板栗果实过氧化物酶与多酚氧化酶特性的研究

针对板栗加工过程中的褐变问题,研究了沸水浴,PH值,缓冲液,维生素C、二硫苏糖醇等不同处理对板栗果实过氧化物酶和多酚氧化酶活性的影响。     

大豆多酚氧化酶、过氧化物酶的酶学特性研究

对大豆氧化还原酶系中的多酚氧化酶和过氧化物酶的酶学特性进行了较深入系统地研究,其中包括酶活力、酶热稳定性、pH值的影响,以及大豆卵磷脂、二巯基丙醇对酶活力的抑制作用.结果表明多酚氧化酶在120℃时,酶活力值已达到不可逆失活状态,pH6～7时酶活力最大,当二巯基丙醇的浓度为1.5mmol/L时其酶活力降至6%以下.过氧化物酶具有较高的耐热性,酶活力最适的pH值为5.5左右,大豆卵磷脂浓度达到80mg/L时其酶活力可降至20%左右.     

莴笋多酚氧化酶、过氧化物酶的特性及抑制作用研究

采用分光光度法测定莴笋多酚氧化酶（PPO）和过氧化物酶（POD）的活性,研究酶的稳定性、温度、p H、底物浓度及几种抑制剂对其活性的影响,建立相应酶促动力学方程,利用正交实验探讨最佳抑制条件。结果表明,PPO和POD最适温度分别为50℃和40℃,最适p H分别为6.0和6.5,随温度不断升高,PPO和POD活性逐渐下降。动力学方程分别为V=342.566[S]/（5.9×10-3+[S]）和V=3403.008[S]/（6.88×10-4+[S]）。对PPO抑制强弱为:VC>L-Cys>Na HSO3>柠檬酸>EDTA>苯甲酸>琥珀酸,对POD抑制强弱为:EDTA>VC>L-Cys>柠檬酸>Na HSO3>琥珀酸>苯甲酸。正交实验表明,对PPO最佳抑制条件为:Na HSO39mmol/L、L-Cys 5mmol/L及VC5mmol/L。对POD最佳抑制条件为:VC0.2mmol/L、EDTA 0.2mmol/L及L-Cys 1.4mmol/L。      

超高压对马铃薯多酚氧化酶和过氧化物酶的钝化研究

研究了超高压对马铃薯多酚氧化酶和过氧化物酶的影响。结果表明:超高压处理后的多酚氧化酶,过氧化物酶活力低于对照试样的活力,超高压对酶活有影响;保压时间30 min,100～200 MPa压力范围内,多酚氧化酶和过氧化物酶被激活,压力超过200 MPa时酶的活性下降;压力为400 MPa,随着时间的延长,多酚氧化酶和过氧化物酶活性都呈下降趋势;400 MPa,10 min条件下,pH在5.5～6.0之间时酶的活性最大;超高压对马铃薯多酚氧化酶钝化的最佳方案:pH 6.0,保压时间40 min,压力400 MPa,过氧化物酶钝化的最佳方案:pH 8.0,保压时间40 min,压力为400 MPa。     

龙眼果肉中多酚氧化酶和过氧化物酶性质研究

测定了10个不同品种龙眼果肉中的多酚氧化酶活性.结果表明:华路广眼的多酚氧化酶活力最强,为25440U/(g·min),而罗伞木最弱,为9120U/(g·min).以石硖为试材,对其多酚氧化酶的性质进行研究时发现:龙眼多酚氧化酶酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数Km=0.64mol/L,Vmax=0.12U/min;且底物过量时,多酚氧化酶活性随其加入量的增大而迅速增大,但底物逐渐饱和时其活性增加减缓直至饱和值.在灭酶条件研究中发现:多酚氧化酶粗酶液在100℃水浴中处理1min即完全失活;而果浆中的多酚氧化酶在100℃水浴中处理5min才能完全失活.实验还测得石硖中过氧化物酶活力为4440 U/(g·min),且其果浆中过氧化物酶在100℃水浴中处理7min完全失活.     

龙眼果肉中多酚氧化酶和过氧化物酶性质研究

测定了10个不同品种龙眼果肉中的多酚氧化酶活性。结果表明:华路广眼的多酚氧化酶活力最强,为25440U/(g.min),而罗伞木最弱,为9120U/(g.min)。以石硖为试材,对其多酚氧化酶的性质进行研究时发现:龙眼多酚氧化酶酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数Km=0.64mol/L,Vmax=0.12U/min;且底物过量时,多酚氧化酶活性随其加入量的增大而迅速增大,但底物逐渐饱和时其活性增加减缓直至饱和值。在灭酶条件研究中发现:多酚氧化酶粗酶液在100℃水浴中处理1min即完全失活;而果浆中的多酚氧化酶在100℃水浴中处理5min才能完全失活。实验还测得石硖中过氧化物酶活力为4440U/(g.min),且其果浆中过氧化物酶在100℃水浴中处理7min完全失活。      

滁菊多酚氧化酶和过氧化物酶热钝化动力学研究

为深入研究热处理对滁菊中酶的钝化效果,以滁菊多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)和过氧化物酶(peroxidase,POD)为研究对象,探讨热处理过程中滁菊PPO和POD的热稳定性和热钝化动力学.结果表明:滁菊PPO的最适反应温度为30℃,滁菊POD的最适反应温度为45℃,随着热处理时间的延长,滁...     

介质特性对超声波钝化芒果多酚氧化酶和过氧化物酶的影响

基于超声波对芒果汁中多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)钝化效果显著低于对芒果粗酶液钝化效果的现象,通过调整粗酶液中糖分、蛋白质含量、介质黏度和pH值,探讨影响超声波钝酶效果的可能因素。采用的超声波处理条件为45℃,799.31 W/cm2,15 min。结果表明,超声波对糖度为5.0~20 Brix的粗酶液中PPO和POD钝化率比糖度为4.4 Brix的粗酶液分别降低了20.67%~29.36%和40.34%~46.22%(P<0.05);超声波对蛋白质添加量为0.5%~2.5%粗酶液中PPO和POD的钝化率比未添加组分别降低了24.55%~30.9%和42.36%~47.19%(P<0.05)。采用添加不同增稠剂来调整粗酶液的黏度,结果发现超声波对黏度为17.6~27.1 mPa·s的粗酶液中PPO和POD的钝化率比未调整组(黏度15.2 mPa·s)分别降低了27%和30%(P<0.05),而不同增稠剂对超声波钝酶效果的影响差异不显著(P>0.05)。通过添加柠檬酸来调整粗酶液的pH,发现超声波对pH 4.0和pH 5.0的粗酶液中PPO和POD的钝化率比未调整组(pH 5.2)降低了22.73%~27.19%和34.58%~41.32%(P<0.05)。上述结果表明食品组分、pH和介质黏度显著影响超声波的钝酶效果。     

超声波结合热处理对莲藕多酚氧化酶和过氧化物酶钝化效果研究

以莲藕中多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)为研究对象,研究超声波结合热处理对PPO和POD残留活力的影响.结果表明:在45℃条件下处理酶液10 min,PPO和POD活力分别为109.8％和104.3％;在0℃、260 W条件下处理酶液10 min,PPO和POD活力分别为80.6％和63.6％,表明超声波处理有一定程度的钝酶效果;在45℃、260 W条件下处理酶液10 min,PPO和POD活力显著降低,分别降低至28.8％和40.7％,表明超声波和热处理在莲藕PPO和POD钝化过程中有协同作用.PPO和POD是影响果蔬褐变的关键酶,试验为莲藕加工过程中防止褐变提供参考.     

橄榄多酚氧化酶和过氧化物酶的抑制剂筛选及其热失活动力学

本项目研究了七种抑制剂(分别为亚硫酸钠、明矾、O-异抗坏血酸、EDTA-2Na、Ca Cl2、多聚磷酸钠、柠檬酸亚锡二钠)对橄榄多酚氧化酶和过氧化物酶活力的影响,并采用两段模型分析了高温处理对橄榄果实多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)的钝化动力学。结果表明,橄榄中酚类化合物氧化分解与POD和PPO活性有关,在特定的环境条件下,O-异抗坏血酸和柠檬酸亚锡二钠抑制橄榄PPO酶和POD酶活性效果最好,譬如,其浓度为0.20 g/L时,可完全抑制橄榄PPO酶和POD酶活力;热烫时间和温度对橄榄果实PPO和POD活性影响较大,并随着热烫时间和热烫温度的增加,橄榄果实PPO和POD活性呈现先下降后处于平稳的趋势,故高温处理对橄榄PPO和POD的钝化过程符合两段模型。     

香蕉皮多酚清除自由基作用的初步研究

采用羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系、还原能力、过氧化氢体系、亚硝酸盐体系对香蕉皮多酚的抗氧化活性进行研究,并与Vc进行了比较。结果表明:在试验浓度范围内(0.1￣4mg/mL),香蕉皮多酚对这几种体系均有不同程度的抗氧化作用。对羟基自由基的清除作用要弱于Vc,对超氧阴离子自由基没有清除作用,还原能力强于Vc,清除过氧化氢和亚硝酸盐能力与Vc接近。     

Characterization of polyphenol oxidase and peroxidase from peach mesocarp (Prunus persica L. cv. Babygold)

The two enzymes involved in enzymatic browning reactions—polyphenol oxidase (PPO) and peroxidase (POD)—were extracted from peach fruit mesocarp. PPO was mainly located in the membrane fraction and was in its latent state. However, POD activity was found in the soluble fraction. The kinetic characterization of PPO and POD was carried out with a natural substrate (chlorogenic acid) and with a non‐physiological substrate. Under native isoelectric focusing (IEF), several PPO isoenzymes were present in the pH range 5.4–5.8. A partially denaturing sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis (SDS‐PAGE) showed the presence of two active bands with apparent molecular masses of 49 and 50 kDa. A totally denaturing SDS‐PAGE indicated the presence of a single polypeptide with a molecular mass of 60 kDa, as revealed by western blot. POD was also analyzed by IEF, showing the presence of two strongly basic isoenzymes, which were resolved by cationic native PAGE into two different bands. Copyright © 2007 Society of Chemical Industry     

护色处理对冻藏香蕉片多酚氧化酶活性的影响

通过设计单一护色剂、不同浓度L-半胱氨酸、不同热处理时间及多因子护色处理四个实验研究其对冻藏香蕉片多酚氧化酶(PPO)活性的影响,结果表明,5种护色剂均能有效地抑制冻藏香蕉片PPO活性,但L-半胱氨酸对其抑制效果更佳;随着护色液中Cys浓度的增加,残余PPO活力呈下降趋势,表现为CK>0.05%Cys>0.1%Cys>0.2%Cys;热处理能有效地抑制冻藏香蕉片PPO活性,PPO活性随着热处理时间的增加而降低,但热处理却大大降低了冻藏香蕉片的品质;0.1%L-半胱氨酸、0.05%异抗坏血酸、0.1%蔗糖和0.1%氯化钙构成的护色剂组合能有效地抑制PPO活性,并起到良好的保质增脆效果。     

杏鲍菇多酚氧化酶的酶学特性研究

以杏鲍菇中多酚氧化酶（PPO）为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究。结果表明,杏鲍菇PPO的最适底物为邻苯二酚;最适pH为6.0;最适温度为35℃;90℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为K_m=0.0207mol/L,V_max=41.32U/min;7种金属离子对PPO酶活性的影响效果各不相同,Al³⁺、Mn²⁺对PPO酶活性有一定的抑制作用,Mg²⁺、Zn²⁺、Ca²⁺和Cu²⁺对PPO酶活性的抑制作用不明显,Fe³⁺对PPO酶活性有激活作用;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>柠檬酸。      

苹果皮制备苹果多酚联产果胶的工艺研究

以干燥的苹果皮为原料,对其同时生产苹果多酚、果胶的新工艺进行了研究。苹果多酚采用超声波辅助提取法,确定其最优料液比1∶20(g/mL),提取温度63℃,提取液乙醇浓度60%,提取时间58min,后选用树脂法吸附分离纯化苹果皮多酚,探讨了静态、动态条件下树脂吸附、洗脱苹果皮多酚的特性及条件,在此条件下多酚的提取量高达18.29mg/g,多酚纯度达到52.56%;然后采用离子交换树脂辅助酸解法提取苹果皮果胶,确定最佳工艺条件为:树脂用量为11%,pH1.3,提取时间2.0h,提取温度75℃,料液比1∶24(g/mL),随后对果胶液超滤浓缩,冷冻干燥,此条件下果胶得率高达26.26%。从苹果皮中连续提取和分离多酚、果胶的工艺具有良好的工业化生产潜力,应用前景广阔。      

高压CO2处理对香蕉果肉中多酚氧化酶活性的影响

比较了CO2压力、温度和处理时间对香蕉果肉中多酚氧化酶活性的影响,并且采用二次回归正交旋转组合设计优化了高压CO2处理对香蕉果肉中多酚氧化酶的钝化条件.结果表明,影响高压CO2处理钝化香蕉果肉中多酚氧化酶活性的主次因素顺序为温度＞时间＞ CO2压力;高压CO2处理钝化香蕉果肉中多酚氧化酶的最佳条件为温度60℃、CO2压力19MPa、处理时间50min,在此条件下,香蕉果肉中多酚氧化酶的残活力仅为0.9％.     

肥城桃果实多酚氧化酶酶学特性的研究

以肥城桃果实为试材,分离纯化了导致酶促褐变的多酚氧化酶（PPO）,并对其性质进行了分析。结果表明,以叔丁基邻苯二酚和绿原酸为底物,加入十二烷基磺酸钠（SDS）后使PPO活性分别增大19倍和12倍,催化效率分别提高11.5倍和17倍,PPO最适pH为6.5,2-羟基-2,4,6-环庚三烯酚酮显著抑制PPO活性。部分变性SDS-PAGE显示PPO在表观分子量分别为49ku和50ku有两条活性条带,等电聚焦IEF显示可溶性PPO和膜结合PPO都含有两个酸性范围的条带,其p I为5.7和5.8,膜结合PPO还有一条p I为5.4的条带。结合western杂交在膜结合PPO的3种同工酶中,只有2种能被抗体识别;全变性SDS-PAGE和western blot发现存在一条分子量为60ku的多肽。      

Production of a banana (Musa cavendishii) extract containing no polyphenol oxidase by ultrafiltration

The objective of this research was the production of a banana extract containing no polyphenol oxidase by ultrafiltration. Banana juice was extracted after inhibition of polyphenol oxidase using a solution containing 0.15 g per 100 ml of sodium metabisulphite and 1 g per 100 ml of ascorbic acid in distilled water to avoid initial browning. Polyphenol oxidase was then retained by ultrafiltration using polysulphone membranes with a cut‐off of 20 kDaltons. Two transmembrane pressures, 600 and 800 kPa, were used but 600 kPa was preferred because of the more stable permeate flux which decreased less with time and concentration of extract. © 1999 Society of Chemical Industry     

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶（PPO）的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca²⁺和Mn²⁺对蓝莓PPO有抑制作用,Cu²⁺、Mg²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。      

Browning in processed yams: peroxidase or polyphenol oxidase?

Polyphenol oxidase and peroxidase were purified from white yam (Dioscorea rotundata) using DEAE‐cellulose ionexchange chromatography. Thermoinactivation curves for polyphenol oxidase showed monophasic kinetics, while those for peroxidase were biphasic. Urea partially stabilised peroxidase against irreversible thermoinactivation, but did not do so in the case of polyphenol oxidase. Only peroxidase was capable of regenerating activity after thermoinactivation. The results showed that thermoinactivation of peroxidase was mainly due to conformational changes, while that of polyphenol oxidase was probably due to covalent damage. Peroxidase reactivation might play an important role in the browning of processed yam. © 2002 Society of Chemical Industry