脂环酸芽孢杆菌的培养基筛选及优化

比较了脂环酸芽孢杆菌A.acidotcrrstris DSMZ 3922的芽孢在PDA、K培养基和SK培养基中的复苏情况,结果表明,SK培养基是三者中最适合于脂环酸芽孢杆菌生长的培养基;用正交试验L9(33)研究了Ca2+、Mn2+以及Tween 80在SK培养基中的添加浓度对A.acidotcrrstris DSMZ 3922、A.acidiphilus DSMZ14558生长情况的影响,结果表明,3因素对A.acidotcrrstris DSMZ 3922及A.acidiphilus DSMZ 14558生长情况影响的主次顺序均依次为Ca2+>Mn2+>Tween 80.在SK培养基中添加1.5g/L的Ca2+,0.1ppm的Mn2+,以及0.75mL/L的Tween 80是对A.acidotctrstris DSMZ 3922生长较为有利的组合;在SK培养基中添加1.5g/L的Ca2+,0.1ppm的Mn2+,以及0.25mL/L的Tween 80是对A.acidiphilus DSMZ 14558生长较为有利的组合.     

肌苷对酸土脂环酸芽孢杆菌生长及生物膜形成的影响

由嗜酸耐热酸土脂环酸芽孢杆菌污染酸性果汁引起的营养损失、风味劣变、沉淀等质量问题是制约果蔬加工及出口贸易的瓶颈。本文通过光密度测定、生物被膜测定、扫描电子显微镜检测、平板菌落计数、果汁理化特性及感官品质鉴定等方法,研究肌苷对酸土脂环酸芽孢杆菌生长的抑制效果及对橙汁品质的影响。结果表明,不同浓度的肌苷在酸性条件下均能高效抑制该菌营养菌体的生长繁殖,且对鲜榨橙汁的酸度、糖度、色度及口感等理化特性和感官品质无显著影响。低至5 mmol/L的肌苷添加量即可降低该菌的生物被膜形成能力,损伤菌体的细胞壁和细胞膜,导致菌体裂解死亡。在初始污染菌含量高达105 CFU/mL时,仍能将菌体的数量降低1个数量级,控制营养菌体的数量,使之不能产生达到嗅觉阈值的愈创木酚量,肌苷有望成为酸性果汁生产中抑制酸土脂环酸芽孢杆菌污染的新型高效防腐剂。     

橙汁主要营养成分及温度处理对脂环酸芽胞杆菌生长的影响

本文研究了橙汁主要营养成分和加工中温度处理等因素对两种引起已灭菌果汁腐败的主要病原微生物酸土脂环酸芽孢杆菌(A licyclobacillus acidoterrestris)和酸热脂环酸芽孢杆菌(A licyclobacillus acidocaldarius)生长的影响.结果表明,柠檬酸、蔗糖、矿质元素(钙、镁和钾元素)等橙汁中的主要营养成分在一定浓度范围内均可以促进两种脂环酸芽孢杆菌的生长.酸热脂环酸芽孢杆菌和酸土脂环酸芽孢杆菌在蔗糖浓度分别高于25％和20％时,生长受到抑制.当环境中钾浓度高于1000mg/L时,酸土脂环酸芽孢杆菌生长的生长受到抑制.在不同橙汁含量的饮料中,橙汁原汁最适合两种脂环酸芽孢杆菌的生长,而浓缩果汁中两种菌的生长量最少.温度处理实验表明,两种脂环酸芽孢杆菌分别经(-20、4、30、50、70、90℃)处理30min后,仍能保持良好的生长状态.当菌体经121℃处理30min时,生长几乎完全受到抑制.因此.橙汁饮料及橙汁原汁更容易感染酸土脂环酸芽孢杆菌和酸热脂环酸芽孢杆菌;通过巴氏杀菌很难彻底杀灭橙汁中的脂环酸芽孢杆菌,有必要寻求新型非热杀菌方法来控制橙汁中脂环酸芽孢杆菌.     

介质阻挡放电等离子体对不同pH值生长的酸土脂环酸芽孢杆菌的灭活作用

该研究探讨了介质阻挡放电等离子体对不同pH值（3.2、3.6、4.0和4.4）下生长的酸土脂环酸芽孢杆菌的杀灭作用。研究发现等离子体对最适生长pH值4.0下的酸土脂环酸芽孢杆菌杀灭效率最低,pH值升高（4.4）或降低（3.2、3.6）均引起致死率增加（P<0.05）。例如30 kV处理2 min条件下,等离子体对pH值为4.0生长的酸土脂环酸芽孢杆菌致死率为4.8个对数,对pH值为3.2、3.6和4.4生长的菌体致死率分别为5.9、5.4和5.1个对数。等离子体对不同pH值培养的酸土脂环酸芽孢杆菌致死率的差异可能与菌体形态和膜脂质成分有关。扫描电镜观察发现,pH值3.2和3.6培养的菌体出现异常伸长形态,且酸土脂环酸芽孢杆菌在pH值3.2条件下更为明显,更易被等离子损伤而导致死亡。气相-质谱联用结果表明相比于最适pH值4.0,pH值4.4生长条件下环己烷十一酸相对含量显著提高（67.86%）,而环戊烷十三酸降低（22.21%）（P<0.05）,使得等离子体产生的氧自由基等成分在细胞膜中的堆积,而导致菌体更易被杀灭。该研究表明菌体耐受性增加与酸土脂环酸芽孢杆菌细胞膜脂肪酸成分和形态变化存在一定的相关性。     

不同金属离子对丁酸梭状芽孢杆菌Z-10菌体及芽孢的影响

研究了Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、Fe2+和Cu2+6种金属离子对丁酸梭状芽孢杆菌Z-10菌体生长及芽孢形成的影响.实验结果表明,Ca2+、Mg2+、Mn2+3种离子对丁酸梭状芽孢杆菌芽孢的形成具有显著的促进作用,其中Mn2+对菌体生长的促进作用也非常显著;Fe2+可以一定程度的提高菌体的浓度,但对芽孢形成的促进作用不明显;低浓度的Cu2+对芽孢形成及菌体生长具有一定的促进作用,但浓度略高时即表现出更为显著的抑制作用;而Zn2+对丁酸梭状芽孢杆菌的菌体生长和芽孢形成都表现出明显的抑制作用.本实验最终确定在培养基中添加对菌体生长及芽孢形成均有促进作用的金属盐种类及浓度分剐为:MnSO4·H2O 1.0g/L、MgSO4·7H200.4g/L、CaCl2 0.8s/L、FeSO4·7H2O0.4g/L.     

3 种脂环酸芽孢杆菌分离培养基的性能评价

目的：比较3 个厂家的K培养基、酵母粉淀粉葡萄糖（yeast extract starch glucose medium,YSG）培养基和耐酸耐热芽孢菌（Alicyclobacillus）培养基（Bacillus acidoterrestris medium,BAT）对脂环酸芽孢杆菌的检测效果。方法：选用标准菌株、分离株及实际样品对3 个厂家（广东环凯微生物科技有限公司（简称HK,下同）、厂家Ⅰ和厂家Ⅱ）的K培养基、YSG培养基和BAT培养基进行生长菌落数及分离效果的评估。结果：酸土脂环酸芽孢杆菌标准株和脂环酸芽孢杆菌分离株4-2在K、YSG和BAT 3 种培养基上生长的菌落数（3 个厂家培养基上的菌落数平均数）均无显著性差异（P＞0.05）;酸热脂环酸芽孢杆菌标准株和脂环酸芽孢杆菌分离株5-3在K培养基上不生长,在YSG培养基和BAT培养基上生长良好,其菌落平均数统计学上无显著性差异（P＞0.05）;对实际样品中酸土脂环酸芽孢杆菌的分离,3 个厂家的同种培养基分离率和符合率相当;对实际样品中酸热脂环酸芽孢杆菌的分离,在YSG和BAT培养基上,HK和厂家Ⅱ的分离率和符合率相当,优于厂家Ⅰ。结论：K培养基不适合所有脂环芽孢杆菌,但分离酸土脂环酸芽孢杆菌效果很好,YSG培养基和BAT培养基适合所有脂环酸芽孢杆菌。HK和厂家Ⅱ的培养基优于厂家Ⅰ。     

基于近红外光谱的橙汁中酸土脂环酸芽孢杆菌的生长预测

酸土脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidoterrestris）是引起橙汁劣变的主要微生物，为研究酸土脂环酸芽孢杆菌在橙汁中的生长规律，利用近红外光谱获取橙汁中酸土脂环酸芽孢杆菌含量的信息，采用标准化（autoscale）、多元散射校正（multiplicative scatter correction,MSC）、标准正态变换（standard normal variate,SNV）、去趋势化（detrend）对光谱进行预处理，结合化学计量学，构建近红外光谱与酸土脂环酸芽孢杆菌含量预测模型。在此基础上，将近红外光谱转换为酸土脂环酸芽孢杆菌预测菌落数据，并采用“一步法”直接基于预测菌落数构建橙汁中酸土脂环酸芽孢杆菌的生长模型。结果表明，利用标准化进行光谱预处理建立的偏最小二乘（partial least squares,PLS）模型对橙汁中酸土脂环酸芽孢杆菌含量的预测效果相对较好，其预测决定系数（prediction determination coefficient,Rp2）与预测均方根误差（root mean square error of prediction...     

酸土环脂芽孢杆菌检测与控制技术研究进展

酸土环脂芽孢杆菌是造成果汁变质的一种主要腐败菌。在生产实践中快速、准确的检测手段必不可少,同时对该菌进行控制是提高产品质量、减少污染的重要环节,特别是对其耐热芽孢的抑制。通过对酸土环脂芽孢杆菌生长、代谢特性的分析,重点阐述了该菌污染的检测技术和菌种的分离、鉴定方法;同时从果汁生产环节入手探讨了控制该菌的各种方法,并指出今后应该进行的研究方向。     

酸、热胁迫条件下酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因的表达分析

本研究在克隆得到酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922T SOD基因全序列的基础上,利用荧光实时定量PCR技术分别检测酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因在酸、热胁迫条件下的表达差异。结果表明:该基因在正常生长条件下组成性表达,在酸、热胁迫下表达量在短时间内迅速上调,酸胁迫0.5 h表达量为对照组的4.63倍,胁迫1 h表达量升至最高,为对照组的32.55倍,随后表达量迅速下调,胁迫5 h时表达量降至对照组的1.67倍。70℃热胁迫5 min时SOD基因相对表达量为对照组的2.81倍,胁迫25 min时表达量升至最高,为对照组的15.05倍,随后表达量下调,胁迫40 min时表达量降至对照组的4.93倍。酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因对酸、热环境胁迫具有快速反应的特点,表明酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因与该菌嗜热耐酸的独特生理适应机制密切相关。     

植物乳杆菌对脂环酸芽孢杆菌的抑菌机理研究

脂环酸芽孢杆菌是当前许多水果饮品中的致腐菌，其中酸土脂环酸芽孢杆菌最为常见。许多被公认安全的乳酸菌对脂环酸芽孢杆菌具有抑菌活性。为了研究乳酸菌抑制脂环酸芽孢杆菌的机理，该研究从分离自中国传统泡菜的乳酸菌中，筛选出对酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922^T具有较强抑菌活性的植物乳杆菌509,采用非靶向代谢组学分析了酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922^T受植物乳杆菌509抑制时的代谢产物变化，受抑制后的酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922^T中上调的代谢物有308个，下调的代谢物有666个，它们主要位于氨基酸代谢、核酸代谢、糖代谢、TCA循环、细胞壁合成和跨膜运输等通路中，其中大部分氨基酸及其氨基酰类、核苷及其磷酸盐类等物质均受到下调。研究结果表明，酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922^T中许多参与重要生物途径的中间代谢物受到植物乳杆菌509的抑制，而这些代谢物的下调反过来又促使酸土脂环酸芽孢杆菌自身凋亡，从而达到抑菌效果。     

反应条件对糖-酸反应体系中3-脱氧葡萄糖醛酮及5-羟甲基糠醛形成的影响

为了分析糖-酸反应体系中3-脱氧葡萄糖醛酮（3-deoxyglucosone,3-DG）及5-羟甲基糠醛（5-hydroxymethylfurfural,5-HMF）的形成规律,本研究构建了果糖/蔗糖/葡萄糖-柠檬酸反应体系,探究糖种类、pH、温度、金属离子种类和含不同价态硫的化合物对3-DG及5-HMF形成的影响,并分析了二者的形成动力学。结果表明:三种糖对3-DG和5-HMF形成的影响不同,果糖和蔗糖反应体系中3-DG和5-HMF生成量远高于葡萄糖反应体系,pH降低和温度升高可促进3-DG和5-HMF形成;Ca2+、Mg2+、Al3+均对3-DG和5-HMF的形成有促进作用;K+能促进3-DG的形成,但对5-HMF的形成无显著影响（P>0.05）。Na₂S₂O₃和Na₂SO₃可以抑制3-DG及5-HMF的形成,而Na₂S₂O₅对3-DG的形成无影响,但能抑制5-HMF的形成（P<0.05）;Na₂SO₄可促进3-DG及5-HMF的形成;70~90 ℃时3-DG的形成符合零级动力学模型,而100 ℃时符合二级动力学模型;70~100 ℃时5-HMF的形成符合零级动力学模型。     

The use of chlorine dioxide to control Alicyclobacillus acidoterrestris spores in aqueous suspension and on apples

Alicyclobacillus acidoterrestris, a thermoacidophilic, spore-forming bacterium, has been identified as a spoilage organism in commercial, pasteurized fruit juices. This study was undertaken to evaluate chlorine dioxide for reducing numbers of A. acidoterrestris spores on laboratory media and on apples. A. acidoterrestris spores in aqueous suspension and on apple surfaces of four different cultivars were treated with several concentrations of chlorine dioxide. Spores in aqueous suspension treated with 40 ppm for 5 min were reduced by more than 4 log. Treatment with 80 ppm for 1 min and 120 ppm for 30 s resulted in about 1.8 log and 4.8 log reductions of spore viability, respectively, and treatment at 80 and 120 ppm for 5 min reduced spore viability to undetectable levels (<0.7 log CFU/ml). When applied to the surfaces of four different apple cultivars ('Red Delicious', 'Golden Delicious', 'Gala', and 'Fuji'), 40 ppm free chlorine dioxide reduced A. acidoterrestris spore numbers by 1.5, 3.2, 4.5, >4.8 log after 1-, 2-, 3-, and 4-min treatments, respectively. Spore numbers were reduced by >4.8 log with 120 ppm free chlorine dioxide after only 1-min treatment. However, there was no significant difference between apple cultivars (P>0.05) on spore reduction. These results show the great effectiveness of chlorine dioxide in controlling A. acidoterrestris spores both in aqueous suspension and on apple surfaces. There was no synergistic effect on spore reduction when chlorine dioxide treatment of aqueous suspension was followed by heat.     

Characterization of a wild strain of Alicyclobacillus acidoterrestris: heat resistance and implications for tomato juice

This article reports the characterization of a wild strain of Alicyclobacillus acidoterrestris and describes the implications of the heat resistance of this microorganism in tomato juice. The strain (labeled as A. acidoterrestrisγ4) showed pH and temperature ranges for growth typical of the species (3.0 to 6.0 for the pH and 35 to 60 °C for the temperature); heat resistance in tomato juice was as follows: D(T) values of 40.65, 9.47, and 1.5 min (at 85, 90, and 95 °C, respectively) and z-value of 7 °C. A treatment at 70 °C for 15 min was found to be optimal for spore activation, whereas Malt Extract Agar, acidified to pH 4.5, showed good results for spore recovery. Concerning the implications of heat resistance of A. acidoterrestris on tomato juice, high temperatures required for spore inactivation determined a general decrease of the antioxidant activity (increase of the redox potential and reduction of the chain-breaking activity), but not the formation of brown compounds (namely, hydroxymethylfurfural), thus suggesting an effect on the secondary antioxidants (carotenoids and ascorbic acid) rather than on lycopene. PRACTICAL APPLICATION: Alicyclobacillus acidoterrestris is an emerging spore-forming microorganism, capable of causing spoilage in tomato juice. Due to their high thermal resistance, spores could be used as targets for the optimization of heat processing; this article reports on the assessment of thermal resistance of a wild strain of A. acidoterrestris, then focusing on the effect of the thermal treatment necessary to inactivate spores on the quality of tomato juice.     

葡萄状枝瑚菌菌丝液体培养条件优化

为了研究液体培养条件对葡萄状枝瑚菌菌丝生长量的影响,通过单因素实验和正交试验分别考察了碳源、氮源、无机离子组合、生长因子、培养基初始pH、培养温度、摇床转速和光照这8个因素对菌丝生长量的影响,结果表明,最佳培养条件为:在23℃、摇床转速为220 r/min时,培养基初始pH6.5,装瓶量50 mL/250 mL锥形瓶,接种量10%(V/V),全黑暗培养7 d,1 L液体培养最佳培养基为25 g可溶性淀粉,3.5 g酵母粉,4.4 g(1.2 g KH₂PO₄+1.6 g FeSO₄·7H₂O+1.6 g MgSO₄·7H₂O)无机离子,0.01 g VB₁,在此条件下葡萄状枝瑚菌菌丝生长量为(26.8±0.29)g/L。此研究结果为葡萄状枝瑚菌的液体发酵奠定了基础。     

土壤盐分对烤烟各器官干物质重及矿质元素吸收分配的影响

  目的  探究土壤盐分对烤烟干物质积累和矿质元素含量的影响。  方法  采用盆栽试验，以中烟100为试验材料，以前期调查当地烟田20个样点耕层平均盐分浓度和离子组成为基准，用CaCl₂、Ca（HCO₃）₂、MgSO₄、K₂SO₄、Na₂SO₄模拟实际土壤盐分组成，分别以含3倍、6倍、9倍、12倍基准的土壤盐分状况研究对烤烟干物质重和不同器官矿质元素含量、Ca/Na、K/Na及Ca、K选择性运输能力的影响。  结果  ① 在同一生育期，随盐浓度的升高，烤烟各器官干物质重先增后降，在3倍基准浓度处理下干物质重最大，烤烟叶片中的K含量也有增加；随盐浓度的升高，K、Ca、Cu、Fe、Mn元素在部分时期的吸收受到限制。②烤烟各器官K/Na和Ca/Na随盐分浓度的升高而降低，在高盐浓度条件下，烤烟K/Na表现为根>叶>茎。③高盐浓度会在一定程度上促进茎到叶的S_K，Na和S_Ca，Na，抑制根到茎的S_K，Na和S_Ca，Na。  结论  烤烟对低浓度盐分有一定的耐受能力，但高盐浓度下，矿质营养吸收和分配平衡被破坏，影响烤烟生长发育。      

硝态铵态氮比例对不同氮效率烟草苗期氮素吸收及利用的影响

【目的】为明确最有利于烤烟和白肋烟氮素利用的氮素形态配比。【方法】采用盆栽的方法,以烤烟品种中烟100和白肋烟品种TN90为材料,设置5个硝态铵态氮比例(T1:NO₃^-:NH₄⁺=100:0;T2:NO₃^-:NH₄⁺=75:25;T3:NO₃^-:NH₄⁺=50:50;T4:NO₃^-:NH₄⁺=25:75;T5:NO₃^-:NH₄⁺=0:100),测定各处理的生物量、色素含量、硝酸还原酶(nitrate reductase,NR)和谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)活性、NH₄⁺-N含...     

EFFECT OF EDTA ON THE GERMINATION OF AND OUTGROWTH FROM SPORES OF Clostridium botulinum 62-A

SUMMARY –EDTA, in concentrations above 2.5 mM, was found inhibitory to germination of and outgrowth from spores of C. botulinum Type A and to toxin production in a fish homogenate. Inhibitory action was influenced by pH of the medium in the range pH 6.5–8.1, the action increasing with pH. It was influenced by Mg and Ca concentrations in the medium, equimolar concentrations of added CaCl₂ or MgCl₂, completely erasing the growth inhibitory action. Initial spore concentration also influenced inhibitory efficacy–the higher the spore concentration, the higher the EDTA concentration required for inhibition. There was no evidence that EDTA, in any concentration used, promoted spore germination. Release of Ca, Mg and DPA from incubating spores was suppressed to varying extents by 5.0 and 10 mM EDTA.     

Effect of Ag-containing Nano-composite Active Packaging System on Survival of Alicyclobacillus acidoterrestris

ABSTRACT: The effectiveness of Ag⁺-based antimicrobial film in inhibiting the growth of an Alicyclobacillus acidoterrestris strain was assessed. The proposed active film was obtained by depositing via plasma an Ag-containing polyethylenoxide-like coating on a polyethylene layer. Tests were conducted at 44 °C, monitoring the viable cell concentration of the investigated microorganism into 2 different media: acidified malt extract broth and apple juice. Results indicate that the investigated active film successfully inhibited the growth of A. acidoterrestris in both media. Results also indicate that the effectiveness of the film depends on the type of medium tested.     

烟草根黑腐病菌生物学特性的研究

烟草根黑腐病菌[Thielaviopsis basicola (Brek and Br) Ferraris]适于在多种自然培养基和合成培养基上生长和产孢,以藕-葡萄糖和V₈培养基最佳,培养基中增加Ca离子有利于菌丝生长和产孢。生长温度范围8-35℃,最佳生长温度24-28℃。此菌在PDA培养基上生长的pH范围3.5-9.5,最适pH5.0-6.5。内生分生孢子在20-30℃最适于萌发。碳、氮营养可促进孢子萌发,其中0.2%葡萄糖溶液最佳。黑暗条件下菌丝的生长和产孢好于光照条件。可有效利用多种碳、氮源,碳源以可溶性淀粉、麦芽糖、果糖、蔗糖、葡萄糖;氮源以谷氨酸、丙氨酸、天门酰胺利用最佳。其中可溶性淀粉、酒石酸铵、硝酸铵、氨基乙酸、谷氨酸有利于产孢。