蛋白质水解度的测定方法

测定蛋白质水解度的方法很多,它们都是依据以下三个原则:测定水解过程中释放出的氮的数量、自由α-氨基和滴定释放出的质子。本文对这些方法做了综述。     

蛋白质水解度的测定方法

测定蛋白质水解度的方法很多,它们都是依据以下三个原则:测定水解过程中释放出的氮的数量、自由α-氨基和滴定释放出的质子。本文对这些方法做了综述。      

蛋白质水解度的测定

介绍了一种新的测定蛋白质水解度的方法,该方法利用待测蛋白样品完全水解液做为茚三酮比色的标准样品测定蛋白质的水解度,并和常用的几种测定水解度的方法进行了比较,该种方法消除了由一种氨基酸做为对照样品所带来的测定误差,是一种简易行的测定水解度的方法。     

水解度对蛋白水解物的影响

通过实验证明，水解度与蛋白水解物的溶解性和分子量直接相关，进一步从凝胶色谱分析中可以看出，水解度提高时高分子量组分降低，肽链变短，溶解性提高。     

蛋白质水解度测定方法综述

对目前国内外常用的蛋白质水解度测定方法进行了综述，其中pH—state方法是通过滴定水解过程中释放的质子测定DH；OPA、TNBS及国内常用的水合茚三酮和甲醛等测定方法是利用游离氨基的反应测定DH。     

乳清蛋白水解物水解度3种测定方法的比较

选用胰蛋白酶水解乳清浓缩蛋白，对不同时问乳清蛋白水解液的水解度测定表明，pH—stat法与茚三酮比色法获得的乳清蛋白水解液的水解度基本一致．而甲醛滴定法测定的结果偏低。按本文的实验条件，pH—stat法与茚三酮比色法获得的结果最接近实际值。鉴于pH—scat法对酶的类型和水解条件有一定的要求，茚三酮比色法则无此方面限制，因此认为茚三酮比色法是目前三种方法中最适合测定乳清蛋白水解液水解度的方法。     

核桃蛋白水解物水解度测定方法比较

为比较测定核桃分离蛋白(WPI)水解物水解度最佳方法,采用Alcalase 2.4L、Protamex水解WPI,对不同时间段核桃蛋白水解液水解度测定方法进行比较。结果表明,采用内切蛋白酶Alcalase 2.4L水解WPI时,pH-Stat法和TNBS法测定结果基本一致,而甲醛滴定法测定结果偏低;而用复合蛋白酶Protamex水解WPI时,pH-Stat法和甲醛滴定法测定结果接近,但且均低于TNBS法,TNBS法测定结果与另外两法差异显著(ρ<0.05)。由于制备核桃多肽主要采用内切蛋白酶,所以可认为pH-Stat法测定WPI水解液水解度较为准确。     

胶原水解度的测定

研究了一种新的制革废弃胶原水解程度的定量评价方法,即分别测定胶原在水解反应中断裂的肽键数和胶原中的总肽键数,通过计算两者间的比值得到胶原的水解度。试验结果表明:采用该方法可以准确、直观地表征胶原的水解程度;与茚三酮比色法相比,甲醛滴定法能够更准确地测定胶原水解产物中的氨基含量,因此更适合用于胶原水解度的测定。     

微生物发酵法产大豆多肽液水解度的测定

建立了一种适于蛋白质水解液水解度测定的新方法。以脱脂豆粕粉为原料，具产蛋白酶能力的微生物为生产菌种进行发酵。微生物所产蛋白酶作用于豆粕粉中的大豆蛋白将其水解成大豆多肽。通过新建立的方法测定了不同发酵时间发酵液的水解度，并与文献所报道的常规测定方法进行比较。结果表明，新建立的水解度直接测定法快速简便，灵敏度高，可重复性强，不仅适于微生物发酵法产大豆多肽液水解度的测定，还普遍适用于其它蛋白水解液水解度的测定。     

酶水解条件对猪血血球水解蛋白的水解率及乳化性能的影响

采用正交实验法研究酶法解过中酶用量，时间ＰＨ值，温度四因素对猪血球水解蛋白水解率及乳性能的影响。结果表明：不同酶解条件对水解率产生较大影响，而水解率大小与乳化性能密切相关。