机油降解菌的分离、筛选和鉴定

采用驯化、富集、平板划线等方法从厦门污水处理厂、福州祥坂污水处理厂的活性污泥和石油污染的土壤中分离、筛选到了3株机油降解菌。它们能够在以机油为唯一碳源的培养基中生长，对机油都有较强的降解能力。经形态观察和生理生化实验的初步鉴定，3株机油降解菌株分别为不动细菌属（Acinetobacter sp．）、假单胞菌属（Pseudomonas sp．）、动胶菌属（Zoogloea sp．）     

萘降解菌的分离、鉴定及降解特性的研究

该研究对乌梁素海水中高效萘降解菌进行筛选并分析了降解特性。筛选出8株以萘为唯一碳源和能源的萘降解菌,对其进行了形态观察、生理生化试验和16S rRNA基因序列分析。结果表明,这8株菌分别属于细杆菌属（Microbacterium）、短波单胞菌属（Brevundimonas）、红球菌属（Rhodococcus）、迪茨氏菌属（Dietzia）和假单胞菌属（Pseudomonas）。其中,菌株S2、S8、C4和C8在培养10 d内可降解88%、64%、65%和76%的质量浓度为3.5 g/L的萘。当以硝态氮为唯一氮源时,可不同程度地增加萘的降解率,微量元素和混合维生素对萘降解菌的生长及萘降解有一定的促进作用,在最适pH条件下萘降解效果较好。     

柠檬苦素高效降解菌的分离筛选与鉴定

筛选出在酸性环境下高效降解柠檬苦素的菌株,扩展了生物法消除柑橘果汁中的苦味物质的应用领域。从新鲜醋醅中粗筛并分离出以柠檬苦素为唯一碳源的8株菌,其相应的柠檬苦素降解率均达70%以上,其中6、7、8号菌的柠檬苦素降解率较高,分别为95.14%、98.21%和94.31%。比较3株高效降解菌的胞外蛋白、胞内蛋白和菌液的柠檬苦素降解能力,3株菌中具有降解柠檬苦素的活性蛋白酶主要分布在细胞外,属于胞外蛋白酶,胞内蛋白对柠檬苦素几乎无降解作用,其中6号菌株胞外酶的柠檬苦素降解活性最强,柠檬苦素降解率为45.57%。形态学观察及分子生物学鉴定6、7、8号菌均属于拉乌尔菌属(Raoultella sp.)。菌株6具有高效降解柠檬苦素能力,能够成为今后降解柠檬苦素微生物源的优势菌种。     

酒石酸降解菌的筛选及鉴定

从含酒石酸的环境中分离得到10株可降解酒石酸的菌株,通过测定各菌株对酒石酸的降解率,从中筛选得到一株降解率高达70%的菌株,命名为F1。依据微生物学分类鉴定方法,对该菌株进行形态学、生理生化特性鉴定及rDNA-ITS序列分析,鉴定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger)。经毒素检测和动物毒性实验未见毒性。     

柠檬苦素降解菌的分离筛选与分类鉴定

以新鲜醋醅为分离源,分离得到5株具有柠檬苦素降解活性的菌种,对柠檬苦素的最大降解率可达(58.86±2.81)%,发酵液的酶活力为(120.09±1.32)U/mL。基于形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析结果,所得5 株菌均属芽孢杆菌属(Bacillus),其中2株为Bacillus siamensis,1株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),1株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),降解能力最强的1株为芽孢杆菌种Bacillus tequilensis。     

山葡萄有机酸降解菌的筛选、分离及鉴定

从山葡萄（Vitis amurensis Rupr）生长的土壤中分离出8株可降解果实中有机酸的菌株,通过比较降解率,筛选出1株可降解酒石酸、苹果酸、柠檬酸的菌株,命名为S4。对菌株S4进行形态学及26s rDNA分析,鉴定其为草酸青霉（Penicillium oxalicum）。并对S4进行有机酸降解性和耐受性试验。结果为：降酸菌株的酒石酸降解率为（71.90±0.27）%,苹果酸降解率为（86.33±0.53）%,柠檬酸降解率为（72.77±0.46）%。菌株S4酒精耐受性大于体积分数12%、SO2耐受性大于质量浓度500 mg/L,致死温度为60℃～65℃,20 min～30 min。从山葡萄生长土壤中筛选出的草酸青霉具有良好的降酸效果。     

褐藻胶降解酶产生菌的筛选与鉴定

为了丰富褐藻胶降解酶产生菌的来源,该研究以褐藻胶为唯一碳源,从长兴岛采集的腐烂海带中筛选能够高效降解褐藻胶 的菌株,并通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定。结果表明,经筛选和鉴定获得一株能够高效降解褐藻胶的 水莱茵海默氏菌（Rheinheimera aquimaris）,编号为E-10,其产褐藻胶降解酶活力为14U/L。     

台湾乳白蚁纤维素降解菌的分离和鉴定

该研究从广西柳州本地的台湾乳白蚁（Coptotermes formosanus）体内筛选一株纤维素降解菌,通过形态观察、生理生化试验以及分子生物学对其进行鉴定,并采用滤纸片法及3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定该菌株的纤维素酶活力。结果表明,筛选获得一株可在以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基上生长的菌株,命名为BW,并鉴定其为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）;菌株BW的纤维素酶活力最高,为（93.73±0.22）U/mL。     

自然发酵蔬菜制品中降解亚硝酸盐乳酸菌的分离与鉴定

以自然发酵蔬菜为原料,采用平板计数和钙溶圈法分离纯化菌株,并分析菌株的亚硝酸盐降解能力。结果表明,钙溶圈法分离的产酸能力较强的9株细菌,经生理生化鉴定均为乳酸菌。乳酸菌在MRS培养基中都具有亚硝酸盐分解能力,其中H12、L7和X1三株乳酸菌亚硝酸盐降解率高于89%,且降解速度较快,其中X1降解亚硝酸活性最强。乳酸菌X1还表现良好的产酸能力和耐盐性,经16S rDNA鉴定为植物乳杆菌(Lactobcillus plantarum)。     

苯甲酸降解菌的分离鉴定及其对烤烟幼苗生长的影响

为降低烟草连作对烟叶产量和品质以及烟草生长发育带来的不良影响,通过平板筛选和摇床复筛,从烤烟根系分泌物中筛选出一株能高效降解苯甲酸的菌株。结果表明,根据rDNA-ITS的扩增及序列分析、培养特征及形态特征观察初步鉴定该菌株为黄曲霉(Aspergillus flavus);该菌株培养15 d内,在0~800 μmol/L苯甲酸浓度范围内能够正常生长,800~1600 μmol/L苯甲酸浓度范围内生长受到一定程度抑制;该降解菌在以苯甲酸为唯一碳源的800 μmol/L浓度LBA培养基中菌株干重、降解率均达到最大,菌株干重为0.765 g,降解率为19.98%;菌株在培养至第9天时降解速率达到最快,为8.5 mg/d;烤烟幼苗生长过程中施加降解菌液能在一定程度上降低根系分泌物的抑制作用。该降解菌株在盆栽试验中能够降低根系分泌物对烤烟的自毒作用,使微生物菌株降解烤烟自毒物质来克服连作障碍成为可能。     

传统发酵食品-浆水中微生物的分离与初步鉴定

通过对浆水中的微生物进行分离培养及数量测定，查明了浆水中的优势菌为乳酸菌及酵母菌，其次尚有少量放线菌，霉菌为污染菌。从不同样品中分离得到了2株乳酸菌、3株酵母菌，1株放线菌及2株霉菌，通过对其形态、培养特征及生物学特性的研究，初步鉴定2株乳酸菌分属于乳杆菌属（Lactobacillus）和明串珠菌属（Leaconostoc）；3株酵母菌分属于酒香酵母属（Brettanomyces）、隐球酵母属（Cryptococcus）及裂殖酵母属（Schizosaccharomyces）；放线菌属于诺卡氏菌属（Nocardia）；2株霉菌分属于青霉属（Penicillium）和曲霉属（Aspergillus）。     

邻苯二甲酸二丁酯降解菌株的筛选鉴定及其降解特性研究

从四川省雅安市使用过地膜的蔬菜田地的土壤中筛选得到一株以邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为唯一碳源和能源生长的高效降解菌株JF,经形态学、生理生化特征和16S rDNA序列分析,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。在LB培养基的动力学研究表明,菌株JF降解邻苯二甲酸二丁酯的过程满足一级动力学方程模型,在测试的底物(DBP)浓度、温度、pH范围内,DBP的半衰期为3.11~6.98 h,且该反应的速率受底物浓度和温度的影响较大,受pH值影响不大。菌株JF可降解DBP及其中间产物邻苯二甲酸,此外,菌株JF在72 h内对200μg/mL的邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)、邻苯二甲酸二辛酯(DOP)和邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)降解率为90.10%、79.10%和76.30%。该研究为消除或减少环境、农产品中邻苯二甲酸酯残留提供了理论依据。     

花色苷纯化分离及鉴定研究进展

花色苷是高等植物中最重要的水溶性色素。因其种类繁多、来源广泛、安全无毒并有一定的营养和保健功效而引起国内外的广泛关注,具有十分重要的开发价值和广阔的应用前景。文中介绍了国内外花色苷分离纯化（层析法、高速逆流色谱、膜分离法、固相萃取）、以及花色苷鉴定（高效液相色谱-串联质谱法,核磁共振法）的研究方法,并对各种方法进行了分析评价。对全面认识和开发利用花色苷具有一定的参考价值。     

Chitinibacter sp. GC72的筛选鉴定及其几丁质降解产物研究

为向几丁质酶资源的开发利用提供研究基础,作者筛选获得了一株具有高产几丁质酶活性的细菌。经形态、生理生化及分子生物学研究手段鉴定表明该菌属奈瑟菌科,Chitinibacter属,命名为Chitinibacter sp.GC72。经1L发酵体系检测,其粗酶液酶活可达2835U/g。利用薄层层析法、液相色谱法和质谱法对其酶解几丁质产物进行了分析鉴定,结果表明产物主要为N-乙酰-D-氨基葡萄糖。最后利用该酶进行了多次酶解实验,证实投入3.44U酶量经27h转化可降解200mg几丁质至159mg N-乙酰-D-氨基葡萄糖,收率为79.6%。     

Isolation and Identification of a Novel β-Carotene Degrading Microorganism from Sea Buckthorn Juice

This study was designed to isolate and identify a novel β-carotene cleaving microorganism from sea buckthorn juice and to detect the carotenoid-derived aroma compounds catalyzed by the microbial enzyme. The strain was characterized based on morphological and biochemical properties, as well as part of its 16S rDNA sequence analysis. It was then identified using Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) and classified as coagulase-negative Staphylococcus pasteuri (GeneBank Accession No. KP171185). β-Ionone and β-cyclocitral were formed as the main flavor products of β-carotene in submerged culture. When cell-free culture supernatant was applied for the conversion, nearly complete degradation of β-carotene (2 mg) was observed after 12 h. β-Ionone and β-cyclocitral were the main aromas, whereas β-ionone-5,6-epoxide, 2-hydroxy-2,6,6-trimethyl cyclohexanone and dihydroactinidiolide were formed in minor quantities. Moreover, the carotenoid-cleavage enzyme activities of S. pasteuri were partially characterized and partially purified enzyme possesses high activity in adverse industrial condition.     

氯氰菊酯降解菌的分离鉴定及其降解底物谱研究

采用富集培养法,从长期受氯氰菊酯农药污染的果园土壤中,分离筛选得到1 株可降解氯氰菊酯的菌株N-02。经形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析,初步鉴定为点状气单胞菌（Aeromonas punctata）。菌株N-02在35 ℃、pH 7.5、氯氰菊酯质量浓度为20 mg/L的LB培养基中培养96 h,对氯氰菊酯的降解率达到62.31%。该菌株N-02对拟除虫菊酯的降解谱较宽,培养96 h对20 mg/L高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和氟氯氰菊酯降解率分别达到40.17%、33.26%和30.45%。     

降解赭曲霉毒素A菌株的筛选及其鉴定

为了提供筛选生物降解赭曲霉毒素A（ochratoxin A,OTA）的便利条件,优化水系中OTA的测定方法。通过在水系中添加甲醇或乙醇的方法,使得水系中OTA回收率超过了90%,此外通过对比,当甲醇或乙醇与样液体积比为1∶1时,足以准确测定水系中OTA含量。利用以上方法对降解OTA的菌株进行筛选,发现细菌B-1和酵母Y-2均能够降解OTA,且细菌B-1在2 d时能降解87%的OTA,3 d将OTA全部降解,而酵母Y-2在2 d时就能够降解84%的OTA,在后续的培养中维持降解率不变。此外,利用液质联用法进一步确定了菌株B-1和Y-2的降解作用,并分析了降解产物。最后,通过分别分析细菌B-1和酵母Y-2的16S rDNA和ITS rDNA序列,菌株B-1鉴定为泡囊短波单胞菌,菌株Y-2鉴定为耶罗维亚酵母。     

3-苯氧基苯甲酸降解真菌的筛选及其降解特性

以传统发酵食品为菌源,经不同质量浓度3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)梯度驯化,筛选出6株具有3-PBA降解能力的霉菌,其中从砖茶中分离的降解菌YAT1可在22h内完全降解PD培养基中100mg/L的3-PBA,根据其形态特征和ITS序列分析(GenBank Accession No.JQ366070),将其鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。动力学研究表明,YAT1降解3-PBA的过程符合一级动力学方程,在测试的底物(3-PBA)质量浓度、温度、pH值范围内,3-PBA半衰期为5.635～12.160h,远远低于其自然降解半衰期(180d),且该反应的速率受pH值影响不大,受底物质量浓度和温度的影响较大。     

渤海虾酱中益消细菌的分离和鉴定

虾酱是中国传统的助消化食品之一,可促进肠道内生理性厌氧菌的生长,预防肠道菌群失调,有助于肠道消化吸收。以渤海虾酱为研究对象,采用营养琼脂培养基对虾酱中细菌进行分离筛选,得到1株细菌,革兰氏染色呈阳性,经16SrDNA扩增、测序、NCBI数据库BLAST比对和构建菌株系统发育树确定其为地衣芽孢杆菌(Bacillus licenhiformis)。对该菌株进行耐热性分析,该菌株在低于40℃时存活率不受影响,而在60℃以上的温度处理后存活率降低,100℃处理后基本失活,表明虾酱在部分食品加工的加热过程中其益消能力逐渐降低。本研究结果为渤海虾酱在食品加工中生物活性的保持奠定了理论基础。     

异淀粉酶产生菌的分离鉴定及异淀粉酶基因的克隆表达

目的:为了进一步提高淀粉的利用率,从微生物中获得高产量异淀粉酶的菌株。方法:本实验从富含淀粉的土壤中筛选出1株高产异淀粉酶的菌株,命名为LZ-5,通过菌落形态观察、生理生化特性实验、16S rDNA序列及gyrB基因分析,构建系统发育进化树并对其进行鉴定;根据NCBI上的迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)异淀粉酶基因设计引物,扩增出异淀粉酶基因后,以pMD-18T为载体,构建重组质粒,导入到E.coli DH5a感受态细胞,挑选阳性重组质粒进行酶切鉴定及表达产物的检测。结果:LZ-5鉴定为枯草芽孢杆菌,所产异淀粉酶酶活力为10.9 U/mL;测序结果与NCBI上报道的异淀粉酶基因相似度达到96%,表明将枯草芽孢杆菌的异淀粉酶基因成功转化到大肠杆菌中。经IPTG诱导表达,构建的大肠杆菌工程菌,通过细胞破碎仪破碎后,测得异淀粉酶酶活力为28.4 U/mL,是菌株LZ-5的2.6倍。结论:细菌异淀粉酶基因重组表达是解决异淀粉酶活力低的主要策略之一。