红毛藻R-藻红蛋白的高效制备以及抗体标记与检测

采用硫酸铵盐析和DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析相结合,从红毛藻（Bangia fusco-purpurea）中分离纯化到纯度系数（A565/A280）大于6.0的R-藻红蛋白。SDS-PAGE结果显示,其亚基分子量分别为19、21ku。用适宜摩尔浓度的异型双功能交联剂N-琥珀酰亚氨基-3-2-吡啶基二硫丙酸醇（SPDP）将纯化的R-藻红蛋白与羊抗小鼠IgG抗体交联,利用SDS-PAGE和荧光检测鉴定R-藻红蛋白与抗体的交联效果。结果显示:R-藻红蛋白能与羊抗小鼠IgG成功交联。分别采用Dotblot和Westernblot对R-藻红蛋白标记的抗体作为二次抗体,小鼠抗鲢鱼主要过敏原小清蛋白单克隆抗体为一次抗体;对鱼类小清蛋白进行免疫检测,结果显示:R-藻红蛋白标记的抗体能检测相关抗原的存在,且有良好的特异性。利用藻红蛋白荧光探针可缩短免疫杂交的检测时间,简化操作过程。      

大豆蛋白及其制品的研究

论述了大豆蛋白及其制品的最新研究成果。包括大豆蛋白结构、大豆蛋白凝胶机理、大豆蛋白新产品开发、改性大豆蛋白等．     

鱼糜及鱼糜制品中水分研究进展

随着鱼糜加工业的发展,消费者对鱼糜及鱼糜制品的质量要求也越来越高。水分是鱼糜及鱼糜制品中含量最高的营养素,水分含量的高低及其存在状态直接影响鱼糜及鱼糜制品的品质。鱼糜及鱼糜制品中的水分存在状态包括自由水、结合水和不易流动水;影响因素有加工方式和不同添加物,包括漂洗方式、加热方式、超高压、超声法以及淀粉、谷氨酰胺转氨酶、茶多酚、大豆分离蛋白、磷酸盐、谷朊粉;测定方法有常压干燥法、持水力、低场核磁等。本文综述了鱼糜及鱼糜制品中的水分含量及水分存在状态、影响因素及其测定方法,旨在为鱼糜及鱼糜制品品质的控制提供参考。     

添加亲水胶体制备低强度的鱼糜制品及其特性的研究

添加瓜尔豆胶、大豆蛋白、蛋清蛋白等亲水胶体制备低强度鱼糜制品,通过正交实验筛选最佳配比。结果表明:最佳配比为0.3%瓜尔豆胶、0.5%大豆蛋白、1.0%蛋清蛋白。在该条件下制备的鱼糜制品,其凝胶强度从155.17 g·cm降至125.19 g·cm,硬度从14.20 N降至9.61 N,咀嚼性从82.79 m J降至60.86 m J,蒸煮吸水率从3.85%提高至15.40%。SDS-PAGE和微观组织结构的结果表明亲水胶体会阻碍鱼糜肌球蛋白重链和肌动蛋白之间的相互交联,结果形成疏松多孔的低强度鱼糜制品。      

冰温和冷藏对气调包装鱼糜制品品质的影响

为研究冰温冷藏温度对气调包装鱼糜制品（鱼丸）品质的影响,分别以-2℃冰温、0、3℃冷藏气调包装鱼丸,测定了鱼丸的菌落总数、TVB-N值、pH、感官和质构等品质的变化。结果表明:在-2℃冰温条件下,气调包装鱼丸的细菌受到更好地抑制,其TVB-N值、pH、感官、质构等品质指标均优于0、3℃冷藏下的鱼丸。-2℃冰温、0、3℃冷藏对鱼丸品质的保鲜效果优劣依次为-2℃>0℃>3℃,对应货架期分别为35、21、14d。-2℃的冰温结合气调包装对鱼丸有较好的保鲜效果;与3℃的冷藏条件相比,冰温能够更好地维持气调包装鱼丸的品质,从而延长其货架期。      

竞争性ELISA检测鱼糜制品中蛋清含量

通过纯化蛋清中主要成分卵清蛋白(ovalbumin,OVA),制备抗OVA多克隆抗体,利用制备的抗体建立鱼糜制品中蛋清定量检测的竞争性酶联免疫吸附测定方法(competitive enzyme linked-immunosorbent assay,c-ELISA)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳和Western blot结果显示,制备的抗OVA多克隆抗体特异性良好。以热处理的OVA为竞争抗原建立的c-ELISA法检测限为1.82 mg/kg,组内变异系数为3.1%,组间变异系数为7.8%,回收率为87.4%~97.2%,表明建立的方法重复性好,准确性较高。利用建立的方法对6种商品化的鱼糜制品进行检测,发现其蛋清的添加量在2.7~83.5 g/kg之间。本研究为今后鱼糜制品中蛋清含量规范标识的监管提供了重要的技术支持。     

复合亲水胶体对带鱼鱼糜制品凝胶特性的影响

本文研究了六种亲水性胶体对带鱼鱼糜制品凝胶特性的影响,以凝胶特性、持水力和白度等为指标,结合扫描电镜观察微观结构,应用响应面法开发鱼糜制品复合型凝胶增强剂。结果表明:在带鱼鱼糜中加入褐藻胶、魔芋胶、沙蒿子胶、卡拉胶、热凝胶多糖均可提高带鱼鱼糜的凝胶强度,加入瓜尔豆胶降低带鱼鱼糜制品凝胶强度。响应面分析得到添加0.1%热凝胶多糖、0.19%魔芋胶、0.1%沙蒿子胶的带鱼鱼糜凝胶制品能够形成均匀、致密的三维网状结构,其凝胶强度是不添加亲水性胶体的3.58倍。      

冷冻鱼糜及制品中磷酸盐测定的研究

研究冷冻鱼糜及制品中磷酸盐含量的测定方法.采用分光光度计,确定了测定体系的特征吸收波长和显色条件,并建立标准曲线与回归方程.磷酸盐测定体系的特征吸收波长为825 nm,吸光度与磷酸盐含量间的回归方程为y=0.006x-0.005,在0.8 μg～100μ.g范围内具有良好的线性关系(R2=0.999),对于不同的样品其...     

鱼糜蛋白制品及其加工技术

鱼糜是将原料鱼经加工处理得到的一种中间蛋白质制品,营养价值高,价格低廉,具有较高的开发应用潜力.鱼糜富含蛋白质(约17％),在加工过程中受加工条件,如压力、温度、剪切力、超声波、微波等的影响,会使鱼糜蛋白的结构及凝胶特性等发生改变,进而制得各式各样的鱼糜制品,如鱼糕、鱼丸、鱼肠、鱼面、鱼豆腐和仿生制品等.其中仿生制品(...     

鱼糜制品中主料含量的实时荧光定量PCR法测定

应用实时荧光定量PCR技术对鱼糜制品中主料成分进行了鉴定分析。该方法通过一个外源基因和内参校正基因对鱼糜制品标准品建立标准曲线,利用标准曲线计算出主料成分的质量百分比。方法线性程度良好(R2>0.985),回收率符合方法学要求,从而证明了此方法在实验室条件下的可行性。     

双抗体夹心酶联免疫吸附法检测鱼糜制品中鸡蛋卵白蛋白

目的 建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay, sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin, OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法 确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果 反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记兔抗OVA抗体为检测抗体, 1:5000 (V:V)稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5～200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%～4.58%和6.06%～12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%～130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,...     

淡水鱼鱼糜制品加工特性及品质影响因素

文章从加工特性和机理、加工影响因素、脱腥方法三方面进行综述,总结了淡水鱼鱼糜及其制品的加工利用现状,指出了淡水鱼鱼糜加工利用中基础研究、运输条件、生产设备等不足之处。     

Monoclonal antibody-based enzyme immunoassay for detection of porcine plasma in fish surimi

Detection of porcine plasma using indirect ELISA was developed using mAb B4E1 for the prevention of their usage in human food that creates religious and health conflicts. The immunoassay has a CV < 20% and did not cross-react to other meat and non-meat proteins. The sensitivity of the assay is 0.25% (w/w) of porcine plasma in spiked raw and cooked fish surimi. The assay did not produce a false positive result for any of the commercial fish surimi tested that were not contain porcine plasma. Determination of a 60-kDa antigenic protein of porcine blood using Western blot confirmed its presence in the plasma fraction of the porcine blood. Further proteomic analysis involving liquid chromatography–tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) revealed the 60-kDa protein to be porcine serum albumin.     

传统大豆制品及大豆蛋白中嘌呤含量的探讨

大豆蛋白富含8种人体必需氨基酸,具有动物蛋白不可比拟的功能特性。但是大豆作为高蛋白的植物性食品嘌呤含量较高,制约着大豆制品的应用。对嘌呤与痛风的关系,食品中嘌呤的检测方法,嘌呤与蛋白质的关系,传统大豆制品及大豆蛋白中的嘌呤含量及其控制等,特别是经过深加工处理的大豆分离蛋白和大豆浓缩蛋白的低嘌呤工艺进行了讨论。展望了大豆深加工制品如大豆分离蛋白和酸法大豆浓缩蛋白可为痛风病人提供低嘌呤、高蛋白食品的发展方向。     

冷冻鱼糜及鱼糜制品生产工艺技术

介绍了冷冻鱼糜生产工艺流程,重点阐述冷冻鱼糜的采肉、漂洗、脱水、添加冷冻变性防止剂等工艺要点。同时,介绍了以冷冻鱼糜为原料生产鱼糜制品的工艺流程,着重阐述了擂溃和凝胶化等工艺要点。     

Analysis of protein denaturation,and chemical visualisation,of frozen grass carp surimi containing soluble soybean polysaccharides

The mechanism of protein denaturation of frozen surimi enriched with soluble soybean polysaccharides (SSPS) was investigated. Near-infrared (NIR) and hyperspectral imaging (HSI) technology were used to predict protein denaturation. The fresh grass carp surimi was divided into four groups with SSPS additions of 0%, 1%, 3% and 5%, respectively, which were frozen and stored at −18 °C. Samples were examined after 0, 1, 2, 4 and 8 weeks, for salt-soluble protein content, total SH, NIR hyperspectral image and Raman spectrum features. The results showed that addition of SSPS decelerated protein degradation. After 8 weeks of storage, the 5% SSPS addition maintained the highest salt-soluble protein content, while for total SH, 3% and 5% SSPS addition had similar effect. Raman spectra illustrated that SSPS had the ability of maintaining an α-helix content, as well as decreasing the exposure of polar groups, and reducing the oxidation of SH group into disulphide bonds. NIR spectra showed that the overall reflectance of frozen surimi increased with the increase in SSPS. Two partial least squares regression (PLSR) models were established after pretreatment of HSI spectral statistics and selection of characteristic wavelengths. The distribution maps were finally generated based on the simplified PLSR models.     

豆制品废水综合利用现状

该文对豆制品废水中所含成分、前处理方法以及综合利用方法进行了阐述。豆制品废水通过多级冷冻浓缩进行预处理,可提高绝大部分功能性成分的保留效率。采用膜分离和絮凝等技术可以从豆制品废水中分离大豆乳清蛋白、大豆低聚糖和大豆异黄酮等产物。向豆制品废水中加入微生物所需的营养物质再灭菌后可制成微生物培养液,用于培养微生物以获得菌体或副产物。对以豆制品废水为原料进行食品生产进行了展望。     

市售鱼糜制品微生物菌相的初步分析

以四种不同的市售鱼糜制品(鱼丸、鱼豆腐、模拟蟹棒、鱼肠)为研究对象,应用选择性培养基,分析鱼糜制品在4℃冷藏条件下贮藏最初状态和腐败状态下的菌相组成。新鲜鱼糜制品中主要存在微球菌/葡萄球菌属、乳酸菌属和假单胞菌属;腐败状态下的鱼糜制品除上述菌种外,还有大量肠杆菌属及少量含硫化氢菌属。结果表明:微球菌/葡萄球菌属、乳酸菌属、假单胞菌属及肠杆菌属是引起鱼糜制品在4℃冷藏条件下发生腐败变质的主要腐败菌。      

酚酞单克隆抗体的制备

目的 建立免疫学快速检测减肥类保健食品中非法添加的酚酞, 制备酚酞单克隆抗体并进行评价。方法 利用碳二亚胺(carbodiimide, EDC)法合成免疫原和包被原, 用免疫原免疫Balb/C小鼠, 取小鼠脾脏与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合。采用竞争结合双阳性两步筛选法, 筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞, 利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞; 采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化, 利用酶联免疫吸附法鉴定纯化后的抗体。结果 成功合成了酚酞-BSA免疫原和酚酞-OVA包被原, 筛选获得酚酞杂交瘤细胞株FT/BSA/2019, 单克隆抗体的效价1×105。结论 本研究初步建立了特异性高的酚酞单克隆抗体的制备方法。     

鱼糜制品热凝胶形成机理研究进展

凝胶特性是鱼糜制品的重要功能特性之一,是形成鱼糜制品独特的质构和感官的决定性因素。热凝胶是鱼糜凝胶化的主要途径之一,简单易行,被广泛采用。鱼糜热凝胶机理与鱼种、生长环境和热凝胶过程中的条件等有着密切的关系。本文从鱼糜的主要成分肌球蛋白和肌动球蛋白、化学作用力及外源添加物等角度对现已有的鱼糜热凝胶形成的主要作用机制进行归类综述,以期为鱼糜制品的研究与开发提供参考。