利用玉米芯木聚糖酶法制备低聚木糖的研究

该文采用源于Thermotoga maritima的木聚糖酶基因工程菌JMl09(DE3)／pET-20b-xynB制备木聚糖酶液，试验结果表明，工程菌产木聚糖酶的最佳诱导条件：诱导剂乳糖浓度为25mmol／L；诱导时间为6h。酶法制备低聚木糖时，采用3％～5％的底物浓度和11．25U／g的酶用量较为适宜。TLC检测海栖热袍菌木聚糖酶水解玉米芯木聚糖的酶解产物主要为木二糖和木三糖。     

木聚糖酶综述

木聚糖酶是木聚糖降解酶系中最关键的酶,主要包括外切β-1,4-木聚糖酶,内切β-1,4-木聚糖酶和β-木糖苷酶。由于木聚糖酶有多样、催化等特性,在造纸、食品、饲料、纺织、医药、环境和能源等行业被广泛应用,而且随着对木聚糖酶的进一步深入研究,其有进一步扩大应用的可能性。     

木聚糖酶Shearzyme 500 L对蔗渣木聚糖的特性研究

以木聚糖酶Shearzyme 500L水解蔗渣木聚糖制备低聚木糖,用DNS法测定酶解液中的总糖和还原糖,HPLC法测定酶解产物组成,其适宜的水解条件为底物质量浓度3g/100mL、pH5.0、60℃、木聚糖中酶用量50U/g、水解时间24h。在此条件下底物水解率约为63.1%,水解产物的81.5% 为低聚木糖,其中木二糖占54.8%,木三糖占26.7%。Shearzyme 500L 不能将一分子木二糖水解为两个木糖单糖,但能水解木三糖并相应生成木二糖与木糖。副产物木糖能显著抑制Shearzyme 500L 活性,降低木聚糖的水解率。     

毕赤酵母木聚糖酶的活力测定条件研究

为探讨毕赤酵母木聚糖酶的催化特性以及更好地发挥其催化功能,从pH、温度、底物浓度、反应时间、DNS用量、DNS显色时间等几个方面研究了木聚糖酶活性测定的最佳条件。研究结果表明,木聚糖酶酶活测定的适宜条件为:1%的木聚糖用0.05mol/L pH6.0的柠檬酸缓冲液配制;测定温度70℃,且该酶的热稳定性较好.在55～60℃下放置2h能保持68%以上的酶活;酶促反应时间10min;DNS用量3mL;DNS显色时间5min。     

高通量MBTH法测定β-葡聚糖酶的活力

本文建立了一种以3-甲基-2-苯并噻唑酮腙(MBTH)为氧化剂,以微孔板测定β-葡聚糖酶活力的新方法,该法特别适合于成分复杂的材料中痕量β-葡聚糖酶活力的测定。根据MBTH法测定β-葡聚糖酶解产物还原端基的特点,设计并优化了酶活力测定的关键参数。结果表明,在最适p H 5.0和30℃条件下测定β-葡聚糖酶活力,所得酶的工作浓度范围为0~12.3 m U/m L,饲料中酶的工作浓度范围均为0~2.94 U/g,本法测β-葡聚糖酶和四种饲料样品中酶的平均回收率分别为93.1%、97.5%、104.3%、97.0%、106.4%,β-葡聚糖酶活力检测限为0.37 m U/m L,定量限为1.24 m U/m L,四种饲料酶活力检测限分别为0.10 U/g、0.09 U/g、0.14 U/g、0.09 U/g,定量限分别为0.33 U/g、0.30 U/g、0.46 U/g、0.31 U/g。该法准确、低成本、省时、省力,特别是其灵敏度远高于DNS法,可极大程度上避开饲料中其它成分对测定的干扰。     

微生物木聚糖酶的研究进展

木聚糖是植物半纤维素的主要成分,是仅次于纤维素的第二丰富的可再生资源.木聚糖的结构十分复杂,它的完全降解需要多种水解酶的参与而共同完成,其中β-1,4-内切木聚糖酶(EC 3.2.1.8)能够以内切方式作用于木聚糖主链产生不同长度的木寡糖和少量的木糖,是木聚糖降解酶系中最关键的酶.木聚糖酶在纸浆、食品、饲料等行业上都有广泛的应用.文中综述了木聚糖酶的结构、分类、诱导和生产、应用等.     

以Bacillus pumlis.木聚糖酶水解玉米芯制备木寡糖

木聚糖酶对 Birch wood,Oat spelt和自制玉米芯木聚糖的水解结果表明,不同来源的木聚糖对木聚糖酶水解的影响非常明显,硬本属的 Birch wood的水解效果较好,自制玉米芯木聚糖的水解效果优于同属于禾本科的 Oat Spelt。自制玉米芯木聚糖的水解结果表明,可溶性木聚糖能够被木聚糖酶有效水解而不溶性木聚糖几乎不被水解,长链木聚糖比短链木聚糖更容易被木聚糖酶水解。采用HPLC对自制玉米芯木聚糖水解液的组成进行分析,结果表明,水解液中低聚木糖的主要成分为木二糖、木三糖和木四糖,占水解液中总糖的80％以上。     

木聚糖酶的应用及其研究进展

木聚糖酶是一种重要的工业酶制剂,现已从多种生物体中分离到大量的不同类型和功能的木聚糖酶.其已经在造纸、饲料、食品和酿酒行业被广泛应用.该文就木聚糖酶的来源、分类、结构、应用等方面的研究现状和进展进行了综述,并对其应用前景进行了展望.     

微生物木聚糖酶及其应用

木聚糖(Xylan)是植物半纤维素的主要成分,是一种复杂的多聚五碳糖。木聚糖酶(Xylanase,EC 3.2.1.8)以内切方式作用于木聚糖主链,产生不同链长的寡糖和少量的木糖,是木聚糖降解酶系中最为关键的酶。本文综述了微生物木聚糖酶系统、微生物木聚糖酶的分类及其来源分布、微生物木聚糖酶的特性、产生及在食品、造纸、饲料行业的应用。     

木聚糖酶在食品中的应用及其发展趋势

木聚糖是半纤维素的一种重要组成成分,广泛存在于各种植物资源中。木聚糖酶是木聚糖的水解酶,它在食品、饲料、造纸等工业上有着非常广泛的应用。本研究就木聚糖酶在食品中的应用范围、作用特点及其机理进行了简要的阐述。     

不同诱导物对Streptomyces olivaceovirdis E—86产高活性木聚糖酶的研究

研究了不同诱导物对StreptomycesolivaceovirdisE— 86产高活性木聚糖酶的影响。采用了 3种木聚糖 (桦木木聚糖、水不溶木聚糖和醇不溶木聚糖 )作为碳源进行发酵。在培养液中最适含量桦木木聚糖和水不溶木聚糖是 1 5 % ,醇不溶木聚糖 2 0 % ;产生的木聚糖酶酶活不同 ,水不溶木聚糖产酶酶活是桦木木聚糖的 3倍 ,是醇不溶木聚糖 4倍 ;发酵时间对酶活量和pH有很大影响     

MBTH法测木糖含量的研究

采用3-甲基-2-苯并噻唑酮腙(MBTH)比色法测定木糖含量,确定了测定木糖的最佳条件:600μL MBTH试剂加入到1.2mL木糖溶液(其中含有600μL 0.5mol/L NaOH)中,80℃水浴加热15min,趁热加入硫酸铁铵试剂,冷却后在650nm下测定吸光度A值。该方法测木糖的检测限为0.3μg/mL,检测浓度范围为1.0～29.2μg/mL。     

几种酚酸对木聚糖酶活力的影响

采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定酶解后还原糖释放量,研究4种不同酚酸(阿魏酸、对-香豆酸、水杨酸、单宁酸)对木聚糖酶活力的影响。结果表明:阿魏酸、对-香豆酸、水杨酸能提高木聚糖酶活力,当这3种酚酸质量浓度为0.75mg/mL时,酶活力分别提高65.59%、46.21%和12.83%。单宁酸抑制木聚糖酶活性,添加量为0.50mg/mL时,抑制率达37.18%。动力学研究表明:上述4种酚酸均能提高酶与底物的亲和力,对-香豆酸能提高酶反应速度,但单宁酸会使反应速度显著降低。     

木聚糖酶酶活影响因素的研究

研究了两种耐温耐碱的商业木聚糖酶酶活的影响因素:木聚糖酶A和木聚糖酶B酶反应的最适pH值为7.0,酶反应的最适温度分别为65℃和70℃.Fe3 在低浓时对这两种酶有激活作用,Fe3 在高浓时则有抑制作用.Al3 对木聚糖酶A有抑制作用,对木聚糖酶B有激活作用.Cu2 对木聚糖酶A和木聚糖酶B都表现为抑制作用.Mn2 对木聚糖酶A有激活作用,对木聚糖酶B有抑制作用.     

MBTH法测定皮革中游离甲醛

采用萃取法将皮革中游离甲醛分离出来,再将萃取出的甲醛与酚试剂反应生成嗪,嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物,然后根据颜色的深浅比色测定甲醛含量。用外标法定量时,其线性回归系数（r）为0．9998,RSD为5．02％,在不同的样品中加入不同浓度的甲醛标准溶液,甲醛回收率达到88．6％～93．9％。     

以玉米芯为原料酶法制备低聚木糖的研究

以玉米芯为原料,在固液比1：10,NaOH 质量浓度4%,50℃条件下处理24h,木聚糖提取率为91．0%。利用木聚糖酶降解木聚糖制备低聚木糖,确立了最佳酶解工艺条件为：50℃,pH 4．8,木聚糖底物质量浓度 3．0%,每克底物的木聚糖酶用量为50IU,反应时间0．5h。在上述反应条件下,产品平均聚合度为3．61,低聚木糖得率为91．2%。该研究结果在可再生半纤维素资源利用方面具有重要的意义。     

共表达木聚糖酶和木糖还原酶生产木糖醇的研究

运用PCR技术扩增出短小芽孢杆菌木聚糖酶A基因,构建分泌型重组质粒pET22-xynA,并构建木糖还原酶重组质粒pET28-xyl1。利用双抗生素抗性将pET22-xynA和pET28-xyl1在E.coliBL21(DE3)plysS中共表达,鉴定了木聚糖酶和木糖还原酶的活性。此外,还对其利用木聚糖生产木糖醇做了初步研究,为将来直接应用玉米芯等农副产品生产木糖醇奠定了基础。