几种植物多酚对Hela细胞抑制作用的初步研究

采用噻唑蓝比色法、吉姆萨染色法和吖啶橙荧光染色法研究了莲房原花青素、葡萄籽多酚和茶多酚对Hela肿瘤细胞株的体外抑制作用.结果表明,在一定的浓度范围内,这三种植物多酚对Hela细胞均有明显的抑制作用,且存在良好的剂量-教应关系.它们对Hela肿瘤细胞株的半数抑制浓度分别为茶多酚IC50=245.0μg/mL,葡萄籽多酚IC50=78.7μg/mL,莲房原花青素IC50=190.8μg/mL,其抑制效果依次是葡萄籽多酚>莲房原花青素>茶多酚.普通显微镜和荧光显微镜观察发现,Hela细胞经这三种植物多酚作用后,细胞形态发生明显的变化,可见凋亡小体,荧光强度增强,细胞呈现凋亡现象.     

根皮苷及苹果幼果多酚对酪氨酸酶活性的抑制作用

为比较苹果幼果多酚及其主要组分根皮苷作为酪氨酸酶抑制剂的潜质,本文以曲酸为阳性对照,分析并比较了三者对酪氨酸酶的抑制效果及抑制动力学。结果表明,根皮苷、苹果幼果多酚和曲酸均能有效抑制酪氨酸酶单酚酶及二酚酶活性,三者抑酶效果的强弱顺序为曲酸苹果幼果多酚根皮苷,对单酚酶活性的IC50分别为55.80、54.30和23.81μg/m L,对二酚酶活性的IC50分别为75.30、56.15和23.45μg/m L;根皮苷浓度为200μg/m L时为竞争型抑制,低于200μg/m L时为混合型抑制,苹果幼果多酚为非竞争型抑制,曲酸为混合型抑制。因此,抑制剂的组成成分和浓度均能影响其抑酶效果和抑酶机理,三种抑制剂均可通过抑制酪氨酸羟化生成多巴及抑制多巴氧化成多巴醌来减少黑色素的合成,苹果幼果多酚对酪氨酸酶活性的抑制效果优于根皮苷,且含量丰富,价格便宜,更适合作为酪氨酸酶抑制剂,有望开发应用于美白产品中。     

酱油对酪氨酸酶抑制作用的研究

酪氨酸酶是合成黑色素过程的关键酶,通过测定酱油对酪氨酸酶活性的影响来确定其对酪氨酸酶的抑制作用及抑制机理。结果表明:酱油对酪氨酸酶具有较强的抑制作用,酶抑制率达到50%时(IC50)酱油固形物含量浓度为19.8g/L。酱油对酪氨酸酶的抑制作用动力学行为表现为可逆混合性抑制类型。     

藜麦皂苷的提取及其酪氨酸酶抑制活性

探究藜麦"陇藜1号"籽粒中皂苷的最佳提取条件并验证其酪氨酸酶抑制活性。设计三因素三水平正交实验,探索料液比,乙醇浓度及超声时间对藜麦皂苷提取得率的影响。构建L-多巴诱导的B16细胞模型,测定藜麦皂苷对细胞活性及酪氨酸酶活性的影响,最终通过免疫印迹法(Westernblot)探索藜麦皂苷影响酪氨酸酶活性的作用通路。结果显示:藜麦皂苷最佳提取条件为料液比1:40,70%浓度的乙醇下超声60 min,得率为17.85 mg/g。当藜麦皂苷的浓度低于200μg/m L时,其对B16细胞无显著抑制作用,但能显著抑制酪氨酸酶的活性和黑色素的形成,200μg/m L藜麦皂苷处理B16细胞72 h,黑色素相对含量降至73.85%,酪氨酸酶活性降至53.31%。藜麦皂苷通过抑制小眼畸型相关转录因子(MITF)及酪氨酸酶(TYR)蛋白表达来抑制黑色素形成。藜麦皂苷可以作为一种具有美白活性的组分在化妆品或药品中应用。     

鸡爪皮胶原多肽对蘑菇酪氨酸酶及B16黑色素瘤细胞的作用

研究分子质量低于3 kDa鸡爪皮胶原多肽对蘑菇蘑菇酪氨酸酶的抑制及对小鼠B16黑色素瘤细胞黑色素合成的影响。以L-多巴为底物,研究胶原肽对蘑菇酪氨酸酶抑制作用及抑制动力学。然后采用B16黑色素瘤细胞验证提取鸡爪皮胶原多肽的安全性及对黑色素合成影响的效果。结果表明,分子质量低于3 kDa的鸡爪皮胶原多肽抑制蘑菇酪氨酸酶的IC50值为0.570 mg/mL,抑制属于非竞争性抑制,米氏常数Km和抑制常数Ki分别为24.68μmol/mL和10.76 mg/mL。鸡爪皮胶原多肽在0²00μg/mL的质量浓度范围内对细胞的增殖活性没有影响,而且能够有效地抑制细胞黑色素的生成。     

海南蒲桃果实原花青素的体外抗氧化活性

以半制备HPLC纯化的海南蒲桃原花青素为供试样品,研究其体外抗氧化活性。结果表明:海南蒲桃原花青素对DPPH自由基的半抑制剂量IC50为4.448μg/mL,超氧阴离子自由基(O-2.)的半抑制剂量IC50为5.718μg/mL,羟自由基(.OH)的半抑制剂量IC50为60.490μg/mL;海南蒲桃原花青素对亚油酸脂质过氧化半抑制剂量IC5 0为117.091μg/mL,总抗氧化、还原力明显高于VC;金属离子螯合力高于EDTA。提示海南蒲桃原花青素具有较强的清除自由基与抗氧化活性等体外活性。     

异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制机理

异鼠李素是沙棘果实和美白类中草药白蒺藜、白鲜皮的主要黄酮类活性成分,具有广泛的药理活性。酪氨酸酶是人体细胞产生黑色素和果蔬褐变的关键酶。本文研究了异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制机理。以L-多巴为底物,测定异鼠李素对酪氨酸酶二酚酶活性的IC50、抑制类型和抑制常数。抑制类型由Lineweaver-Burk双倒数作图法来判断,并计算相应的抑制常数(KI和KIS)。实验结果显示,异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力抑制效果显著,IC50为25μmol/L,是混合型可逆抑制,抑制常数KI为20.1μmol/L,KIS为108.6 mol/L。总之,异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力有很好的抑制作用,是值得进一步研究的美白类候选药物和防止果蔬褐变的食品添加剂。     

青梅花提取物的酪氨酸酶抑制作用及机理研究

目的：以青梅花为原料,探讨其提取物（PF）在体外对酪氨酸酶的抑制作用及机理。方法：首先采用多巴速率氧化法体外测定PF酪氨酸酶的抑制活性,并绘制Lineweaver-Burk曲线,推断其抑制类型。分别采用化学发光法和铁氰化钾还原法测定PF的清除自由基能力及还原力。结果表明：PF能显著抑制酪氨酸酶活性,其半抑制浓度IC50为（98．89±6．34）ug／mL,抑制类型为混合型抑制。PF对酪氨酸酶的抑制作用可能与提取物中绿原酸等多酚物质、较强的自由基清除能力和还原力有关。结论：PF是一种有前途的酪氨酸酶抑制剂,可应用于果蔬等食品的加工和贮藏。     

超声波结合酶法提取葡萄皮渣原花青素工艺优化及其抗氧化活性

以葡萄皮渣为试材,在单因素试验的基础上,通过L9（34）正交试验对超声波结合酶法提取酿酒葡萄皮渣原花青素的工艺条件进行优化,并对其抗氧化性进行研究。最佳工艺参数为纤维素酶（500 000 U/g）添加量0.30%、酶解温度55℃、酶解时间90 min、超声时间30 min、超声功率400 W。在最佳工艺参数下葡萄皮渣中原花青素的得率为14.22 mg/g。体外抗氧化试验结果显示,葡萄皮渣原花青素对DPPH自由基的半抑制质量浓度IC50为0.130 mg/mL,对羟基自由基的半抑制质量浓度IC50为0.228 mg/mL,与维生素C相比,其抗氧化能力更强。     

红酒对酪氨酸酶抑制作用的研究

通过研究红酒对酪氨酸酶的抑制作用,发现红酒对该酶具有良好的抑制作用.红酒中的多酚成分是抑制酪氨酸酶的重要活性物质,对酪氨陵酶的半抑制浓度(IC50)为0.14mg/L～0.18mg/L,抑制动力学类型为非竞争型.同时,通过测量红酒面膜原液中多酚含量及对酪氨酸酶的抑制活性,对市售红酒面膜产品的真伪及功效进行了鉴别和评价.     

对羟基肉桂酸对酪氨酸酶催化反应的抑制机理

本文研究了对羟基肉桂酸(HCA)对酪氨酸酶催化单酚底物L-酪氨酸和催化二酚底物L-多巴的抑制能力,并利用紫外-可见光谱、荧光光谱以及分子对接技术探究了其抑制机理。结果表明对羟基肉桂酸对酪氨酸酶催化单酚底物L-酪氨酸比催化二酚底物L-多巴具有更强的抑制作用,半抑制浓度分别为0.096 mmol/L和0.500 mmol/L;紫外-可见分析发现对羟基肉桂酸能与Cu2+发生螯合,使光谱发生明显红移。进一步通过荧光光谱分析得到,对羟基肉桂酸在酪氨酸酶溶液中并没有出现荧光淬灭反而随着对羟基肉桂酸浓度的增大荧光强度变强,说明对羟基肉桂酸被酪氨酸酶催化氧化成对应的醌类物质。利用分子对接技术揭示了对羟基肉桂酸通过氢键和疏水作用竞争性地占据了单酚和二酚底物的空间位置,并与酪氨酸酶中双核铜离子螯合,从而抑制酪氨酸酶催化L-酪氨酸和L-多巴氧化的活性机理。     

银杏叶提取物对酪氨酸酶活力的抑制作用

酪氨酸酶活性与黑色素的形成有关。用L-酪氨酸作底物,测定了银杏叶提取物对酪氨酸酶的非竞争性抑制作用。其抑制常数（ki)为34mg/ml;银杏叶提取物浓度为0.16mg/ml时,最大抑制率为52.83%,银杏叶提取物有望成为预防和治疗黑色素疾病的药物。     

白藜芦醇对酪氨酸酶体外抑制活性的动力学研究

在30℃,pH 6.8的Na2HPO4-NaH2PO4的缓冲体系中,采用酶促动力学方法,研究了白藜芦醇对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的抑制作用。结果表明,白藜芦醇对酪氨酸酶、单酚酶和二酚酶均有抑制作用,对单酚酶抑制活性的IC50值(抑制率达到50%时的白藜芦醇质量浓度)约为5.1mg/mL,对二酚酶抑制活性的IC50值约为5.6 mg/mL。此外,白藜芦醇可延长单酚酶的迟滞效应,8 mg/mL的白藜芦醇能使迟滞时间从22 s延长至62 s,而对二酚酶则无此迟滞作用。Lineweav-er-Burk图分析表明,白藜芦醇对酪氨酸酶的抑制作用为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为3.4 mg/mL和35.98 mg/mL。     

Inhibitory Mechanism and Kinetics Study of Apple Polyphenols on the Activity of Tyrosinase

Tyrosinase is the key enzyme in the biosynthesis of melanin. In order to investigate the effect of apple polyphenols on tyrosinase activity, the enzyme kinetic method was used. The concentration of apple polyphenols, which caused the tyrosinase activity to be lost by 50%, was 1.0 mg ml^?1 for monophenolase and 0.9 mg ml^?1 for disphenolase. When the concentration of apple polyphenols was 2.0 mg ml^?1, the lag time before reaction of monophenolase was extended from 1.2 to 4.5 min. Inhibition kinetics analysis suggested that apple polyphenols were reversible and mixed inhibitors for tyrosinase with an inhibition equilibrium constant 2.3 mmol l^?1. The results indicated that apple polyphenols were ideal tyrosinase inhibitors and could be used in food and cosmetics.     

大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究

本文对不同浓度的大豆异黄酮提取物对酪氨酸酶活性的抑制率进行了研究。结果表明,大豆异黄酮提取物对酪氨酸酶活性有比较强的抑制作用,并且随着大豆异黄酮提取物浓度的提高,其对酪氨酸酶活性的抑制率也提高。提示大豆异黄酮可通过抑制酪氨酸酶活性减少色斑产生延缓皮肤衰老。     

The effects of areca catechu L extract on anti-inflammation and anti-melanogenesis

Ethanolic extract (CC-516) from Areca catechu L was prepared and its various biological activities were evaluated, CC-516 showed potent anti-oxidative, free radical scavenging, and anti-hyaluronidase activity. Anti-oxidative effect of CC-516 (IC _ 50: 45.4 mug/ml) was lower than butylated hydroxytoluene (IC _ 50: 5mug ml), but similar to tocopherol and higher than ascorbic acid. Especially, CC-516 exhibited relatively high free radical scavenging activity (IC _ 50: 10.2 mug/ml) compared to control. CC-516 inhibited effectively hyaluronidase activity (IC _ 50: 416 mug/ml), showed inhibition in vivo on delayed hypersensitivity as well as croton-oil induced ear edema in mice when it was topically applied. These results strongly suggest that CC-516 may reduce immunoregulatory/inflammatory skin trouble. Also, from the results, we have elucidated that CC-516 showed anti-allergic and anti-cytotoxicity activity. The whitening effect of CC-516 shown by the inhibition of mushroom tyrosinase activity with IC _ 50 of 0.48 mg/ml and of melanin synthesis in B16 melanoma cells. This study indicates that CC-516 is effective on anti-inflammatory/anti-melanogenesis, and can be used as a new agent for cosmetics.     

Tyrosinase inhibitory components of immature calamondin peel

There is broad range of applications in the use of tyrosinase inhibitors for suppressing unwanted hyperpigmentation in human skin and enzymic browning in fruits. In searching effective tyrosinase inhibitors from natural products, the components in unripe calamondin (Citrus mitis Blanco) peel were investigated by performing bioassay-directed fractionation and chromatographic separation coupled with tyrosinase inhibition assay. Herein it is reported for the first time that (1) there is a rich content of 3',5'-di-C-β-glucopyranosylphloretin in unripe calamondin peel, 3.69±0.44g/100g dry basis, (2) this C-glycosylated flavonoid showed the strongest inhibitory activity against tyrosinase among the components in this fruit, with an IC(50) of 0.87mg/ml, and (3) that unripe calamondin peel is also a rich source of naringin and hesperidin, 1.25% and 0.73% by dry weight, respectively, which also expressed strong tyrosinase inhibitory property.     

木耳黑色素碱法提取工艺优化及表征

采用正交试验优化碳酸钠提取木耳黑色素的工艺,并对黑色素的稳定性和结构进行分析。结果表明,单因素及正交试验确定最优工艺条件为:超声功率160 W(5 g固体物料)、料液比1∶30(g/mL)、碳酸钠浓度2.00 mol/L、提取时间50 min。在此工艺条件下获得木耳黑色素粗提物的产量为9.078 g/100 g。化学表征证明,木耳黑色素对温度、低浓度氧化剂和还原剂有较强的稳定性,但对光的稳定性较差;木耳黑色素在波长210 nm处有最大吸收峰。红外结果显示,木耳黑色素由羟基、氨基、C=O、C=C、CH、CH_2以及芳环基团组成。木耳黑色素的S∶N=0.01,表明木耳黑色素为真黑色素,预示其具有乌发、抗衰老等作用。