链格孢霉毒素细交链格孢菌酮酸的研究进展

链格孢霉（Alternaria）是污染食品和饲料最普遍的真菌之一。细交链格孢菌酮酸（tenuazonic acid,TeA）是链格孢霉毒素中最为重要的一种,可广泛污染蔬菜、水果及谷物。本文综述TeA毒素的来源及污染情况、理化性质及其毒性、检测方法等,并就未来研究方向进行展望。     

链格孢毒素及其食品卫生问题（综述）

链格孢 (Ａｌｔｅｒｎａｒｉａｓｐｅｃｉｅｓ)广泛分布于自然界 ,具有寄生、腐生和植物致病性 ,可在田间、运输及储藏过程中引起农作物霉变。由于该菌可在低温潮湿的环境下生长繁殖 ,生长所需的水分活性在 0 84以上 (湿度 2 0 %～ 30 % ) ,因此是导致水果、蔬菜及冰箱储存食品腐败变质的主要微生物。谷物常被链格孢 ,特别是互隔链格孢 (Ａ .ａｌｔｅｒｎａｔａ)侵染而引发黑斑病。链格孢可产生 70多种有毒代谢产物链格孢毒素 ,人及动物摄入被链格孢毒素污染的食品及饲料后可导致急性或慢性中毒 ,且某些链格孢毒素还有致畸、致癌、致突变作…     

链格孢霉毒素检测方法研究进展

链格孢霉菌属于丝状真菌,是一种普遍存在于环境中的病原体和腐生菌,是低温环境下导致水果、蔬菜等农产品腐烂变质的主要微生物。链格孢霉毒素中有70多种具有明显毒性,对人或牲畜具有诱变性、致癌性和致畸性等慢性或急性毒性作用,因此引起了科学家们的广泛关注。但到目前为止,国内外现行的食品中真菌毒素的限量标准中尚不包括链格孢霉毒素,并且通常采用液相、液相-质谱、气相、气相-质谱等相关的检测方法进行检测。本文首先对链格孢霉菌的3种主要的次级代谢产物——链格孢酚、链格孢酚单甲醚和细交链孢菌酮酸的分类及毒性性质进行介绍;其次,对其主要的传统检测方法和快速检测方法进行综述;最后,对链格孢霉毒素检测的新技术新方法进行了展望。     

链格孢霉毒素的分析方法及其毒理机制研究进展

链格孢霉毒素是由链格孢霉属(Alternaria species)产生的次级代谢产物,因其大都具有细胞毒性、基因毒性、诱变性、致畸致癌性等毒性,食用被其污染的食物后会对人体健康造成严重危害。因此,筛选快速、简便的分析方法和研究其毒性作用机制都是当今的热点。本文主要概述了链格孢霉毒素的分类及理化性质,常见的分析方法及其毒理机制,旨在为链格孢霉毒素的风险评估和中毒防治等研究提供参考,同时对于人和动物的健康安全也具有重要意义。     

链格孢毒素危害及防控措施的研究进展

链格孢毒素主要是由链格孢霉（Alternaria）产生的次生代谢产物,在世界各地的食品中广泛存在,对人类健康构成严重威胁。因此,解析其毒性和发现危害防控措施已成为目前的研究重点。本文主要概述了食品中常见4种链格孢毒素的毒性、暴露风险、污染控制和毒性干预方法等,旨在为链格孢毒素的风险评估、安全限量标准和防控措施的制定提供参考,对保障食品安全和人类健康具有重要意义。     

QuEChERS-UPLC-MS/MS测定焙烤食品中4种链格孢菌毒素

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定焙烤食品中4种链格孢菌毒素(腾毒素、链格孢菌酚、交链胞酚单甲醚、细交链胞菌酮酸)快速检测方法。样品经乙腈-0.1 mol/L盐酸溶液超声萃取,萃取液经QuEChERS净化处理,在RP18色谱柱(2.1 mm×100mm,1.7μm)上以乙腈和1 mmol/L碳酸氢铵为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源、正负离子多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明,4种待测物在相应的浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.999;方法定量限(S/N≥10)为0.03～0.3μg/kg;进行3个水平的添加回收实验,平均回收率(n=6)为83.2%～105.3%;相对标准偏差(RSD,n=6)为1.2%～6.4%。应用本方法检测45个焙烤食品样品,4种真菌毒素均有检出。其中24份样品检出AME,含量为0.1～4.6μg/kg;6份样品检出AOH,含量为0.47～1.5μg/kg;27份样品检出Te A,含量为0.6～3.7μg/kg;9份样品检出TEN,含量为0.3～2.1μg/kg。     

短波紫外线辐照对草莓贮藏保鲜效果的是

本文研究了不同剂量短波紫外线辐照对草莓贮藏效果的影响，表明10kJ/m^2计量辐照能减轻草莓贮期病害，延缓后熟，0.5kJ/m^2剂量能较好地保持VC含量，1.5kJ/m^2剂量照射可能会造成草莓伤害。     

继代培养对链格孢菌生长及产毒的影响

目的 探究连续继代培养对链格孢菌(Alternaria alternata)菌株的生长以及产毒的影响。方法 将10株链格孢菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar, PDA)上连续继代培养,分析菌株的生长、产孢情况;利用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测并分析主要链格孢霉毒素[包括交链孢酚(alternariol,AOH)、交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether, AME)、交链孢烯(altenuene, ALT)、细交链格孢菌酮酸(tenuazonic acid, TeA)]的含量变化。结果 在PDA培养基中,连续继代培养链格孢菌极易出现角变、菌丝变白、菌丝生长速率加快等菌株退化现象。随着继代培养次数的增加,菌株生长速度加快,菌落直径变大,角变率增大;10株链格孢菌中有7株(MY-4、MY-12、MY-15、MY-73、MY-80、MY-103、MY-117)产孢量随着继代次...     

链格孢霉菌侵染番茄产毒机制

为研究链格孢霉侵染番茄后的产毒机制,本实验将链格孢霉孢子悬液接种于蕃茄上,并分别置于4 ℃和25 ℃下培养,15 d内进行3 次取样。样品经高分辨质谱检测后,使用MZmine、Xcalibur软件对检测结果进行分析,原质谱数据集经Mzmine软件处理后导入全球天然产物社会分子网络平台,采用基于特征的分子网络（feature-based molecular networking,FBMN）建立真菌毒素及代谢物分子网络,实现对链格孢毒素代谢通路的可视化分析。结果表明,接种后番茄在4 ℃下未产生任何毒素,25 ℃下链格孢酚（alternariol,AOH）、链格孢甲基醚（alternariol monomethyl ether,AME）、细链格孢菌酮酸（tenuazonic acid,TeA）、腾毒素（tentoxin,TEN）在5、10、15 d时均被检出,链格孢霉烯（altenuene,ALT）直至15 d时才被检出,3 次取样中TeA含量均最高。利用MZmine软件的碎片诊断过滤功能和Xcalibur软件精确分子质量技术验证了AOH和AME硫酸盐结合的隐蔽型真菌毒素的存在。FBMN分析结果表明3 种毒素（AOH、AME、TeA）有明显的代谢通路,代谢产物的种类较多,而未在番茄中检测到TEN和ALT代谢产物。本研究阐明了链格孢霉毒素在番茄中的产生及代谢机制,可为番茄中链格孢毒素的有效控制及番茄的贮藏保鲜提供理论支持。     

长柄链格孢(Alternaria longipes)和链格孢(A.alternata)的RAPD分析

对来自中国及亚、非、欧三大洲5个国家的10个烟草赤星病菌（Alternarialongies）及5个链格孢菌（A．alternata）标准菌株用6种随机引物（OPR01、OPR12、OPR13、OPR14、OPR15、OPK19）进行了基因组DNA随机扩增多态性分析，对RAPD带型所进行的聚类分析结果表明，所有参试菌株之间相似性很高（90．3％～94．7％），其系统聚类关系与寄主和地理来源没有相关性，证明A．longipes与A．alternata亲缘关系很近，建议将A．alternata确定为烟草赤星病菌的学名。     

胶束电动毛细管色谱法分析3种交链孢毒素主成分含量

目的 建立胶束电动毛细管色谱法(micellar electrokinetic chromatographic, MEKC)测定3种交链孢毒素[交链孢酚(alternariol, AOH)、交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether, AME)和交链孢菌酮酸(tenuazonic acid, TeA)]主成分含量的新分析方法。方法 以未涂层熔融石英毛细管柱(50μm×30 cm, 20 cm, i.d.)为分离柱,分别以3种分离缓冲溶液[40 mmol/L Na_2B_4O_7-120 mmol/L十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate, SDS)(含体积分数为5%的乙腈)、30mmol/LNa_2B_4O_7-40mmol/LSDS(含体积分数为30%的异丙醇)和60mmol/L Na_2B_4O_7-180 mmol/L脱氧胆酸钠]及2种样品缓冲溶液[8 mmol/L硼砂(含体积分数为57%的甲醇用于AOH和TeA)、8mmol/L硼砂(含体积分数为57%的异丙醇用于AME)]分析AOH、AME和TeA的主成分含量。结果 AOH、AME、TeA的方法精密度分别为0.05%、0.01%和0.21%(n=5),检出限分别为5、15和0.5 mg/L。主成分含量分别为99.94%、99.78%和97.28%,且与高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)的结果无显著差异(α=0.05)。结论 MEKC法可作为HPLC法测定3种交链孢毒素主成分含量方法的互补方法 ,能够满足3种交链孢菌毒素主成分含量分析的要求。     

短波紫外线结合发光二极管红光辐照对香椿保鲜效果的影响

目的 比较短波紫外线(ultraviolet C, UV-C)与发光二极管(light-emitting diode, LED)红光复合辐照和单一LED红光辐照对贮藏期香椿采后保鲜效果的影响。方法 将挑选后的香椿分为3组,在4℃下贮藏,通过测定感官指标、失重率、色差值、可溶性固形物含量、维生素C (vitamin C, VC)含量、还原糖含量、菌落总数、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基清除能力、过氧化物酶(peroxidase, POD)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)活性指标比较不同处理的差异。结果 将红光复合辐照与单一LED红光辐照的处理效果比较后发现:在外观品质方面,前者显著地提高香椿的感官品质,其感官品质评分比对照高9.6分;有效地降低香椿的失重率,其失重率仅为对照的52.5%;在营养品质上,前者可以保持更高的可溶性固形物、VC和还原糖含量,其VC含量是对照的11.1倍;前者不仅有效地抑制香椿叶片中微生物的生长,还显...     

番茄酱中6种交链孢霉毒素的液相色谱-串联质谱检测方法

目的 研究利用固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定番茄酱中6种交链孢霉毒素。方法 番茄酱样品经提取液提取,固相萃取柱净化后,采用液相色谱-串联质谱进行测定,外标法定量。 结果 番茄酱样品中交链孢霉毒素添加浓度在2.0μg/kg~200μg/kg 时,回收率在66.5%~113.5%之间。结论 该方法简单快速,灵敏度高,定量准确,是实现番茄酱中6种交链孢霉毒素快速定量检测的可靠方法。     

紫外LED冷光降解黄曲霉毒素B1技术对花生油品质影响的研究

目的考察紫外LED冷光降解黄曲霉毒素B_1(AFB_1)对花生油品质的影响。方法通过测定紫外LED冷光照射前后脂肪酸、酸价、过氧化值的变化来初步评价对花生油脂肪酸的影响。结果经紫外LED冷光技术处理的花生油,其脂肪酸组成及含量变化,酸价和过氧化值的变化均无显著性差异(P0.05),对花生油的品质影响不大。结论黄曲霉毒素降解机(紫外LED冷光技术)基本对花生油品质无影响,为花生油加工企业的实际生产提供一定的参考。     

利用紫外光降解花生油中黄曲霉毒素B1

目的评价紫外光照射对花生油中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的降解效果以及油品质的安全性的影响。方法采用波长为365 nm,功率100 W的紫外灯设备对花生油中的AFB_1进行照射处理后,分别利用高效液相色谱(HPLC)对花生油中的AFB_1的含量,滴定法对过氧化值,Ranciment法对氧化稳定性以及气相色谱法(GC)对不饱和脂肪酸的含量进行跟踪测定。结果结果表明,随着紫外照射时间的延长,花生油中黄曲霉毒素的含量逐渐降低,在25 min内降解率可达90%,过氧化值、不饱和脂肪酸的含量以及氧化稳定性这些品质指标数值均无明显变化。结论紫外光照射脱毒技术不仅对花生油中的AFB_1有很好的降解效果,并且对油品质无显著影响。     

紫外辐照法提高咸蛋清起泡性的工艺研究

咸蛋清是蛋制品的副产物,一直以来仅有少部分用于饲料,大部分被丢弃,造成了较大的环境污染和资源浪费。本实验以经超滤脱盐的咸蛋清为原料,利用紫外辐照法,研究了辐照时间、pH、温度对咸蛋清起泡力的影响。利用响应面分析法确定了最佳工艺参数为辐照时间32min,pH5.0,温度30℃。此时的咸蛋清粉的起泡力为65.33%。      

紫外线照射与柠檬酸处理对鲜切苹果的保鲜作用

目的研究柠檬酸、紫外线照射、柠檬酸和紫外线照射联合处理对鲜切苹果生理生化的影响。方法以富士苹果为实验材料,分成4组,分别是0.5%柠檬酸(CA)溶液中浸泡5 min、紫外照射(UV)5 min/面、0.5%柠檬酸溶液中浸泡5 min+紫外照射(CA+UV)5 min/面、不处理的对照组(KB)。分别于0、1、3、5、7、10、13、15 d测定鲜切苹果的色差、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性。结果富士苹果经过切分后,褐变严重。PPO、POD活性升高,PAL活性变化曲折,总体呈上升趋势。柠檬酸、紫外、柠檬酸和紫外联合处理的3三种处理方式都可以抑制鲜切苹果的褐变,降低PPO、POD、PAL的活性。在4种处理方法比较中,柠檬酸和紫外联合处理的效果比较好。结论柠檬酸和紫外联合处理是鲜切苹果的理想的保鲜方法。     

紫外线照射处理对馒头品质及保质期影响研究

目的研究紫外线照射处理的方法对馒头品质及保质期的影响。方法通过对馒头进行感官评价确定馒头的品质,通过测定馒头表面的微生物数量确定馒头的保质期。结果紫外线照射时间和紫外照射灯管数能够明显延长馒头的保质期。在紫外线照射时间7 s,紫外灯管数3根,紫外照射距离为5 cm时,微生物生长受到明显抑制,馒头的保质时间从20 h延长至40 h,而且对馒头的感官评价基本没有影响,具有良好的安全性。结论紫外线照射处理对馒头的品质影响较小,但能够明显延长馒头的保质期。     

低温贮藏和短波紫外线辐照对芥蓝采后叶绿素降解及脱镁叶绿素酶活性的影响

采后叶绿素降解造成绿叶蔬菜失绿,直接影响产品的感官品质和货架寿命。以研究芥蓝采后叶绿素降解和脱镁叶绿素酶（PPH）之间的关系为目的,考察了温度以及短波紫外线（UV-C）辐照对贮藏过程中芥蓝叶绿素含量及脱镁叶绿素酶活性变化的影响。结果表明常温22℃贮藏时,PPH活性在前期快速上升,第3d时约为第0d的200%,而在低温4℃时酶活仅为第0d的135%,第3d时叶绿素a的含量是常温时的2.8倍;UV-C辐照降低了PPH活性,第1dPPH酶活仅上升14%,而对照则上升50%,第5d时叶绿素a的含量是对照的1.3倍。因此低温和UV-C辐照抑制了贮藏过程中PPH酶活性的快速上升,从而降低了叶绿素降解的速度。      

嗜麦芽窄食单胞菌42-2降解黄曲霉毒素B1的效果研究

黄曲霉毒素B1（AFB1）对人类和家畜的健康危害很大。本文以嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas sp.42-2）为研究菌株,对其进行了急性毒理实验,并利用该菌的上清液、发酵液和胞外蛋白粗提取液分别进行了发霉玉米、饲料、生大黄、柏子仁和怀山药的黄曲霉毒素B1降解实验。结果表明:活菌制剂在2.56×1010 CFU个/m L剂量以下不会引起急性毒性反应。在菌株42-2的上清液、发酵液和胞外蛋白粗提取液的毒素降解实验中,三者对发霉玉米中AFB1的降解率分别为:74.90%、82.60%和65.40%;对饲料中AFB1的降解率分别为:77.60%、82.50%和71.20%;对生大黄中AFB1的降解率分别为:73%、78.10%和68.40%;对柏子仁中AFB1的降解率为:76%、79.50%和70.50%;对怀山药中AFB1的降解率分别为:65.30%、69.10%和61.10%。