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高效液相色谱法测定母乳中唾液酸含量 被引次数：1
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陈海娇 王萍 陈越 李红卫《食品科学》,2011年第16期
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建立荧光高效液相色谱(fluorescence detector-high performance liquid chromatography,HPLC-FLD)测定母乳中唾液酸N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolyl neuraminic acid,Neu5Gc)含量的分析方法。利用酸水解法释放出母乳中的唾液酸,以4,5-亚甲二氧基-1,2-邻苯二胺盐(4,5-methylenedioxy-1,2-phenylenediamine dihydrochloride,DMB)为衍生化试剂,50℃避光衍生150min,采用荧光高效液相色谱仪检测。色谱条件:LiChrosorb RP-18柱(250mm×4mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-超纯水(7:8:85),流速0.9mL/min,进样体积10μL,柱温30℃,荧光检测器激发波长373nm,发射波长448nm。结果表明:唾液酸在50～400μmol/L范围内与唾液酸峰面积的线性关系良好,平均回收率为94.0%,精密度的相对标准偏差(relative standard devia...
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婴儿配方乳粉中甘油三脂Sn-2脂肪酸的测定
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贾云虹 李朝旭 房新平 杨凯《食品研究与开发》,2014年第2期
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建立了方便、快速、准确检测婴儿配方乳粉甘油三酯分子中2-位脂肪酸的方法。采用国际标准化委员会(ISO)14156的方法提取乳脂肪,利用猪胰脂酶专一水解甘油三酯分子的1,3位脂肪酸,得到2位单甘脂,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离制备2位单甘脂,用气相色谱(GC)分析2位脂肪酸组成。结果显示方法的重现性良好,2-位棕榈酸RSD为1.99%,油酸RSD为3.22%,亚油酸RSD为4.37%。本方法用反相高效液相色谱法(RPHPLC)代替传统的薄层色谱法(TLC)分离单甘脂,省时省力,应用本方法检测婴儿配方奶粉中的2-位脂肪酸,操作简单,结果准确,精密度高,重现性好。
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3.
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奶粉中游离唾液酸超高效液相色谱—串联四级杆质谱的检测方法 被引次数：1
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郎昭滨 马世波《中国乳品工业》,2014年第9期
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建立了奶粉中唾液酸超高效液相色谱—串联四级杆质谱(UPLC—MS/MS)的检测方法。奶粉经水溶解,再用高氯酸沉淀蛋白,过MAX固相萃取柱后,去除奶粉基质的干扰在UPLC—MS/MS条件下,对奶粉中的唾液酸实现定量分析。工作曲线呈线性,r=0.9995,回收率在90.6%~107.3%之间,相对标准偏差均小于7%,定量限为89μg/g。本方法灵敏度高,抗干扰能力强,是分析奶粉中唾液酸的理想方法。
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4.
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荧光标记-酶识别-高效液相色谱法测定婴儿配方乳粉中反式低聚半乳糖
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邱志超 黄伟乾 邓伟恒 官咏仪 许丽珠 吴国辉《食品安全质量检测学报》,2018年第9卷第23期
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目的 建立荧光标记-酶识别-液相色谱法的婴儿配方乳粉中反式低聚半乳糖(trans- galactooligosaccharides, TGOS)的测定方法。方法 利用还原氨化反应将奶粉中的TGOS进行荧光标记, 利用β-半乳糖苷酶专一性水解TGOS的特性识别样品中的荧光标记TGOS, 采用高效液相色谱-荧光检测器进行分离检测, 通过分析β半乳糖苷酶处理与非酶解处理组样品色谱图中各相同聚合度TGOS保留时间区间的峰面积差异, 计算TGOS含量, 并用液相质谱联用法进行了验证。结果 在本研究色谱条件下, 乳糖和另外3种低聚半乳二糖实现了分离, 通过质谱验证表明, 低聚麦芽糖(DP2~DP6)与各聚合度TGOS呈现规律性出峰顺序。昆布三糖和实验中各聚合度TGOS的摩尔灵敏度无显著差异(P>0.05)。在0.032~0.321 μmol添加范围内, 荧光标记昆布三糖摩尔量和色谱峰面积呈现出良好的线性关系(r=0.9992)。以已知含量的TGOS糖浆做加标实验, 回收率为90.0%~99.1%, 满足实验要求。结论 该方法能实现高乳糖含量样品中乳糖和TGOS的色谱分离, 适用于高乳糖含量样品中TGOS的定性定量检测。
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5.
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二硫苏糖醇在奶粉含硫氨基酸检测中的应用
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李玉玲 李卫华《食品安全质量检测学报》,2012年第3卷第3期
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目的 建立一种在前处理过程中使用二硫苏糖醇(DTT)为还原剂, 反相高效液相色谱法检测奶粉中含硫氨基酸的好方法。方法 奶粉经酸法水解后, 加入二硫苏糖醇对水解液进行还原处理, 用反相高效液相色谱潽法检测奶粉中含硫氨基酸, 对还原条件、色谱分离条件进行优化, 确定最佳检测条件。结果 蛋氨酸(Met)、胱氨酸[(Cys)2] 、半胱氨酸(Cys)检测限分别为0.7 μmol/L、0.3 μmol/L、0.5μmol/L, 定量检测范围均为10~750 μmol/L, 相关系数分别为0.9998、0.9999、0.9991。最佳DTT作用条件为向1 mL水解液中加入100 μL 0.1 mol/L DTT溶液, 室温反应1 h。测得奶粉中Met、(Cys)2含量分别为0.37 g/100 g、0.14 g/100 g, 加标回收率均在82%~87%之间, 相对标准偏差(RSD)≤1.5%。 结论 在前处理过程中使用适量DTT做还原剂, 用反向高效液相色谱法可准确检测奶粉中含硫氨基酸的含量。
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6.
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国际标准化组织发布婴儿配方奶粉检测最新标准
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《轻工标准与质量》,2018年第5期
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正ISO 20635 《婴儿配方和成人营养制剂——通过(超)高效液相色谱紫外检测法测定维生素C》和ISO20636 《婴儿配方和成人营养制剂——通过液相色谱-质谱测定维生素D》日前由国际标准化组织发布,这两项标准是婴儿配方和婴儿专用医用配方奶粉国际食品法典的测试方法国际标准,可作为解决贸易争端的参考测试
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7.
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燕窝中唾液酸的DAD/FLD串联HPLC测定方法研究 被引次数：2
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冯婷玉 薛长湖 孙通 崔宏博 徐杰《食品科学》,2010年第8期
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建立燕窝中唾液酸的柱前衍生二极管阵列/荧光检测器(DAD/FLD)串联的反相高效液相色谱检测方法。用硫酸氢钠溶液水解样品,以邻苯二氨盐酸盐为衍生化试剂,采用C18柱分离,四氢呋喃溶液(含体积分数0.5%磷酸和体积分数0.15%正丁胺)-乙腈为流动相等度洗脱,流速1.0mL/min,二极管阵列检测波长230nm,荧光激发波长(Ex)230nm,发射波长(Em)425nm。结果表明,唾液酸在0.1～750μg/mL范围内线性良好(r>0.9990),20min内完全分离,回收率在85.03%～97.14%之间。检出限0.2μg/mL(DAD),0.005μg/mL(FLD),FLD检出限比DAD低两个数量级且杂峰少,在DAD检出限以上的相同浓度下,DAD比FLD更灵敏。本方法具有灵敏度高,重复性好,分析速度快等特点,可准确测定燕窝等样品中唾液酸含量。
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高效液相色谱法测定配方奶粉中VB_6总量的两种前处理方法
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张辉 王丁林 严罗美《食品工业》,2008年第6期
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用两种提取方法进行高效液相色谱法荧光检测器测定配方奶粉中VB_6总量,并对其特点和检测结果进行比较。
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HPLC法柱后衍生测定乳制品中牛磺酸的含量 被引次数：7
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姜金斗 刘波 郝岩平《中国乳品工业》,2003年第31卷第4期
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建立了高效液相色谱法测定乳制品中牛磺酸含量的方法。采用荧光检测器，柱后OPA衍生剂衍生，色谱柱为Waerts氨基酸分析柱，柱温为25℃，流动相流速为0．4mL／min，衍生剂流速为0．4mL／min。标准曲线相关系数为0．9749；回收率为95．6％；8次样品测定SD为0．3832，变异系数为1．2136％。
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10.
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高效液相色谱法测定奶粉中唾液酸的含量
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冯君 李宏基 韩立强 李卫华 杨国宇《中国乳品工业》,2008年第36卷第6期
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利用酸水解法可释放出奶粉中的蛋白结合态唾液酸,以邻苯二氨盐酸盐为衍生化试剂,80℃水浴中衍生40min,采用Symmetry C18柱（250 mm×4.6mm,5цm）,流动相为1.0%的四氢呋喃水溶液（含0.2%磷酸）-乙腈（92：8）,流速为1.0mL/min,紫外检测波长227nm。结果表明,唾液酸在质量浓度为20～500mg/L范围内线性良好,平均回收率为96.8%。该方法具有灵敏度高,重复性好等特点,可准确测定奶粉中唾液酸的质量浓度。
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荧光法测定婴儿奶粉中色氨酸的含量 被引次数：3
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任大喜 提伟钢 李景红 霍贵成《食品工业科技》,2007年第7期
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建立了婴儿奶粉中色氨酸的荧光分析方法,以NaOH为水解液水解婴儿奶粉,在激发波长225nm,发射波长350nm处测定色氨酸的荧光强度。方法线性范围0～0.07mg/L,检测限为0.0015mg/L,回收率在95%～105%之间。此法快速、简便、灵敏度高。
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高效液相色谱法测定奶粉及其他乳制品中的L-羟脯氨酸 被引次数：4
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金苏英 林笑容 赵志红 朱慧 施文蓉《饮料工业》,2009年第12卷第7期
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建立了柱前衍生反相高效液相色谱法测定奶粉及其他乳制品中L-羟脯氨酸的方法.采用酸水解样品,经6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC试剂)衍生水解样品中的L-羟脯氨酸,以磷酸盐缓冲溶液、乙腈、水梯度洗脱,流速1.0ml/min,通过symmetry C18柱将L-羟脯氨酸与其他18种氨基酸分离.紫外检测器在248nm波长下检测.测定结果显示,在0～2.05mmol/L范围内,标准曲线呈良好的线性关系(r=0.9991),加样回收率为95.1%～101%,方法精密度RsD(n=7)为1.3%.该方法具有简单、稳定、灵敏度高、准确等优点.
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不同加工工艺对婴儿配方奶粉中唾液酸存在形态的影响
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刘宁 孙晨 刘丽波 李思捷 李春《现代食品科技》,2014年第30卷第2期
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人乳中唾液酸含量丰富,它对婴儿成长发育起到重要作用。然而,国内对于婴儿配方奶粉中唾液酸添加的工艺研究几乎没有开展。为了使婴儿配方奶粉中的唾液酸含量更接近人乳,本研究采用干法和湿法两种加工工艺将游离唾液酸添加到婴儿配方奶粉中,确定了两种加工工艺的婴儿配方奶粉中游离唾液酸的添加量范围,并且根据人乳中唾液酸存在模式,选择了最佳添加量。结果表明:干法生产每吨婴儿配方奶粉添加1.4~2.8 kg游离唾液酸,婴儿配方奶粉中的唾液酸含量为348~559 mg/L;湿法生产时游离唾液酸的添加量为400~800 mg/L,婴儿配方奶粉中唾液酸的含量为343~557 mg/L。尽管两种工艺均能满足婴儿配方奶粉中唾液酸含量标准,但干法工艺相比湿法工艺游离唾液酸的损耗小,节约经济成本。研究发现,随着游离唾液酸添加量逐渐增大,蛋白质结合唾液酸比例逐渐降低。当干法生产添加量为2.8 kg/t,湿法生产添加量为800 mg/L时,唾液酸在婴儿配方奶粉中的存在模式与人乳接近。
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14.
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刺参多糖中糖醛酸、氨基糖和中性单糖的同步测定方法研究
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田鑫 盛文静 赵园园 董军 薛勇 薛长湖《食品工业科技》,2014年第15期
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建立柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生高效液相色谱法(HPLC)测定刺参多糖中糖醛酸、氨基糖和中性单糖的方法。刺参多糖用2mol/L三氟乙酸水解、PMP衍生化后,用反相HPLC检测,实现了糖醛酸,氨基糖和中性单糖的良好分离和测定。测定结果表明,刺参多糖含有甘露糖、半乳糖、岩藻糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖和葡萄糖醛酸6种单糖。该方法简便快捷,灵敏度高,重现性良好。
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超高效液相色谱-串联质谱法测定燕窝中唾液酸的含量
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侯向昶 朱丽萍 刘春生 王斌 王莉 韩婉清 赖富饶 柯振华《现代食品科技》,2013年第29卷第7期
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本研究建立了燕窝中唾液酸含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定方法。经磷酸水解后,燕窝中的唾液酸从与唾液酸糖蛋白的结合状态中游离出来,吸取上清液过Oasis HLB柱,用水淋洗固相萃取柱并弃去全部流出液,用真空泵在40～60 kPa负压下抽干Oasis HLB固相萃取柱,再用甲醇洗脱被测物,洗脱液40℃水浴中氮气吹干,用流动相溶液定容,采用负离子模式和多反应监测模式超高效液相色谱-串联质谱法检测。方法的线性范围在0.1-50 mg/L之间,相关系数0.999,检出限为0.02 mg/kg,定量限为0.1 mg/kg,样品平均加标回收率为93.5%,相对标准偏差1.52%。该方法前处理简单、重复性好、灵敏度高,可应用于燕窝中唾液酸含量的测定。
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氨基柱反相高效液相色谱法测定单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液的含量
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何丹 杨林 张景勍《激光杂志》,2013年第34卷第3期
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目的:建立以氨基柱反相高效液相色谱法测定单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液含量的方法.方法:色谱柱为phenomex NH2100A(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1mol/L磷酸水(66:34),流速1.0mL·min-1,检测波长为205nm.结果:单唾液酸四己糖神经节苷脂钠在52.3至836.8ug·mL-1浓度范围内线性关系良好,回归方程为:Y=32819X+ 64247(r=0.9992)；平均回收率为98.32％,RSD=1.49％(n=9).结论:该方法准确、简便、快速、可靠,能有效控制单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液的质量.
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17.
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反相高效液相色谱法检测奶粉中含硫氨基酸 被引次数：4
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李玉玲 李卫华 杨秀清《食品科学》,2012年第8期
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目的:建立奶粉中含硫氨基酸反相高效液相色谱检测方法,为含硫氨基酸检测提供新思路。方法:用常规酸水解和氧化水解法水解奶粉,对水解条件和色谱分离和检测条件进行研究,用反相高效液相色谱法测定奶粉中的含硫氨基酸。结果:蛋氨酸(Met)、胱氨酸[(Cys)2]检出限分别为0.7、0.3μmol/L,定量检测范围均为10～300μmol/L,相关系数分别为0.9993、0.9992。经酸水解和氧化水解处理的奶粉,所测得的Met含量无显著差异,均为0.43g/100g,(Cys)2的含量则分别为0.06、0.14g/100g,差异显著。结论:奶粉中Met含量的高效液相色谱HPLC检测可选用酸水解或氧化水解中任一种前处理方法,(Cys)2含量的测定只能采用氧化法进行前处理。
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18.
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FITC柱前衍生生物胺HPLC—LIFD的分离
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杨锐 王琳 刘鑫鑫 李冬 杨长龙《齐齐哈尔轻工业学院学报》,2012年第2期
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采用异硫氰酸荧光素（FITC）作为柱前衍生试剂，对酱油中的生物胺衍生化，采用高效液相色谱（HPLC）与激光诱导荧光检测器（LIFD）联用技术，对衍生产物进行了检测。建立了酱油中生物胺的衍生及分离方法，考察了衍生温度、缓冲液pH、衍生反应时间等因素对生物胺衍生化的影响，考察了流动相、流速、温度等条件对分离效果的影响。衍生条件为：衍生温度50℃，缓冲液pH8～10，衍生时间12h；分离条件为：流动相：乙腈一水，流速：1．0mL／min，室温。
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19.
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马来西亚与印度尼西亚产燕窝中唾液酸含量的 差异分析
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蔡翔宇 马燕娟 吴玉杰《食品安全质量检测学报》,2016年第7卷第9期
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目的 测定马来西亚和印度尼西亚产燕窝中的唾液酸含量, 探究其是否与产地存在相关性。方法 样品经乙酸加热水解释放出唾液酸, 水解液经Agilent 300-SCX色谱柱分离, 采用乙腈-0.1%磷酸水溶液(90:10, V:V)作为流动相, 采用二极管阵列检测器在205 nm波长下进行高效液相色谱检测。结果 对30份燕窝样本中的唾液酸含量进行分析, 马来西亚产地燕窝中唾液酸含量范围为7.00~11.9 g/100 g, 平均含量为9.11 g/100 g, 印尼产地燕窝唾液酸含量范围为7.89~12.8 g/100 g, 平均含量为10.5 g/100 g。通过统计学t检验分析, 印尼产燕窝唾液酸含量略高于马来西亚产的燕窝, 但不存在显著性差异(P>0.05)。结论 燕窝唾液酸不会对不同产国的燕窝品质带来显著影响。
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白燕与血燕的营养成分分析和比较 被引次数：1
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曹妍 徐杰 高焱 王静凤 李兆杰 薛长湖《食品工业科技》,2011年第10期
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为分析和比较白燕与血燕的营养成分，分别采用凯氏定氮法、邻苯二甲醛-氯甲酸芴甲酯（OPA—FMOC）柱前衍生反相高效液相色谱法、柱前衍生二极管阵列／荧光检测器串联反相高效液相色潜法和电感耦合等离子体质谱法（ICP—MS）等方法测定了白燕与血燕的蛋白质含量、氨基酸组成及比例、唾液酸含量、无机元素含量。结果表明：白燕蛋白质含量为56．5％，氨基酸总量49．22％，其中必需氨基酸占氨基酸总量的58．0％，唾液酸含量占干重15．3％。血燕蛋白质含量为55．0％，氨基酸总量44．16％，必需氨基酸占氨基酸总量的57．9％，唾液酸含量约为13.3％。两种燕窝中蛋白质、氨基酸含量均较高，必需氨基酸占氨基酸总量50％以上．唾液酸含量均大于10％，无机元素种类丰富。白燕的蛋白质含量、氨基酸总量、唾液酸含量比血燕略高．但两者不存在明显差异，两种燕窝中无机元素含量略有差异．该结果为燕窝产品的深入研究提供了重要依据和实验思路。
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