辣木叶酶法水解提取蛋白质工艺优化

为了优化纤维素酶与果胶酶水解提取辣木叶中蛋白质的提取工艺,以提取率为考察指标,运用单因素与正交试验研究了酶解温度、加酶量、pH、底物质量浓度与酶解时间5 个因素对辣木叶蛋白质提取率的影响.结果表明:纤维素酶各因素对辣木叶蛋白质提取率影响的主次顺序为:酶解温度＞底物质量浓度＞pH＞酶解时间＞加酶量,最佳工艺条件为:酶解温...     

辣木叶渣中非水溶性蛋白及酶解效果研究

以碱提蛋白后的辣木叶渣为原料,选择酶种类、酶用量、酶解温度、时间为自变量,利用响应面分析法建立蛋白提取率二次回归模型,并采用SDS-PAGE分析酶解后总蛋白电泳图谱的变化。结果表明,酶解后辣木叶渣蛋白仍有(34.92±1.42)mg/g的残留蛋白,其中酶解条件为碱性蛋白酶添加量1.8%,酶解温度为55℃,酶解时间70 min,电泳图谱显示谷蛋白、醇溶蛋白为25 KD~100 KD高分子亚基,叶渣中非水溶蛋白为酶解后形成的15 KD以下小分子蛋白,疏水作用和二硫键是导致溶解性降低的主要原因。     

葫芦巴多糖酸解和酶解产物抗氧化及抗菌活性的比较研究

本实验在成功研究葫芦巴多糖的酸解和酶解的基础上比较研究了葫芦巴多糖不同分子量的酸解和酶解产物的抗氧化活性以及对几种植物病原菌的抑菌作用。结果表明:酸解和酶解产物均具有一定的体外清除超氧阴离子(O2·)和羟自由基(·OH)的能力。接种淋巴癌细胞(S180)的小鼠实验结果显示,酸解和酶解产物均能抑制小鼠肝、肾等内脏器官超氧化物歧化酶(SOD)活性下降,减少脏器中膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)生成量。两种水解产物对4种植物病原菌即葡萄灰酶、蚕豆褐班、棉红腐、茄子菌核均具有较为明显的抑制作用,并呈现明显的量效关系。比较而言,葫芦巴多糖的酶解产物的抗氧化活性以及抗菌作用强于酸解产物。     

辣木叶水溶性蛋白的超声-微波萃取及其性质研究

研究辣木叶中可溶性蛋白的提取工艺及其性质。采用超声-微波协同萃取方法提取辣木叶中可溶性蛋白,在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken中心组合实验确定最佳工艺参数,并对蛋白质氨基酸组成进行分析。实验结果表明:当料液比1∶160(g/m L),微波功率40 W,提取时间127 s,p H11,在此工艺条件下,辣木叶蛋白得率为40.11 mg/g。氨基酸分析表明,辣木叶可溶性蛋白中必需氨基酸含量为280.7 mg/g,含硫氨基酸含量较高,苏氨酸为第一限制性氨基酸。差示扫描量热仪(DSC)分析表明辣木叶可溶性蛋白的变性温度为113.7℃。     

辣木叶水溶性蛋白的超声-微波萃取及其性质研究

研究辣木叶中可溶性蛋白的提取工艺及其性质。采用超声-微波协同萃取方法提取辣木叶中可溶性蛋白,在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken中心组合实验确定最佳工艺参数,并对蛋白质氨基酸组成进行分析。实验结果表明:当料液比1∶160（g/m L）,微波功率40 W,提取时间127 s,p H11,在此工艺条件下,辣木叶蛋白得率为40.11 mg/g。氨基酸分析表明,辣木叶可溶性蛋白中必需氨基酸含量为280.7 mg/g,含硫氨基酸含量较高,苏氨酸为第一限制性氨基酸。差示扫描量热仪（DSC）分析表明辣木叶可溶性蛋白的变性温度为113.7℃。      

紫贻贝酶解产物抗菌活性及其工艺优化研究

以果蔬病原菌Botryiscinerea为供试菌,采用微孔板培养法,测定了胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶和菠萝蛋白酶酶解产物对Botryiscinerea的抗菌活性,并采用正交试验对胰蛋白酶的酶解条件进行了优化。结果表明,胰蛋白酶酶解产物抑菌活性最强,其抑菌率分别比胃蛋白酶、风味蛋白酶和菠萝蛋白酶酶解产物高38.4%、19.5%和18.2%(P<0.01);胰蛋白酶获取最佳抑菌酶解产物的条件为:55℃、pH8.5、加酶量300U/g、酶解时间2h、料水比1∶1。     

基于谱效关系的辣木叶降糖活性物质研究

辣木叶作为一种新资源食品,其降糖活性备受关注,然而其中的主要活性物质尚缺乏深入研究.指纹图谱能够区分药材中化学物质的含量差异,谱效关系的研究能够初步预测其中活性成分群.本文通过肝癌细胞(HepG2)的胰岛素抵抗模型评价辣木叶的降糖活性,结合指纹图谱进行谱效相关分析,定位辣木叶中具有降糖作用的主要活性成分.对正交试验得到...     

罗非鱼鳞明胶的制备及其酶解产物活性研究

以罗非鱼鱼鳞为原料,通过热水提取鱼鳞中的明胶,利用多种蛋白酶对明胶进行酶解,测定其不同酶解产物的抗氧化性、血管紧张素I转换酶(ACE)抑制活性、α-葡萄糖苷酶(AG)抑制活性等生物活性。实验结果表明:100℃热水或120℃热水提取明胶1.5h的得率分别为20.2%和37.9%。6种蛋白酶(木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶)水解明胶后,胰蛋白酶水解液和碱性蛋白酶水解液的羟自由基清除力为76.7%和76%,高于Vc的65.6%;除中性蛋白酶对DPPH自由基没有清除力以外,其余5种蛋白酶均对DPPH自由基有清除力,但是低于Vc;胃蛋白酶水解液对α-葡萄糖苷酶的活性抑制作用最强,为67.1%,而中性蛋白酶、碱性蛋白酶和胰蛋白酶水解液对α-葡萄糖苷酶没有抑制作用。6种蛋白酶的水解产物均有的ACE抑制活性,没有抗凝血活性。     

辣木叶乙醇提取物的抗氧化活性研究

确定辣木叶中总抗氧化物质的最佳提取条件,并评价其体外抗氧化活性。在单因素试验结果的基础上,以DPPH自由基清除率为评价指标,通过采用正交试验研究乙醇体积分数、提取温度、料液比和提取时间4个因素对辣木叶抗氧化物质抗氧化活性的影响。结果表明:最佳提取条件为提取温度为90℃、料液比为1:30、乙醇体积分数为60%、提取时间为1.5 h,在此条件下,辣木叶中多酚含量为69.36±0.58 mg/g,黄酮含量为53.72±0.48 mg/g,DPPH自由基清除率为57.83±0.14%。辣木叶抗氧化物质粗提物对DPPH、ABTS和·OH自由基具有具有较好的清除效果,还原能力较弱,其EC50值分别为86、31和140μg/m L,对DPPH、ABTS和·OH自由基清除率分别达到相同质量浓度BHT的98.26%、99.04%和96.63%,并与辣木叶粗提物质量浓度存在一定的量效关系。     

蜂王浆水溶性蛋白及其酶解产物的抗氧化活性

本研究分别采用清除二苯基-2- 苦肼自由基(DPPH·),抑制亚油酸氧化和总抗氧化能力测定等方法,探讨蜂王浆水溶性蛋白及其酶解产物的抗氧化特性。结果表明,蜂王浆水溶性蛋白(WSPs)本身的抗氧化活性很弱,但酶解后抗氧化活性增强,其中胃蛋白酶和胰蛋白酶共同酶解产物(PT-WSPs)的抗氧化活性最强。对WSPs 及其酶解产物进行膜分离后发现,分子量小于3kD,尤其是小于1kD 的肽类物质其清除DPPH·、抑制亚油酸氧化及总抗氧化能力最强。     

辣木叶提取物的制备及抗氧化活性

采用16 种提取方法制备辣木叶提取物,考察不同提取方法对辣木叶蛋白、糖类、多酚类物质提取率和抗氧化剂溶出率的影响。采用乙酸乙酯萃取辣木叶提取物,研究水相中蛋白（水解蛋白）、糖类和乙酸乙酯相中多酚类物质相互作用对辣木叶提取物抗氧化活性的影响。结果表明：采用酶法以及酶法耦合乙醇提取法可以制备蛋白（水解蛋白）、糖类和多酚类物质含量高且抗氧化活性强的辣木叶提取物。采用Ns37071蛋白酶、胰酶时,所得辣木叶提取物蛋白、糖类、多酚类物质提取率最高,抗氧化活性最强。蛋白（水解蛋白）和糖类物质对辣木叶提取物抗氧化活性的贡献大于多酚类物质,是辣木叶提取物发挥抗氧化活性的重要物质基础。此外,辣木叶提取物中蛋白（水解蛋白）、糖类、多酚类物质存在协同增效或拮抗作用。     

蛋白质酶解产物苦味的形成及脱除的研究进展

蛋白质酶解物苦味的苦味是长期困扰其应用的问题，本文对苦味肽的产生、化学组成及脱除苦味的方法进行了综述。     

辣木叶多糖的分离纯化及其体外降糖活性研究

目的研究辣木叶多糖的制备、单糖组成以及体外降糖活性。方法采用水提醇沉、Sevage法、大孔树脂-阴阳离子交换树脂联用技术得到较高纯度辣木叶粗多糖,再进一步通过二乙氨基乙基纤维素和葡聚糖凝胶柱层析分离得到2个主要多糖组分(MOs-2-a、MOs-2-b),并通过水解衍生化对其单糖组成进行分析。此外,采用HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,以细胞葡萄糖消耗量为指标,考察辣木叶多糖的降糖作用。结果本文采用的制备工艺可以得到较高纯度的辣木叶粗多糖(纯度为73.10%),辣木叶多糖主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖及半乳糖组成,其中各单糖摩尔比为0.49:3.65:0.63:1.27。与模型组相比,辣木叶多糖组分MOs-2-a、MOs-2-b均能显著增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量(P0.05)。结论辣木叶多糖MOs-2-a、MOs-2-b具有良好的降糖效果,本文可以为辣木叶多糖作为功能食品发展的提供科学依据。     

辣木叶多糖的提取及抗氧化活性研究

为提取辣木叶多糖并研究其体外抗氧化活性,利用水提醇沉法获得辣木叶粗多糖,以单因素提取试验为基础,采用正交试验对辣木叶多糖的分离提取工艺进行优化,并探讨6个产地辣木叶粗多糖体外抗氧化活性。研究表明,辣木叶粗多糖的最佳提取工艺:液料比20∶1(mL/g),提取温度为70℃,提取时间为1.5 h,在此工艺条件下多糖的得率为11.48%。6个产地辣木叶粗多糖以普洱市辣木叶多糖的体外抗氧化活性最佳。     

辣木叶抗氧化活性研究及活性成分含量测定

目的:确定辣木叶抗氧化有效部位,建立HPLC测定辣木叶中新绿原酸和异槲皮苷含量的方法。方法:采用体外方法评价辣木叶提取物四个部位石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、总奎宁酸和总黄酮的抗氧化活性;采用HPLC,选择Sepax Sapphire C₁8（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长330 nm,柱温30℃。结果:以异槲皮苷为代表的黄酮类成分和新绿原酸等奎宁酸类成分清除能力最强,二者浓度大于800μg/m L时,对DPPH清除率达80%以上,且对DPPH和羟自由基清除率均高于石油醚和乙酸乙酯萃取物;新绿原酸和异槲皮苷在检测范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.84%、98.70%,RSD均小于3.0%。结论:辣木叶抗氧化有效部位为总奎宁酸和总黄酮;该方法简便可靠,可作为辣木叶中新绿原酸和异槲皮苷的定量分析方法。      

辣木叶总黄酮的提取及其降血糖作用

采用乙醇回流法从辣木叶中提取黄酮类化合物,经AB-8型大孔吸附树脂柱纯化获得辣木叶总黄酮（TFM）;以四氧嘧啶糖尿病小鼠为动物模型,以中成药消渴丸为对照,进行TFM的降血糖动物试验研究。结果表明TFM能明显降低糖尿病模型小鼠的血糖,同时能提高血清SOD活力,降低血清MDA含量,但TFM对正常小鼠的血糖水平无影响。     

太平洋鳕鱼排酶解产物的制备及其钙螯合活性研究

目的以太平洋鳕鱼排为原料,制备具有良好钙螯合活性的酶解产物,并对其促钙吸收转运功效进行评价。方法采用动物蛋白水解酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶分别进行水解,比较3种酶解产物的水解度与蛋白回收率,确定最佳水解酶,并研究酶解产物的钙螯合活性与促钙吸收转运活性。结果经动物蛋白水解酶制备的酶解产物水解度与蛋白回收率最高。当酶解时间为320 min时,该酶解产物的钙螯合活性最高。氨基酸分析表明谷氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、丝氨酸和苏氨酸等特定氨基酸所占比例较高。该酶解产物对Caco-2细胞无毒性作用,能够明显促进钙转运率。结论太平洋鳕鱼排酶解产物具有较好的钙螯合活性与促钙转运活性。     

鲶鱼骨酶解产物抑菌活性的酶解工艺优化

试验以鲶鱼头、鱼骨为原料,通过先匀浆后高压、先高压后匀浆、直接匀浆3种不同的预处理方法.以蛋白质含量为指标,选出一种最优的预处理方法.利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶5种酶分别在各自最适条件下对其进行水解,采用正交试验设计,以大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄色葡萄球菌为供试菌种,以抑菌性为测定指标确定酶解的最佳用酶以及酶解的工艺条件.试验结果表明:对鲶鱼头、鱼骨先高压后匀浆的预处理方法得到的蛋白质含量最高;胃蛋白酶为酶解鲶鱼骨的最佳用酶;胃蛋白酶的最佳酶解工艺条件为:底物浓度为1:4,酶添加量为2000U/g,酶解时间2.5 h,酶解温度37℃,最适pH值7.0.     

辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制研究

探讨辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用,为开发辣木叶天然胰脂肪酶抑制剂提供理论依据。在单因素试验的基础上,用正交试验优化提取条件,研究辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制作用,并结合Dixon图和LineweaverBurk图探讨其抑制类型。结果表明最佳提取条件为:料液比1∶50(g/mL)、提取液乙醇浓度70%、超声功率400 W、超声处理时间600 s、提取温度50℃;该条件下辣木叶粗提物对胰脂肪酶活力的抑制率为79.15%;辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制。辣木叶提取物对胰脂肪酶的活性有明显抑制作用。     

辣木叶总黄酮乙醇提取工艺的研究

对辣木叶中总黄酮的乙醇提取工艺进行了研究。探讨乙醇浓度、浸提温度、料液比、浸提时间、浸提次数对辣木叶中总黄酮提取效果的影响，在单因素试验的基础上,通过正交试验确定最佳提取工艺条件。结果表明：辣木叶中总黄酮类物质的最佳提取条件为70％的乙醇溶液作提取剂，提取温度60℃，料液比1：20，提取3次，每次1h，在此条件下，提取液中的总黄酮含量达到3．95％。