敏定量胶原蛋白含量的方法

<正>胶原蛋白是最重要的结缔组织蛋白。在食品工业中应用广泛,它可提高高饮料、酱汤、面条、糖果和肉制品等的弹性、稠度和稳定性。胶原蛋白的的含量可以作为衡量肉肠质量优劣的一个指标。巴西科学家研究了一种简单单、快速、灵敏、可重复的测定胶原蛋白的方法,主要应用于固体原料和胶原原蛋白溶液。该研究的主要内容有胶原蛋白碱水解的程度、Na OH的浓度;     

胶原蛋白与胶原蛋白肽的抗氧化关系初探

胶原蛋白的抗氧化活性尚未见报道,而其水解产物胶原蛋白肽的抗氧化活性报道较多。为研究造成该差异性的原因,分别采用T-AOC法、盐酸羟胺法、DPPH法和ABTS法测定胶原蛋白模拟肽、胶原蛋白肽混合物及其组成氨基酸脯氨酸和甘氨酸的抗氧化活性,并用圆二色光谱法测定CMP和CP的二级结构。试验结果表明:(1)T-AOC法中,CMP,CP和各种氨基酸都不具有抗氧化活性;(2)在盐酸羟胺法中,只有CP具有抗氧化活性;(3)在DPPH法和ABTS法中,肽和氨基酸都具有一定的抗氧化活性,且抗氧化顺序为CPHyproCMP≥ProGly;(4)圆二色光谱法结果表明,CMP具有胶原蛋白形成稳定的3股螺旋结构所必须的α-螺旋,而CP的α-螺旋结构不明显。这些结果提示:(1)胶原蛋白本身稳定的3股螺旋结构可能是其抗氧化活性不明显的原因,而胶原蛋白肽的抗氧化活性的发挥有赖于肽键对氨基酸残基的连接作用以及氨基酸侧链对自由基的易接近性;(2)不同抗氧化测定方法对胶原蛋白肽相关分子的表征效果不同,其中DPPH法和ABTS法的灵敏度相对较高。     

鹿骨胶原蛋白特性的研究

采用酸和酶提取法从鹿骨中提取酸溶性胶原蛋白（ASC）和胃蛋白酶促溶性胶原蛋白（PSC）,利用紫外扫描、傅立叶变换红外光谱、DSC、SDS-PAGE垂直电泳和氨基酸分析仪,研究了鹿骨胶原蛋白的结构、热收缩温度、相对分子量和氨基酸组成。结果表明：紫外扫描分析,鹿骨的ASC和PSC在234nm处均有强烈吸收,具有胶原蛋白的特性;红外光谱说明胶原纤维保留了大量的三股螺旋结构;经DSC测定,鹿骨的ASC和PSC热收缩温度分别为55℃和58℃。SDS-PAGE电泳显示,胶原蛋白含有3条不同的链,α1、α2和β链。氨基酸分析表明,具有典型胶原蛋白的氨基酸组成。     

热水提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的研究

本文对热水法提取罗非鱼鳞胶原蛋白的条件进行了优化,并测定了鱼鳞胶原蛋白的氨基酸组成.结果发现,罗非鱼鳞胶原蛋白的最佳提取工艺为提取温度100℃,pH值6.0,液固比12,时间2h,此时蛋白得率为265.3mg/g原料.氨基酸检测结果发现,所提取鱼鳞蛋白含17种氨基酸,其中7种必须氨基酸,胶原蛋白的特征氨基酸羟脯氨酸含量达10.4g/100g原料.     

淡水鱼皮鱼鳞胶原蛋白粉的成分比较

对淡水鱼皮、鱼鳞胶原蛋白粉的成分进行了分析比较:两者的氨基酸总量、蛋白质、酸溶蛋白、多肽、游离氨基酸含量基本接近,鱼鳞胶原蛋白粉的羟脯氨酸含量、矿物质含量高于鱼皮胶原蛋白粉。     

海蜇Ⅰ型胶原蛋白的提取及结构特性研究

以海蜇为原料，采用盐酸-胃蛋白酶法提取胶原蛋白，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）、紫外光谱（UV-visible spectroscopy，UV）、氨基酸分析、红外光谱（Fourier-transform infrared spectroscopy，FTIR）、圆二色谱（Circular dichroism，CD）以及扫描电镜（Scanning electron microscope，SEM）对其结构特性进行了系统全面的研究。结果显示，海蜇胶原蛋白在135 kDa左右有一条α-链，在245 kDa以上有一条β-链和γ-链，紫外吸收峰在233 nm处，符合I型胶原蛋白的特征，其亚基组成可能为[α₁(I)]₃。海蜇胶原蛋白中含量最高的氨基酸为甘氨酸，占氨基酸总量的25.99%，且含有15.94%的亚氨基酸。红外光谱和圆二色谱均表明海蜇胶原蛋白分子排布紧凑，具有主要由氢键构成的完整三螺旋结构。扫描电镜结果显示海蜇胶原蛋白具有多层聚集、以纤维为主的无规则网状结构。     

云南鲷鱼骨胶原蛋白的制备及其理化性质

以云南鲷鱼骨为原料,采用低温酸法提取制备鱼骨中的酸溶性胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC),并对ASC的氨基酸组成、亚基组成、红外吸收、紫外吸收、热稳定性、X射线衍射、微观结构、多肽片段以及溶解性进行了全面的分析。氨基酸组成表明ASC主要含甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸,而酪氨酸、蛋氨酸和半胱氨酸含量较低;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示ASC为Ⅰ型胶原蛋白;ASC在230 nm波长处有最大紫外吸收峰;傅里叶变换红外光谱和X射线衍射图谱表明ASC分子排列紧凑,保持了其原有的三螺旋结构;差示扫描量热分析结果显示ASC的变性温度分别为86.5℃和226.2℃,有较好的热稳定性;扫描电子显微镜显示ASC分子分布均匀、表面光滑呈三维立体结构;多肽片段分析结果显示鱼骨胶原的氨基酸构成主要为Gly-X-Y,符合胶原蛋白的一级结构的特点;在p H值小于4的条件下,ASC溶解度较高,当Na Cl质量分数大于4%时,ASC溶解度剧烈下降。     

COMPARISON OF THE EFFECTS OF ACHROMOBACTER IOPHAGUS AND SPLENIC PULP ON COLLAGEN OF RESTRUCTURED BEEF

Bacterial cultures (BC) of Achromobacter iophagus and bovine splenic pulp (SP) were evaluated for their ability to degrade collagen in a restructured product high in connective tissue. Effects of the BC (6.0% v/w) and SP (3% w/w) on collagen solubility, amino acid composition, thermal stability, and sarcoplasmic and myofibrillar protein extractability were determined. Results yielded increased (P < 0.05) collagen solubility of A. iophagus and splenic pulp treated samples over that of the high collagen (HC) control product. As a result of both treatments, collagen decreased (P< 0.05) in denaturation temperature and enthalpies. Collagen from the BC samples exhibited decreased levels of hydroxyproline, glycine and proline which may be attributable to changes produced in collagen stability as determined by the collagen stability and denaturation temperature measurements.     

许氏平鲉鱼皮胶原蛋白与胶原肽的制备及特性研究

目的从许氏平鲉鱼皮中制备胶原蛋白及胶原肽,并对其特性进行初步探讨。方法通过氨基酸组成、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及扫描电镜分析探讨鱼皮胶原蛋白的结构特征;制备不同分子量胶原肽组分SCH 1(Mw2000 U)与SCH 2(Mw2000 U),测定其起泡性、吸水性及对H2O2诱导L929细胞氧化损伤的保护作用。结果氨基酸分析表明鱼皮胶原蛋白亚氨酸含量为16.7%;FTIR表明样品基本保持了天然三螺旋结构;扫描电镜分析显示冷冻干燥胶原蛋白具有多孔状结构。大分子量SCH 1的起泡性较好,而低分子量SCH 2具有较好的吸湿性。SCH对H2O2引起的细胞损伤产生一定的保护作用,并呈现出剂量效应关系,结论许氏平鲉鱼皮胶原蛋白为I型胶原蛋白,其胶原肽具有良好的起泡性与吸湿性,可有效抵御H2O2引起的细胞氧化损伤。     

利用猪胶皮制作可食性胶元人造肠衣的研究

本文利用制革工业中的副产品猪胶皮研制可食性人造肠衣。经酸溶胀处理的猪胶皮破碎后可得到胶元蛋白糊状物,将固形物含量为4％左右的胶元蛋白糊状物均匀地涂布在支撑物上干燥后可得胶元蛋白膜。再用低于0.1％的乙二醛或戊二醛溶液对胶元蛋白膜进行交联处理或烟熏处理,可以提高膜的拉伸强度与热稳定性,经交联或烟熏处理后的胶元蛋白膜的超微结构发生了变化,碱性氨基酸含量下降,加热收缩率均低于25％,它具有与天然干肠衣相同的强度。     

Comparison of physical–chemical properties of type I collagen from different species

Type I collagen is an important biopolymer and has been widely used in biomaterials due to its excellent biocompatibility and biodegradable properties. However, only a few studies have been reported on its comparison in different species. The amino acid composition, SDS-PAGE, UV–Vis spectrum, thermal transition temperatures, extractable uronic acid/protein ratio and enzymatic sensitivity of type I collagen from bird feet (BF), bovine skin (BS), frog skin (FS), porcine skin (PS) and shark skin (SS) were evaluated. The amino acid composition of type I collagens were different from different species, BF collagen contained higher glutamic acid (Glu) and aspartic acid (Asp), SS collagen contained lower aspartic acid and hydroxyproline (Hyp). Similar SDS-PAGE profiles were found from different animal’s collagen, all samples were composed of two α1-chain and one α2-chain. All UV–Vis spectrums exhibited a typical absorption peak at 218 nm. The UV absorption spectrum of BF collagen ranged from 190 to 340 nm, FS collagen ranged from 190 to 270 nm; the other species collagen ranged from 190 to 240 nm. Thermal transition temperatures of type I collagen from different animals decreased in the order of BF > BS > PS > FS > SS. PS collagen had higher extractable uronic acid/protein ratio and the lowest enzymatic sensitivity. Summarizing these results, the BF collagen had higher hyproxyproline (Hyp) + proline (Pro) value and exhibited higher thermal stability; the PS collagen contained larger amount of glycosaminoglycan and resulted in a high enzymes resistance. However, the BF and PS collagen should be used as a suitable material in biomaterial utilitys because of its better biostability.     

基于不同提取方法的鮰鱼皮胶原蛋白理化性质的比较研究

本实验以鮰鱼皮为原料,将碱法、盐法、热水法、酸法与酶法提取的胶原蛋白进行理化性质的比较,通过对不同胶原蛋白的氨基酸组成、紫外光谱、傅里叶红外光谱、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)、热变性温度、扫描电子显微镜图像以及流变学特性的研究,从分子结构到微观结构对胶原蛋白进行全面解析和比较。结果表明:5种方法提取的胶原蛋白的紫外光谱与红外光谱都较为相似,为典型的胶原蛋白;碱法、热水法、盐法、酸法和酶法提取的胶原蛋白热变性温度分别为63.21、71.70、49.49、29.8、22℃;SDS-PAGE结果显示酸法、酶法、热水法提取的胶原蛋白均属于Ⅰ型胶原蛋白,且较好地保留了蛋白的结构;高效液相色谱显示碱法与盐法提取的胶原蛋白为多肽的形式;通过流变学特性研究发现,热水法提取的胶原蛋白凝胶稳定性最高。由此可见,不同的提取方法对胶原蛋白的氨基酸组成、流变性质、热变性温度以及微观结构均有不同的影响。     

Amino Acid Profile of Insoluble Collagen Isolated from Fresh Water Prawn, Macrobrachium rosenbergii

Insoluble collagen was isolated from the abdominal tissue of fresh water prawn, Macrobrachium rosenbergii. The yield was 0.4–0.6%. The amino acid profile of this insoluble collagen was elucidated with 81.6 hydroxyproline residues per 1000 collagen amino acid residues or 2 mg hydroxyproline per 100 mg insoluble collagen. A comparison was made between the amino acid profile of insoluble collagen from M. rosenbergii and that of P. setiferus.     

Purification and characterization of type II collagen from chick sternal cartilage

Type II collagen was purified from sternal cartilage of the chick using a combination of pepsin digestion, NaCl precipitation and DEAE-sepharose CL 6B ion exchange chromatography. Pepsin-solubilized type II collagen of higher stability can be obtained with the extraction time of 32 h, 0.5% pepsin concentration at 20 °C. The purified preparation showed a single peak on RP-HPLC and a single band (α-chain) and its dimers (β-chains) on SDS–PAGE with a subunit Mr of 110 kDa. The amino acid composition of the type II collagen derived from chick cartilage was closer to that of reference Sigma–Aldrich type II collagen which contains more imino acid. Analysis by differential scanning calorimetry (DSC) and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) revealed that type II collagen from chick sternal cartilage retains more intermolecular crosslinks during the purification process. Collagen purified from chick sternal cartilage was typical type II collagen and may find applications in functional foods.