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相似文献
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1.
以乙基羟乙胺、升华硫、一氧化碳气体和对氯氯苄为原材料,合成羟基化杀草丹;经纯化后与琥珀酸酐反应,合成杀草丹半抗原,采用薄层层析色谱法、质谱法和红外光谱法分析鉴定为预期产物;利用碳二亚胺法将半抗原与牛血清蛋白BSA偶联制备杀草丹人工抗原,应用紫外光谱和荧光光谱法分析鉴定。结果表明,羟基化杀草丹经薄层层析展开效果良好,杀草丹半抗原经红外光谱分析具有明显的羧酸基团,有利于后续偶联操作;在26℃室温条件下制备的杀草丹人工抗原,其半抗原与载体蛋白偶联比为6.59∶1。杀草丹半抗原与杀草丹人工抗原的成功制备,可为进一步研制杀草丹抗体奠定基础。  相似文献   

2.
采用活泼酯法将三唑磷半抗原(TZPM-Hap)与牛血清蛋白(BSA)和卵血清蛋白(OVA)偶联,制备出免疫抗原(TZPM-A-BSA)和包被抗原(TZPM-A-OVA),经紫外扫描证明人工抗原合成成功.用免疫抗原TZPM-A-BSA免疫雌性Balb/c小鼠,获得了特异性的三唑磷多克隆抗体.以所获得的抗体建立间接竞争酶联...  相似文献   

3.
膝沟藻毒素GTX 2,3是一类小分子物质,不具备免疫原性,欲制备其免疫血清及抗体,则必须与偶联剂及载体蛋白偶联形成完全抗原。运用乙二醛作为偶联剂,分别与牛血清白蛋白(BSA)、血蓝蛋白(KLH)合成免疫抗原GTX 2,3-glyoxal-BSA和检测抗原GTX 2,3-glyoxal-KLH,并对经超滤纯化浓缩后的偶联产物进行BCA蛋白浓度测定、全波段紫外扫描、变形SDS-PAGE凝胶电泳和抗原免疫原性的鉴定。结果表明,免疫抗原和检测抗原的蛋白质量浓度分别为8.52 mg/m L和5.72 mg/m L;经全波段紫外扫描和变形SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,半抗原GTX 2,3-乙二醛与载体蛋白BSA、KLH偶联成功,偶联比约为1︰16和1︰20,并制备出纯度较高的免疫抗原;用制备的人工抗原GTX 2,3-glyoxal-BSA对Balb/C小鼠进行免疫,通过间接ELISA检测6免后小鼠血清效价达到1︰20 000。成功制备了具有较强免疫原性的膝沟藻毒素GTX 2,3人工抗原。  相似文献   

4.
以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外光谱法对其鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体。结果表明,巯基丙酸与丁草胺连接生成半抗原,半抗原被连接到载体蛋白上,丁草胺人工抗原合成成功,获得了丁草胺小鼠抗血清。棋盘滴定法确定包被抗原工作浓度为3μg/ml,抗血清稀释倍数为32000倍。建立了间接竞争ELISA标准曲线,丁草胺IC50为1.44μg/ml,检测限为0.47μg/ml。  相似文献   

5.
甲胺磷衍生物的合成及人工抗原的制备   总被引:2,自引:0,他引:2  
O,S-二甲基硫代磷酰氯与B-丙氨酸反应,得到一种甲胺磷的结构衍生物,经薄层层析和^1HNMR鉴定,推测预期产物生成。分别采用活泼酯法和混合酸酐法将产物与BSA、OVA偶联制备了人工抗原MZB和MGO,通过紫外光谱鉴定证明偶联成功。用TNBS比色法测定了MZB、MGO与载体蛋白的克分子结合比,分别为16:1和9:1。以MZB为免疫原免疫Balb/c小鼠,以MGO为包被抗原对小鼠血清进行间接竞争ELISA分析表明,小鼠经免疫后产生了针对甲胺磷的特异性抗体,抗血清效价为51:200,从而进一步证明抗原合成成功。本方法简便易行,为研究建立甲胺磷的免疫分析方法奠定了基础。  相似文献   

6.
目的:用两种方法合成司帕沙星人工抗原,并制备相应的鼠源多克隆抗体。方法:用混合酸酐法和DCC法将半抗原SPFX与BSA偶联制备免疫原SPFX-BSA,通过DCC法制备人工包被原SPFX-OVA,采用紫外光扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳进行鉴定与分析。免疫小鼠后,采用间接ELISA法测定多抗血清效价,阻断ELISA,鉴定其抑制价和特异性。结果:UV和SDS-PAGE鉴定结果初步表明SPFX人工抗原成功合成;动物试验表明,4只小鼠多抗血清效价均在3.2×104以上,其中1号小鼠IC50值为163.87 ng/mL,与其他竞争物无明显交叉反应,抗体特异性良好。结论:两种偶联方法均能成功合成人工抗原,制备出鼠源抗SPFX多克隆抗体,其中混合酸酐法能明显提高完全抗原的合成和免疫效果。  相似文献   

7.
刘盼  郑海涛  何计国 《食品科学》2012,33(1):200-203
目的:合成格列本脲人工抗原。方法:采用对氨基苯甲酸法制备半抗原,将半抗原分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)通过碳二亚胺法偶联制备免疫原(Gli-BSA)和包被原(Gli-OVA),利用紫外扫描进行抗原的化学鉴定,通过免疫原免疫Balb/c小鼠,间接酶联免疫吸附法测定抗血清进行生物鉴定。结果:制备了Gli-BSA、Gli-OVA的人工抗原,经紫外光谱扫描,偶联比分别为4:1和17.7:1。免疫小鼠后获得抗血清的效价均达到32000以上,半抑制质量浓度为10μg/mL。结论:成功合成了格列本脲人工抗原,并获得了格列本脲抗体,为格列本脲的免疫学检测方法进一步研究提供了实验基础。  相似文献   

8.
目的合成新型氨基甲酸乙酯(ethylcarbamate,EC)人工抗原并对其效果进行表征分析。方法用4-(二苯基羟甲基)苯甲酸对EC衍生化合成半抗原,用核磁氢谱(proton nuclear magnetic resonance, NMR)、核磁碳谱和质谱法(massspectrometry,MS)对其结构进行表征;用活化酯法将EC半抗原与牛血清蛋白(bovine serum albumin, BSA)偶联得到EC人工抗原。用紫外光谱和荧光光谱法对人工抗原进行表征并计算偶联比,用考马斯亮蓝法测定蛋白含量,间接竞争酶联免疫法鉴定其免疫活性。结果 EC半抗原结构与理论结构一致,半抗原与BSA成功偶联,偶联比为13:1,冻干粉的蛋白含量为0.695 mg/mg,用该新型人工抗原免疫小鼠,得到的抗血清效价为1:10000,且特异性较好。结论该新型氨基甲酸乙酯半抗原具有较好的免疫活性。  相似文献   

9.
氨基甲酸酯类农药速灭威人工抗原的合成与鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
孙晶玮  王硕  张燕 《现代食品科技》2009,25(10):1183-1185,1143
通过化学方法合成了两种完全突出氨基甲酸酯类农药速灭威特征结构的半抗原,并采用活化酯法与载体蛋白偶联制备成完全抗原。经动物试验鉴定合成的人工抗原可制备出高效价的抗速灭威抗体,结果表明速灭威人工抗原已成功合成,为建立速灭威残留免疫分析方法奠定了基础。  相似文献   

10.
目的建立酸性橙Ⅱ半抗原及人工抗原的合成及鉴定方法。方法将重氮化后的2-氨基-5-磺基苯甲酸与2-萘酚经偶氮反应合成带羧基基团酸性橙Ⅱ,通过碳二亚胺法将其与载体蛋白(BSA)偶联制备酸性橙Ⅱ人工抗原。采用核磁共振碳谱和氢谱对合成的酸性橙Ⅱ半抗原进行结构分析,并用紫外光谱扫描法和蛋白质电泳法鉴定酸性橙Ⅱ人工抗原并计算偶联比。结果通过偶氮反应及碳二亚胺法最终得到纯化后的酸性橙Ⅱ半抗原约47 mg,核磁结果显示成功合成酸性橙Ⅱ半抗原。经SDS-PAGE、N-PAGE和紫外光谱扫描结果均显示酸性橙Ⅱ人工抗原蛋白分子质量大于BSA,所带负电荷大于BSA,且合成后的酸性橙Ⅱ人工抗原具有吸收峰叠加效应,均表明酸性橙Ⅱ人工抗原合成成功,偶联比为20.9:1。结论此方法能够成功合成酸性橙Ⅱ半抗原和人工抗原,为进一步制备特异性酸性橙Ⅱ抗体和建立酸性橙Ⅱ的免疫检测方法奠定基础。  相似文献   

11.
以氯乙酸钠为阴离子化试剂,对阳离子瓜尔胶进行改性,采用半干法制备具有不同羧基含量的两性瓜尔胶。通过浆内添加研究了两性瓜尔胶的羧基含量和用量对卷烟纸助留助滤性能的影响,同时与阳离子瓜尔胶进行了效果对比,并考察了两性瓜尔胶和非离子瓜尔胶在卷烟纸中的复配使用效果。通过正交实验获得了制备两性瓜尔胶的优化工艺:碱化用碱量0.50%,碱化时间60min,阴离子化试剂与原料摩尔比为0.5:1,阴离子化时间3h,反应温度80℃。两性瓜尔胶用作助留助滤剂具有更好的效果,羧基含量为2%左右时,在用量为0.06%时效果较佳,纸浆打浆度下降15.5%,纸料总留着率和灰分分别提高了14.0%和151.9%;与非离子瓜尔胶按2:8复配使用时还可有效提高纸张强度。  相似文献   

12.
目的建立测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素含量的HPLC方法。方法采用Shiseido Capcell Pak C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为Ⅳ,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃(4:1)-0.04mol/L枸橼酸溶液(13:87),流速1mL/min;检测波长280nm。结果阴性对照品与样品分离良好,儿茶素的线性范围为0.0646~1.6150μg,r=0.99996,表儿茶素的线性范围为0.0818~1.0225μg,r=0.99996。儿茶素的平均加样回收率为101.06%,RSD为1.71%;表儿茶素的平均加样回收率为99.13%,RSD为1.63%。样品溶液在8h内稳定。结论此方法简便、准确、可靠,可用于该制剂的质量控制。  相似文献   

13.
尚磊  窦强 《山东食品科技》2012,(11):434-436
目的建立测定安神颗粒中酸枣仁皂苷A及B含量的方法,提供该制剂质量控制标准。方法应用高效液相色谱法.蒸发光散射检测器(HPLC—ELSD),Kromasil C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相:甲醇-水-冰醋酸(65:35:1),流速:1.0mL/min,柱温25℃,氮气流速2.0L/min,漂移管温度94℃,测定安神颗粒中酸枣仁皂苷A和B含量。结果酸枣仁皂苷A及B平均回收率分别为100.2%(RSD=1.21%)和99.88%(RSD=1.32%)。结论此方法操作简便,结果准确、可靠,可有效控制制剂的质量。  相似文献   

14.
在确定灵芝脱苦工艺的基础上,以脱苦灵芝水提液为主料,甜味剂等为辅料,采用正交试验进行了灵芝饮料的研制。结果表明,灵芝的最优脱苦工艺为:按灵芝∶95%食用酒精=1∶50(m∶v)的比例加入酒精,常温浸泡10h后过滤得脱苦灵芝;脱苦灵芝加水煮沸60min得脱苦灵芝水提液;灵芝饮料的最佳配方为:灵芝水提液∶脱苦灵芝水提液=3∶17(v∶v)、蔗糖浓度3.0%(m∶v)、阿斯巴甜浓度0.005%(m∶v)。  相似文献   

15.
气相色谱-质谱法测定藤茶挥发油中化学成分   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用固相微萃取提取藤茶挥发油,用气相色谱-质谱法分离和鉴定挥发油成分,并用归一化法测定其相对含量,共分离出78个组分,鉴定出63种化合物,其含量占挥发油组分的80.6%。藤茶挥发油主要成分:乙醇16.66%、1,3-二叔丁基苯9.44%、2-甲基癸烷4.95%、2,4-二甲基-1-癸烯4.65%、2,4-二甲基-1-庚烯4.51%、7-甲基-十一烯4.45%、2,6-二甲基壬烷4.36%、桧烯1.86%、α-蒎烯1.85%、甲酸乙酯1.83%、十三烷1.72%、β-崖柏酮1.44%、1-十一烯1.29%、2,3,5,8-四甲基-十一烷1.27%、4,6-二甲基-十二烷1.02%等,占挥发性化合物总量的76%。  相似文献   

16.
赵玉柱  李蒸  吴玉英 《造纸化学品》2008,20(3):27-29,35
以硝酸铈铵为引发剂,合成了壳聚糖丙烯酰胺接枝共聚物(CAM);结果表明,当m(丙烯酰胺)∶m(壳聚糖)=3∶1,c(硝酸铈铵)=3 mmol/L,反应温度为60℃时,合成的CAM接枝率达到239.4%,单体转化率达到79.83%;将其与Fenton试剂联用,可处理麦草浆中段废水。Fenton氧化预处理的最佳工艺为:ρ(H2O2)=2 g/L,m(H2O2)∶m(FeSO4)=2∶1,pH=4,处理时间为60 m in。絮凝阶段处理的最佳工艺为:ρ(CAM)=10 mg/L,在此条件下,处理后麦草浆中段废水CODCr去除率达82.38%,浊度去除率达到98.53%。  相似文献   

17.
张晓琦  田光兰 《饮料工业》2014,17(10):44-48
以陕南秦巴山区干燥的厚朴树叶为原料,提取树叶中的厚朴酚与和厚朴酚,并分离出挥发油,分析挥发油的组成。利用水蒸气蒸馏法提取挥发油,采用GC-MS联用技术对厚朴挥发油的组分进行分离和鉴定,利用气相色谱面积归一化法确定各组分的相对含量;利用碱提酸沉法、离心后获得厚朴酚类物质粗品,然后与硅胶按1∶1比例混合均匀,用石油醚进行索氏提取至无色,经旋转蒸发仪旋转得到厚朴酚晶体。从厚朴叶挥发油中鉴定出41种化合物,并将厚朴粗品经精制后,测得厚朴酚的熔点为101℃,和厚朴酚的熔点为86℃。厚朴叶挥发油中含量较高的组分为β—氧化石竹烯(32.0%),4—丙烯基苯酚(25.01%),喇叭醇(15.01%),龙脑香(12.01%)等。分离得到了较纯的起主要药用作用的化合物5,5′—二烯丙基—2,2′—联苯二酚(厚朴酚)和5,3′—二烯丙基-2,4′—联苯二酚(和厚朴酚)。  相似文献   

18.
油菜倒伏严重影响了油菜的产量和品质,为了定位甘蓝型油菜(Brassica napus L.)与抗倒伏性状相关的QTL,用抗倒伏品系浙平1号和易倒伏品系高芥1号组合重组自交系(RIL)家系为材料,通过两年两点试验,对该RIL群体的F2:6和F2:7,家系抗压力性状进行了QTL分析,并应用一年两点数据对该群体F2:6。家系结角层性状进行了QTL分析。结果表明,在4个试验中共检测到11个家系抗压力QTL,可解释4.41%~52.64%的表型变异,LOD值范围是2.68~26.58。其中qRP16-1可以在3个不同的试验中(南京-2012、溧水-2012和南京-2013)重复检测到,面P1、qRP4和qRP8-1同时在2个不同的试验中(溧水-2012和溧水-2013)重复检测到。qRP2-1、qRP2-2、qRP8-2、qRP8—3、qRPl6—2、qRP3和qRP8—4等7个QrL只能在特定的试验中检测到。同一地点不同年份间家系抗压力性状QTL相对同一年份不同地点间易被重复检测到。在2个试验中共检测到2个结角层厚度QTL,位于第15连锁群的qTPLl5在2个试验中重复检测到。  相似文献   

19.
肉桂酸肉桂酯是一种重要的花香型香精定香剂。本实验对有机相中脂肪酶催化合成肉桂酸肉桂酯进行研究,对酶催化条件进行了优化研究。实验结果表明:Candida anatarctic脂肪酶(Novozyme 435)有较好的催化活性。通过单因素实验考察各反应参数(反应溶剂、温度、底物摩尔比、底物浓度等)对脂肪酶Novozyme 435合成肉桂酸肉桂酯反应的影响,确定了反应最优工艺条件:在5 mL甲基叔丁基醚溶剂(分子筛脱水)体系中,肉桂醇100 mmol/L,n(肉桂醇):n(肉桂酸乙酯)=2:1,反应温度50℃,Novozyme 435脂肪酶添加量1%(质量体积比),反应36 h后反应转化率可达到55%,产物结构经气相质谱(GC/MS)鉴定。  相似文献   

20.
沙丁胺醇人工抗原合成及鉴定研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
用琥珀酸酐将沙丁胺醇活化后制备出半抗原沙丁胺醇半琥珀酸,经电喷雾电离质谱(ESI-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(^1H-NMR)鉴定合成成功,同时证实琥珀酸酐连结在沙丁胺醇乙醇胺的羟基处,且半抗原以内胺盐形式存在。用混合酸酐、活泼酯方法将沙丁胺醇琥珀半酸分别与牛血清白蛋白(BsA)和卵清白蛋白(0VA)偶联制备免疫抗原和包被抗原,经紫外吸收法鉴定偶联成功,偶联比分别为12.8:1、23:1。本研究为进一步制备沙丁胺醇抗体奠定了基础。  相似文献   

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