石斛基因组DNA提取方法比较研究

目的：比较3种基因组DNA提取试剂盒对提取富含多糖多酚类物质的铁皮石斛和霍山石斛鲜叶及冻叶的提取效果。方法：对提取的DNA进行纯度及产率检测、电泳质量分析及ITS2 PCR扩增效率检测。结果：市售基于蛋白酶K消化法的试剂盒不适用于石斛DNA提取;基于改良CTAB法的试剂盒更适用于需要较高DNA模板量的石斛鲜叶的DNA提取;基于改良SDS法的试剂盒更适用于石斛冻叶的DNA提取,该法提取的鲜叶DNA完整性最佳,更适用于对DNA完整度要求较高的DNA大片段的分析研究。结论：基于改良CTAB法和改良SDS法的试剂盒提取的石斛鲜叶及冻叶的基因组DNA均适用于常规分子检测。     

水果果肉中总DNA提取方法的比较研究

为了获得高效通用的水果果肉DNA提取方法,本研究以11种水果为试验材料,从前处理方法、裂解液成分、异丙醇沉淀时间等方面对CTAB法进行了改进,并比较了行业标准法、试剂盒法、改良CTAB法3种方法的提取效果,发现改良CTAB法提取的水果果肉DNA浓度都在46.25μg/m L以上,纯度都在1.8左右,且能扩增出137 bp的18Sr DNA条带,从而确定了高效通用的水果果肉DNA提取方法:改良CTAB法。     

15种常见食(药)用菌的3种总DNA提取方法比较研究

本文研究了15种主要食(药)用菌共16个样品的3种总DNA提取方法之比较，它们分别是CTAB法、食品DNA提取试剂盒法和QIAGEN试剂盒法。提取结果分别经过核酸蛋白分析仪、电泳以及RAPD检测。紫外检测结果表明3种方法提取到的总DNA质量均不理想，电泳结果表明3种方法均能提取出小平菇、红菇、香菇、双孢蘑菇、竹荪、黑木耳、姬松茸等7种食(药)用菌总DNA，RAPD检测结果表明CTAB法适用于所有15种食(药)用菌提取用于PCR的总DNA。根据以上结果，我们认为可以选用CTAB法作为在检测这些食(药)用菌的转基因成分时的总DNA提取方法。     

提取鼠肠道内微生物基因组DNA的方法研究

通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道茵群的真实情况.采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以内.通过紫外分光光度计,细菌通用引物PCR,总菌群实时定量PCR,变性梯度凝胶电泳(DGGE)对改进方法及两种试剂盒法提取DNA的结果进行比较,评价了所建立的高效提取方法.与试剂盒相比,改进的方法DNA得率较高,简便快速,成本低廉.同时后续的PCR鉴定及DGGE菌群多样性分析显示,改进的方法可以更好地揭示鼠肠道菌群分布和特性.     

果汁DNA提取方法的比较

为了获得高效通用的果汁DNA提取方法,以7种浑浊果汁和6种澄清果汁为研究对象,从前处理方法、裂解液成分、异丙醇沉淀时间等方面对CTAB法进行了改进,并比较了CTAB法、试剂盒法、改良CTAB法的提取效果,结果发现:改良CTAB法提取的浑浊果汁DNA,浓度都在24.10μg/m L以上,澄清果汁的DNA,浓度都在5.72μg/m L以上,且两类果汁的DNA纯度均为1.8左右,同时都能扩增出18Sr DNA的137 bp的条带,从而确定了高效通用的果汁DNA提取方法——改良CTAB法。     

几种提取转基因木瓜DNA的方法比较

目的 比较CTAB法、SDS法及试剂盒法分别提取木瓜果皮、果肉、种籽DNA的效果, 以提高转基因木瓜的检测准确率。方法 对转基因木瓜内源基因Papain及外源基因NPTII、CP进行普通PCR, 同时对基因表达零件CaMV35S启动子和NOS终止子进行荧光PCR, 以检测提取DNA的质量。结果 分析电泳产物发现, SDS法提取木瓜种籽样品的DNA未能适合普通PCR检测的要求, 其他方法均能满足普通PCR要求。荧光PCR结果显示, 3种方法提取的DNA都满足荧光扩增要求。结论 比较3种提取方法及3种木瓜材料, 发现用CTAB法或SDS法以果皮为材料提取DNA质量最佳。     

一种提取肉类总DNA的方法——改良CTAB法

为了能够更加准确的进行动物源性成分定量检测,打击市场上的"掺杂使假"行为,本实验从初始取样量、裂解时间、沉淀时间和RNA酶作用四方面对CTAB法提取肉类DNA进行研究。综合考虑方法的快速、高效性,最终确定初始取样量应该小于0.05g,裂解时间和沉淀时间均为0.5h,不需添加RNA酶。本方法具有良好的线性关系(R2=0.9972)和稳定性(标准差为0.18),是一种快速、准确、规范的肉类总DNA提取方法。     

食用菌总DNA提取方法的研究

采用SDS法、SDS-CTAB法、氯化苄法等3种方法,同时对多种食用菌的总DNA进行提取,提取到的总DNA经琼脂糖凝胶电泳分析,表明采用SDS法提取的几种食用菌的总DNA质量最好,基本无DNA碎带;酶切试验结果进一步证明采用SDS法提取的总DNA已可直接用于限制性内切酶酶切试验,乃至PCR扩增和RAPD分析等.     

窖泥微生物总DNA的提取纯化研究

窖泥是产生白酒中香味物质的功能菌的生长繁殖载体，白酒中的呈香呈味物质主要是由窖泥微生态中的己酸菌、丁酸菌、甲烷菌等代谢产生和酯化生化反应生成。从窖泥中提取微生物总DNA，经纯化、PCR扩增等处理分析，可跟踪检测不同时期、不同轮次发酵后窖泥中的各菌种、菌群的变化，对养窖护窖、发酵过程控制、提高发酵糟醅质量和酒质等生产都具有指导意义。     

3 种提取河豚鱼肠道微生物总DNA 的方法比较

目的：建立一种有效、节约的河豚鱼肠道内容物总DNA提取方法,应用于聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)等分子生物学研究。方法：采取苯酚-氯仿-异戊醇抽提法,QIAamp DNA Stool Mini Kit,改良FastDNA SPIN Kit for Soil这3种DNA提取方法,并结合PCR-DGGE技术分析河豚鱼肠道微生物多样性。结果：苯酚-氯仿-异戊醇抽提法与QIAamp DNA Stool Mini Kit提取的DNA量远高于改良FastDNA SPIN Kit for Soil,并且包含的微生物多样性较高。结论：苯酚-氯仿-异戊醇抽提法作为一种有效、节约的DNA提取方法,可应用于肠道微生物多样性研究。     

食品污染微生物基因组DNA提取的简易方法

本文报道了直接抽提食品污染微生物的基因组DNA的方法。污染的食品溶于PBS缓冲液后,直接用含SDS的裂解液裂解微生物细胞。抽提出的微生物基因组DNA在23kb处有清晰条带,利用P1和P2扩增出16SrDNA基因约180bp的目的条带,克隆后随机测定一个阳性克隆的序列,分析表明我们测定的与细菌的KVD-1921-15菌株非常接近。     

酵母基因组的提取

酵母是低等真核生物,被广泛应用于食品生产和基因工程。提取酵母基因组对于应用酵母进行实验研究非常重要,本文摸索出了一套简单、经济、高效的酵母基因组的提取方法,为进行酵母研究提供方便。     

微波辅助提取小麦麸皮总黄酮技术研究

目的研究应用微波辅助提取麦麸中的黄酮类化合物。方法通过单因素及正交试验得到从小麦麸皮中提取总黄酮的最佳工艺。结果最佳工艺为微波功率560 W,微波辐照60 s,乙醇浓度80%,料液比1∶20。此工艺总黄酮提取率为3.51‰。结论微波辅助提取小麦麸皮总黄酮是一种经济有效的方法。     

烟草中石油醚提取物测定方法改进

为提高烟草石油醚提取物含量的测定速度,进行了标准(YC/T 176-2003)测定方法的改进试验:①增加烟样浸泡过夜预处理步骤;②称量介质由索氏提取器的接收瓶改为滤纸筒。试验结果表明,①增加烟样浸泡过夜预处理后,样品的提取时间缩短2 h;②采用称量索氏提取器接收瓶计量,一套提取装置一次仅能提取1个样品,改为称量滤纸筒计量后,一套提取装置一次可提取12个样品,显著减少了提取设备、石油醚用量、电耗和水耗;③改进法的RSD小于或略大于1.0%;④改进法与标准法测定结果的相对偏差小于2.2%。该法适合烟草石油醚提取物的快速测定。     

芥菜总黄酮超声辅助提取工艺优化及其脂质抗氧化研究

为得到超声辅助提取芥菜总黄酮的最佳工艺,并评价其脂质抗氧化活性,在超声时间、液料比、乙醇浓度和超声温度4个单因素试验的基础上,对影响芥菜总黄酮提取率的工艺因素进行Box-Behnken设计并进行响应面优化,通过芥菜总黄酮对大豆油和猪油的作用来评价其脂质抗氧化活性.结果表明最佳的工艺条件为:超声时间25 min,液料比3...     

燕窝DNA提取方法比较

为建立不同燕窝样品有效DNA提取方法,分别用试剂盒法、改良CTAB裂解法以及改良试剂盒法提取燕窝总DNA,进行浓度纯度检测,并以此为模版,进行PCR扩增及凝胶电泳。结果表明,改良试剂盒法扩增结果条带明亮,信号较强,较改良CTAB裂解液法与试剂盒法,更适于燕窝样品DNA提取,可用于PCR模版DNA制备,为进一步鉴定燕窝真伪提供参考。     

动物明胶中3种DNA提取方法的比较研究

基于DNA水平的分子生物学检测方法,因其高特异性、高灵敏度且简便快速等优点,成为明胶动物来源鉴别检测的有效方法。但明胶的特殊加工工艺给DNA的提取带来了一定的困难。研究中选取了牛皮明胶、牛骨明胶和猪皮明胶等不同动物品种和不同动物组织来源的明胶产品,采用了试剂盒法、蛋白沉淀法和裂解抽提法等3种DNA提取方法,从DNA提取质量、提取效率及明胶动物种类来源PCR扩增等方面对3种方法进行了比较。研究结果表明,裂解抽提法所提取的明胶中的DNA质量优于前2种方法,且适合于进一步的PCR扩增检测,是适合于明胶DNA提取的有效方法。     

桑椹总RNA抽提方法的比较

为对比CTAB改良法、E.Z.N.A.TM总RNA抽提试剂盒Ⅱ、EZ-10柱式总RNA抽提试剂盒和异硫氰酸胍法4种方法抽提桑椹总RNA的效果,对该4种方法抽提后的总RNA进行纯度、得率和完整性检测以及进一步的RT-PCR检测。结果显示:CTAB改良法和E.Z.N.A.TM总RNA抽提试剂盒Ⅱ均适用于桑椹总RNA抽提,获得的总RNA纯度高、得率高、完整性好,完全可用于后续的分子生物学实验;但两者相比,CTAB改良法成本更低,操作更简单。     

不同培养方式对榆黄菇基因组DNA提取的影响

本实验以榆黄菇515株系作为供试材料,采用五种不同的培养方式培养菌丝体,然后用改进的SDS法提取基因组DNA,进行电泳检测和吸光度值测定。实验结果表明,通过液体静置培养和液体床培养的菌丝体生长状况最好,提取基因组DNA的效率也较高,但液体静置培养的菌丝体基因组DNA中含有较多的蛋白、多糖等杂质。因此,液体床培养是榆黄菇获取基因组DNA的最佳培养方式。     

啤酒总酸测定方法的改进

考察了不同脱气方法对啤酒总酸度测定的影响,建立了利用抽真空快速脱气的方法.实验结果表明,对未进行任何处理的啤酒样品振摇抽真空5 min,可以有效脱去啤酒中的CO2,简化了啤酒样品的预处理过程,从而极大地缩短了测定啤酒中总酸度的总的分析时间.将该方法用于啤酒总酸的测定,啤酒总酸度的相对平均偏差为0.06%(n=8).