烟草青枯病颉颃细菌的筛选及其防病效果研究

从安徽、浙江等地的烟草、蕃茄和辣椒等茄科作物根标、根围土壤和病、健植株组织中,分离纯化到168个细菌菌株,通过室内异步培养法和平板扩散法,筛选出17个对烟草青枯病菌具有一定颉颃作用的菌株,其中,AQB-46和AQB-33两菌株抑菌能力最强,抑菌圈直径分别为33.7mm和30.6mm。盆栽防病结果表明,这2个菌株对青枯病的防治效果在接种青枯菌后的30d内一直维持在54.2%~64.7%。菌株AQB-62室内抑菌试验效果明显低于AQB-46和AQB-33,但盆栽防病的效果在接种后的20d内也一直维持在49.9%~53.0%的水平。接种前3d喷施颉颃菌的各处理,其防病效果远高于接种后3d喷施颉颃菌的各处理,前者防效最高为64.7%,而后者最高仅为15.0%,说明颉颃菌对烟草青枯病的防治主要表现为预防。此外,颉颃菌的防病作用主要表现为减轻发病程度,而对发病率没有影响。颉颃菌除具有直接的抑制青枯菌定殖、繁衍、扩展外,有的菌株如AQB-62还具有一定的诱导抗性作用。AQB-46,AQB-33和AQB-62等3个菌株可望研制成生物农药,使之更有效地防治烟草青枯病。      

烟草内生细菌及其对烟草青枯病的生物防治研究

对烟草内生细菌的来源、数量动态变化、与青枯病抗性的关系,以及内生细菌防病和促进种子萌发等方面进行了研究。结果表明烟草内生细菌可来源于种子内部,在烟草不同生育期,抗病品种中内生细菌的总数量以及对青枯病菌具有拮抗作用的内生细菌数量均高于感病品种,部分内生细菌具有促进烟草种子萌发和防治烟草青枯病的作用。      

烟草细菌性青枯病防治方法研究

研究了烟草细菌性青枯病的生物防治和化学防治相结合的方法。通过盆栽试验结果表明：产细菌素的烟草青枯细菌无致病力菌株抗链霉素突变体ｒＡ３－５和农用链霉素联合作用，对烟草青枯病防效最佳。先加致病菌再加拮抗菌和先加拮抗菌再加致病菌的防病效果分别为９３．８％和１００％，推迟发病期８天和３０天，而ｒＡ３－５和农用链霉素单一作用的防病效果分别为５６．３％、６５．３％和４１．７％、５８．４％。     

烟草青枯病拮抗菌的筛选及抑菌活性的测定

为有效防治烟草青枯病,从贵州省青枯病迟发烟地和不发烟地土壤中筛选出15株拮抗菌,对拮抗菌的拮抗能力进行了鉴定。筛选出拮抗力较强的3个菌株(LCA-9、PCM-4、SXM-2),并对3菌株的抗菌物质进行了粗提,检验其抑菌活性。结果表明:3种菌的发酵分泌液对烟草青枯病均有一定的抑制作用,其中SXM-2发酵液的抑菌活性较大、效果较好。     

无致病力青枯菌株对烟草青枯病的控制作用

为进一步揭示无致病力菌株对烟草青枯病的控病机理,以无致病力青枯菌株为材料,针对烟草青枯病进行了温室控病及田间小区试验,并通过抗药性标记测定其抗药性突变菌株在烟株体内的定殖状况,同时分析处理后烟株体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性变化。结果显示:无致病力菌株Tbw1-7-3在温室盆栽条件下对青枯病的相对防效达89.4%,其田间防效在发病初期10~20 d与药剂农用链霉素处理间无明显差异,且其抗药性突变株在烟株根表和体内可短暂定殖。同时菌株Tbw1-7-3能提高寄主中PAL、POD和PPO 3种酶活性及促进病程相关蛋白(PRP)的积累。无致病力菌株对烟草青枯病具有较好的控制作用,以菌株Tbw1-7-3的防效最优。田间试验也显示Tbw1-7-3菌株在发病初期具有良好的控病效果。无致病力青枯菌株的控病机理可能兼有占位效应及诱导抗病性。      

福建烟草线虫种类及其对烟草青枯病的影响

从烟草根部和根际土壤中分离鉴定出植物线虫10属17种,较具经济重要性和分布较广的有南方根结线虫、爪哇根结线虫、双宫螺旋线虫、饰环矮化线虫、针线虫。用爪哇根结线虫(Meloidogyne jauanica)和青枯病细胞(Pseudomonas solanacearum)接种烟草证实,根结线虫能加剧烟草青枯病发生。田间在烟草伸根期施用杀线虫剂呋喃丹和呋喃丹与硼砂混合剂,能明显减轻烟草青枯病的发生和增加烟叶产量。      

烟草抗青枯病的药剂诱导效应与抑菌增效作用

采用离体与活体叶脉注射染病法,比较了几种诱导剂对烟草抗青枯病的效果.结果表明,苯并噻二唑(BTH)对烟草诱导抗病具有显著效应,在50μg/mL浓度处理下,离体和活体诱导抗痛效率分别为60.96%和52.76%.以100,50,25,12.5,6.25μg/mL BTH浓度处理后5至15 d的测定结果,50μg/mL以上浓度离体和活体的诱导效率均达到50%以上.离体病原菌抑茵活性测定结果显示BTH对病原菌没有抑制活性,而分别以12.5 μg/mL BTH和25 μg/mL的农用硫酸链霉素混配,离体和活体相对防效分别达到75.31%和73.98%,增效系数在20以上,表现出显著的联合增效作用.     

邻苯二甲酸二丁酯降解菌对烟草青枯病的抑制作用

为有效防治烟草青枯病,采用细胞培养和毛细管法研究了烟草化感自毒物质邻苯二甲酸二丁酯对青枯菌的影响及趋化诱导效应,同时采用梯度训化法筛选邻苯二甲酸二丁酯降解菌,并通过盆栽试验测定了邻苯二甲酸二丁酯降解菌处理后的烟草青枯病发病率。结果表明,邻苯二甲酸二丁酯对青枯菌具有趋化诱导作用,并且在低浓度条件下能促进青枯菌生长;筛选的邻苯二甲酸二丁酯降解菌(Acinetobacter sp. Ed2)在土壤中对邻苯二甲酸二丁酯降解效率为51.17%;土壤中添加邻苯二甲酸二丁酯的处理(T1),与对照(CK)相比青枯菌数量显著提高59.89%;经邻苯二甲酸二丁酯降解菌Ed2处理(T2)后,与对照和T1处理相比,土壤中青枯菌数量分别降低84.63%和90.38%,青枯病发病率分别降低52.23%和136.42%。因此,利用邻苯二甲酸二丁酯降解菌消耗土壤中的邻苯二甲酸二丁酯,既减少青枯菌的营养供给,又截断邻苯二甲酸二丁酯对青枯菌的趋化诱导作用,从而显著降低了青枯病发病率。     

烟草青枯病的综合防治

详细介绍了烟草青枯病的分布、为害、症状、发病条件及综合防治措施 :①农业栽培措施防病 ;②种植抗病品种 ;③化学药剂防病等。     

烟草青枯病发生与防治研究

烟草青枯病发生危害与品种、耕作类型、栽培管理、地形地势等有密切关系。试验证明，９０％乙霜青可溶性粉剂防治烟草青枯病效果显著，优于１０００万单位硫酸链霉素，其防治效果可达８０％以上。     

烟草内生青枯病拮抗细菌的筛选和初步鉴定

为了获得防治烟草青枯病新途径,从湖南桂阳烟草青枯病重病区采集的健株上,共分离到内生菌株160个。经对峙培养法测定,32个菌株对烟草青枯菌有拮抗作用,其中H-1、H-9和H-11有强拮抗作用,抑菌圈分别为3.0、3.0、4.5 mm。根据其形态特征和生理生化性状,初步鉴定内生菌H-1为枯草芽孢杆菌,H-9和H-11为短芽孢杆菌。     

烟草青枯病生防菌YH-22抗病机制的初步研究

通过菌株生态定殖以及抗病物质分析,初步探究解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）YH-22抗青枯病（茄科雷尔氏菌所致）的机制。采用利福平抗性诱导,获得抗400 μg/mL的抗性菌株以利于定殖研究。盆栽试验结果表明,YH-22先在烟草根际土壤定殖,然后依次进入根部、茎部。对YH-22菌株发酵上清液进行理化性质分析,发现抗茄科雷尔氏菌活性物质不溶于氯仿和乙酸乙酯,能溶于甲醇,具有一定的耐热性,能耐受胃蛋白酶和紫外线,具有排油和使液滴坍塌的特性。综上所述,生防菌YH-22在烟草根际土壤、根、茎均具有一定的定殖能力,其抗菌物质可能为蛋白质和脂肽的混合物。     

烟草绿原酸分离纯化及其抑菌性研究

研究了烟草绿原酸提取纯化工艺条件及其抑菌效果.采用超声波提取、大孔吸附树脂纯化烟草绿原酸,抑菌圈直径法测量绿原酸抑菌水平.结果表明:最佳提取条件为乙醇浓度60.5%,超声波处理时间30.4 min,温度51.4 ℃,绿原酸得率1.6%;NKA-9型大孔吸附树脂对绿原酸有较好的吸附及解吸效果,均达70%以上;烟草绿原酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均具有一定的抑菌效果.     

烟草野火病拮抗生防菌的筛选、鉴定与应用

为筛选出烟草野火病拮抗生防菌,开发防治烟草野火病的新型生物农药,降低烟叶农药残留,提高烟叶的安全性,从烟田采集的健康烟草叶片经平板划线法分离和纯化后得到287个细菌分离物,从中筛选到14个对烟草细菌性野火病有抑制作用的拮抗生防菌,测得其中具有较强抑制作用的菌株抑菌带宽度为9.3 mm,经16S rDNA序列鉴定,该菌属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。烟草叶片经该拮抗菌液诱导后接种,叶片内主要防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性均显著增强。防效测定表明:施用生防剂后接种野火病菌的处理,拮抗菌株防治效果达97.54%,对照农用链霉素防治效果为41.44%。先接种野火病菌后施生防剂的处理,拮抗菌株防治效果达51.40%,对照农用链霉素防治效果为50.69%。说明该拮抗菌株的预防效果高于当前生产上使用的农用链霉素,且其预防效果优于治疗效果。     

烟草青枯病病圃土壤微生物多样性初步分析

为了更好地利用烟草青枯菌拮抗菌防治烟草青枯病,采用微生物保守区域扩增、构建文库、生物信息比对的方法初步分析了烟草青枯病病圃土壤中微生物的多样性。结果显示,烟草青枯病病圃土壤微生物群落中含有伯克霍尔德氏菌(Burkholderia fungorum)、假单胞杆菌属类(Pseudomonas graminis)、黑霉菌(Aspergillus niger)、尖孢镰刀菌属(Fusarium oxysporum)等丰富的细菌类和真菌类微生物,也包括部分不可培养的微生物。土壤中微生物多样性的分析可以为青枯菌拮抗菌应用中拮抗菌在土壤中的定殖、扩繁过程研究提供部分微生物群落信息。     

Isolation and Characterization of Bacteria Resistant to the Antimicrobial Activity of Garlic

Twenty-six bacteria were isolated from garlic (Allium sativum) and characterized. They all were identified as Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides. All the isolates were resistant to antimicrobial activity of garlic and grew or survived in TSB with 10% garlic extract while other bacteria and yeasts from our laboratory collection were killed when 1–2% garlic extract was in the culture media. Garlic isolates were also more tolerant than common laboratory strains to the toxic effect of methyl methanethiosulfonate, a thiol inhibitor similar to allicin. This is the first report of the isolation of naturally occurring bacteria resistant to antimicrobial activity of garlic.     

乳酸链球菌素对乳酸菌抑菌作用的研究

目的：为了观察Nisin 对乳酸菌的抑菌效果,探讨Nisin 作为食品级载体筛选方法的最佳抑菌浓度和持续时间。方法：采用试管稀释法和纸片扩散法检测Nisin 对乳酸菌的抑菌浓度,并根据乳酸菌的OD600nm 作出生长曲线,以研究Nisin 对乳酸菌的抑菌效果。结果：Nisin 对乳品工业常用乳酸菌具有较强的抑菌作用,仅某些乳酸乳球菌对Nisin 表现出抗性;Nisin 对乳酸菌有较持久的抑菌效果,可达30～48h 以上。结论：该实验为Nisin 作为食品级载体筛选方法的最佳抑菌浓度和持续时间提供了依据。     

烟草拮抗内生细菌的筛选与防病促生长效果

为了获得能促进烟草生长和防治黑胫病的稳定菌株,通过常规方法从烟草茎、叶中分离到478株内生细菌,其中65株能拮抗烟草黑胫病菌,占13.60%。菌株YN201408、YN201442、YN201448和YN201458对烟草疫霉的抑菌率分别为63.85%、60.82%、64.72%和76.07%,用1.0×107 cfu/mL拮抗菌液浸烟苗根系30 min,移栽后浇灌1次,在温室盆栽试验中控病效果分别为68.24%、65.47%、69.12和41.40%。YN201448对烟草种子萌芽率和烟草的生长都有促进作用,烟草的发芽率、第5~6真叶期苗高和地上部鲜重分别高于清水对照10.95%、29.31%和67.24%。依据菌体形态、生理生化特征和16S rDNA序列,YN201408、YN201442和YN201448鉴定为解淀粉芽孢杆菌,YN201458为铜绿假单胞菌。YN201448因良好的促生长和控病效果而具有继续开发应用的潜力。     

甘薯黑斑病拮抗细菌抑菌性能及抑菌物质鉴定

甘薯采后由病原菌引起的腐烂损失严重,其中由长喙壳菌（Ceratocystis fimbriata）侵染所导致的黑斑病是甘薯采后主要病害之一。本研究对前期筛选到的对长喙壳菌有较强拮抗作用的菌株解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）JK和克雷伯氏杆菌（Klebsiella pneumoniae）GK进行抑菌性能分析,同时采用气相色谱-离子迁移谱（GC-IMS）和气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术对两株拮抗菌的体外挥发性抑菌成分进行了分析。结果表明:用两株拮抗菌JK和GK的菌液熏蒸甘薯果实,延缓了黑斑病发病时间,显著（P<0.05）抑制了病斑的扩展。两株菌所产的挥发性气体成分主要有酮类、烷类、醇类、酯类、醛类等,其中异辛醇（1-Hexanol, 2-ethyl-）、己醛（Hexanal）、2-壬酮（2-Nonanone）和2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇二异丁酸酯（2,2,4-Trimethyl-1,3-pentanediol diisobutyrate）对甘薯长喙壳菌具有较强的抑制作用。选择两种安全气体成分己醛和2-壬酮按照1:1比例混合,在200 μL/L时可以完全抑制长喙壳菌的生长。该研究为拮抗微生物在果蔬采后的应用提供了参考和依据。