蜂花粉总黄酮检测方法的研究

黄酮类化合物因具有多种生物活性而成为目前天然产物研究的热点。本研究通过三种检测方法的比较，确定了聚酰胺-UV法为蜂花粉总黄酮的测定方法，其检测波长为360rim，以芦丁为标准品，在0．005-0．025mg／ml范围内，其浓度与吸光度呈良好的线性关系，相关系数R2为0．9998，平均回收率分别为95．53％，稳定性、精密度和重现性均理想，其RSD分别为2．124％（n=3）、0．488％（n=3）、0．875％（n=5）。该法检测油菜蜂花粉中总黄酮含量为1．54％。     

毛细管电泳法分析蜂花粉中黄酮类化合物

使用毛细管电泳法（CE）检测了健康食品中常见的六种黄酮类化合物：橙皮甙、海棠甙、异鼠李紊、山奈酚、槲皮素、芦丁。研究了一系列的试验参数，如：pH、缓冲溶液浓度、分离电压以及uv检测器波长等以确定出最佳条件。使用H3BOe-Na2B4O7缓冲液（pH9．2），各分析物可在8min内分出。相对标准偏差（RSD）：8次进样的迁移时间为0．77％～0．93％；峰面积为3．8％～8．6％；各检测限（S／N=3）范围为0．34μg／ml～2．9μg/ml，回收率为80．4％～113．9％。方法简单、灵敏，重现性高，线性好，无须固相萃取前处理，用于蜂花粉分析结果准确。     

浊点萃取与液相色谱联用检测啤酒中的黄腐酚

本研究建立了一种浊点萃取（CPE）与高效液相色谱紫外检测联用检测啤酒中黄腐酚的方法。选择非离子表面活性剂Triton X-114作为萃取媒介。对影响CPE的参数进行了评价和优化。当Triton X-114（v／v）浓度为2．5％,pH5．0,NaCl浓度15％（w／v）,平衡温度70℃,平衡时间10min时,黄腐酚的萃取率最高。在此条件下,黄腐酚的检测限为0．003mg／L。日内和日间精密度均以相对标准偏差表示,分别为4．6％和6．3％。此方法可成功用于检测各种啤酒样品中的黄腐酚含量。啤酒样品中的黄腐酚含量变化范围为0．052～0．628mg／L,回收率范围为90．7％～101．9％。此种萃取和检测啤酒中黄腐酚的方法效率高、经济环保、成本较低。     

ICP-MS法测定蜂花粉中的微量元素含量

建立了蜂花粉中Na、Mg、A1、K、Ca、Cr、Mn、Fe、Cu、Zn、Co、Ni、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sb、Ba和Pb共21种微量元素电感耦合等离子体质谱（ICP．Ms）测定的分析方法。样品经微波消解后用IcP．Ms进行分析。优化实验条件下,21种元素的线性范围为肚10μg／mL,线性关系良好,相关系数均大于0．999,方法的检出限为0．02％148-3ng／g,相对标准偏差（n=6）为0．6％-4．6％,添加水平为0．002-3000μg／g时,蜂花粉样品中的21种元素平均加标回收率为91．7％110％。应用于花粉的国家标准物质（GSB-17）,测定值与标准值的一致程度为91．2％～115．3％;方法具有简单、快速和准确的特点,是一种简便、快速分析蜂花粉中微量元素的方法。     

毛细管电泳法分析蜂胶中的黄酮类化合物

使用毛细管电泳法（CE）检测蜂胶中11种黄酮类化合物：金合欢素、芹菜配基、兰肉桂酸、黄良姜精、阿魏酸、橙皮甙、毛地黄黄酮、柑桔黄素、槲皮素、白藜芦醇、芦丁。确定了一些试验参数的优化条件，如：pH、缓冲溶液浓度、分离电压、进样时间以及UV检测器波长等。用H3BO3-Na2B4O7缓冲溶液（40mmol／L，pH8．85）在206nm波长条件下，各分析物可在19min内测出。相对标准偏差（RSD）：8次进样的迁移时间为0．1％～0．3％；峰面积为3．0％～9．7％：各检测限（S／N=10）范围为0．1～O．4μg／ml；回收率为84％～110％。方法简单、灵敏，重现性好，用于蜂胶黄酮类化合物分析结果准确。     

油菜蜂花粉中黄酮的分离纯化及结构鉴定

研究油菜蜂花粉黄酮的组成,采用乙醇提取,石油醚萃取脱脂和柱层析分离方法对油菜蜂花粉黄酮进行研究,得3个黄酮类化合物,经1 H-NMR、13 C-NMR,分别鉴定出3个黄酮类化合物化学结构为山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,与HPLC-MS检测结果一致。     

Folin-ciocalteu法测定黄酒中总多酚含量

采用分光光度法对黄酒中的总多酚进行测定。结果表明：没食子酸丙酯标样浓度在0．025-0．600mg/ml范围内，线性关系良好（r^2=0．9994），回归方程为：Y=2．6325X＋0．017；没食子酸丙酯3个浓度水平（0．050、0，100、0．150mg/ml）的样品平均回收率分别为103．11％、102．70％和102．85％，相对标准偏差（RSD）分别为1．33％、0．40％、0．79％。测得黄酒中总多酚含量为0．929mg／ml，RSD为0．54％。本法简便、快速、准确，可适用于黄酒中多酚类物质的测定。     

液相色谱-线性离子阱质谱法检测草鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物

目的建立鱼中的孔雀石绿（MG）、结晶紫（GV）及其代谢物无色孔雀石绿（LMG）、无色结晶紫（LGV）的测定方法。方法使用液相色谱线性离子阱串联质谱技术和同位素稀释技术，Mcllvaine缓冲液和乙腈提取，OASIS MCX SPE柱净化，洗脱液在选择反应检测模式（SRM）下测定。结果方法的检出限CCα为0．03～0．05μg／kg，定量限CCβ为0．05～0．09μg/kg。5个不同加标水平鱼样中4种目标化合物的平均回收率为84．7％～105．1％，RSD为1．3％～14．9％（n=5）。结论本方法定量准确可靠，可用于鱼样品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物的测定。     

浑浊苹果汁加工过程中理化变化的研究

苹果汁加工过程中，果汁的L值和b值降低，a值升高，但幅度均不大。HPLC等方法测定表明酚类在加工中由于氧化而减少，果汁中黄烷醇单体和原花青素、绿原酸、总酚和表儿茶素的保留率（与原料对比）分别为79．2％、83．8％、72．8％和71．1％。顶空固相微萃取（HP-SPME）法萃取和气／质联用（GC-MS）的检测和分析表明苹果和果汁挥发性组分中最主要的化合物都是酯类和醇类，苹果加工成浑浊苹果汁，酯类由46．94％减少为30．26％，醇类和醛类分别由38．8％、6．7％增加为46．16％、9．8％。     

菱灵颗粒有效成分的抗肿瘤作用研究

目的：研究菱灵颗粒有效成分-化合物Ⅰ在体外对Hela细胞的作用及其作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）还原法检测化合物Ⅰ对肿瘤，L长抑制作用，应用光学显微镜、透射电子显微镜观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果：化合物Ⅰ对人宫颈癌细胞生长具有明显的抑制作用及诱导细胞凋亡作用，且这种作用有剂量依赖关系，化合物Ⅰ25、12．5、6．25mg／L剂量组30h抑瘤率为52．04％、34．44％、23．72％，100、50、25、12．5、6．25、3．125mg／L剂量组30h抑瘤率显著正相关，相关系数r=0．9860（p〈0．01），IC50值为10．9mg／L。透射电子显微镜对化合物Ⅰ25、12．5、6．25mg／L剂量组受试细胞观察，均出现不同程度细胞凋亡现象，细胞核明显皱缩、染色质趋边凝聚、线粒体空化等特征。流式细胞仪检测发现凋亡峰。结论：化合物Ⅰ对Hela细胞增殖抑制作用明显并且有诱导细胞凋亡作用。