香豆素类化合物清除自由基及抗肿瘤活性研究

运用电子顺磁共振(EPR)和细胞增殖检测试剂盒(MTS)两种方法研究4个双羟基香豆素化合物及天然产物V_C的清除DPPH自由基及抗肿瘤细胞增殖的能力。结果表明,香豆素化合物清除DPPH自由基EC_(50)值和抗肿瘤细胞增殖活性IC_(50)值的范围分别为9.04μmol/L~37.32μmol/L和21.76μmol/L~38.48μmol/L,均优于V_C自由基清除能力(EC_(50)为42.44μmol/L)和抗肿瘤细胞增殖能力(IC_(50)为100μmol/L)。其中,化合物1a的清除自由能力最强(EC_(50)为9.04μmol/L),化合物2b的抗肿瘤活性最高(IC_(50)为21.76μmol/L)。因此,与V_C相比,4个双羟基类化合物表现出较强的自由基清除能力和抗肿瘤细胞增殖活性,为具有癌症防治功能的天然产物抗氧化剂的开发利用提供理论基础和试验依据。     

小花八角多糖提取优化工艺及自由基清除作用研究

小花八角多糖是一种水溶性天然多糖,本文研究了小花八角多糖的提取工艺及其清除自由基的能力。通过单因素实验和正交实验,结果表明,小花八角水溶性多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度75℃、料液比1∶14、提取时间2h、超声波功率300W,水溶性小花八角多糖的得率为0.83%。进行清除自由基活性研究,结果显示,小花八角多糖具有清除自由基的作用。      

打瓜不同部位的可溶性总糖分析与水溶性多糖的自由基清除活性

分别测定了打瓜外皮、内皮、瓤和籽中的蛋白质和可溶性总糖,再提取各部位多糖并测定其自由基清除活性。实验结果表明,在干打瓜外皮、内皮、瓤和籽中蛋白质含量分别为6.65%、1.22%、5.60%和30.04%。在鲜瓜外皮中可溶性糖含量为33.94mg/g,鲜内皮中为29.77mg/g,鲜瓤中为58.94mg/g,干籽中为32.95mg/g。用醇沉法由鲜外皮、内皮、瓤和干籽中所得的提取物中多糖含量分别为33.29%、28.05%、93.39%和15.77%,鲜外皮、内皮、瓤和干籽中多糖含量分别为0.17%、0.016%、0.19%和1.59%。外皮、内皮、瓤和籽的水溶醇沉提取物对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基具有一定的清除能力。其中打瓜外皮、内皮、瓤和籽提取物对羟基自由基清除,以及打瓜内皮提取物对DPPH的清除能力好于同浓度维生素C。      

微波提取鱼腥草水溶性多糖清除自由基特性的研究

以鱼腥草干粉为原料,经微波萃取、脱色、脱蛋白等工艺得到鱼腥草水溶性粗多糖,多糖得率7.28%;并用甲基紫褪色光度法和邻苯三酚自氧化法测定粗多糖对羟基自由基·OH和超氧自由基的清除效果,结果表明其自由基清除效果与多糖浓度呈量效关系,对两种自由基50%清除率的最低浓度(EC50)分别为0.6%和6.25mg/mL。     

黄芪多糖的提取及其对自由基的清除作用

用水浴浸提法提取黄芪多糖，有最高得率。其工艺条件为：固液质量比1：60，乙醇浓度80％，于90℃水浴提取3h。黄芪多糖提取液对自由基的清除作用也进行了研究。     

天麻多糖提取与自由基清除作用研究

目的:研究活性天麻多糖的提取与自由基清除作用.方法:以水提醇沉法制备天麻粗多糖,CTAB季铵盐络合法、凝胶过滤柱层析进一步纯化;利用Feton体系和邻苯三酚自氧化反应,采用比色法测定天麻多糖对OH·及O2-·自由基的清除作用.结果:通过正交实验获得天麻多糖提取工艺为料水比1:40、浸提温度80℃、提取次数2次,75%乙醇沉淀;在相同的试验体系浓度下,天麻粗多糖及纯化多糖对OH·的IC50分别为1.18、1.62 mg/mL;对O2-·的IC50分别为0.81、1.03 mg/mL.结论:天麻多糖对氧自由基具有较佳清除能力.     

芜菁多糖提取工艺及清除自由基活性的研究

在单因素实验的基础上,应用响应面法对芜菁多糖的提取工艺进行优化。测定了芜菁多糖清除自由基的活性。结果表明:芜菁多糖的最佳提取工艺为,浸提温度80℃,浸提时间2.5 h,液料比(30∶1)(mL∶g)。此条件下芜菁多糖的得率为8.858%,接近于理论值。芜菁多糖的体外清除自由基活性实验证明,芜菁多糖(WJc)对羟自由基的清除活性较好。     

沙参多糖对自由基的清除作用

以北沙参为原料,利用微波技术及水提醇沉法提取沙参多糖.利用Feton体系和邻苯三酚自氧化反应,采用比色法测定沙参多糖对羟基及超氧自由基的清除作用,沙参粗多糖对OH·的半抑制率IC50为0.22mg/mL;对超氧自由基的半抑制率IC50为0.25mg/mL.结果表明,沙参多糖对羟基自由基和超氧自由基均有清除作用,对羟基自由基的清除能力更强.     

水溶性酸浆果多糖的提取及清除自由基作用的研究

采用热水提取、乙醇沉淀法,从酸浆中提取到水溶性粗多糖,产率为4.24%,经DEAE-32离子柱层析、Sephadex G-100凝胶柱层析纯化得水溶性酸浆多糖,体外实验证明该多糖具有清除·OH和O-2·的作用,EC50分别为0.149mg/mL和0.277mg/mL。     

仙人掌多糖清除自由基的研究

本文研究了仙人掌水溶性多糖的提取及对Fenton反应产生.OH和过硫酸铵/N,N,N,,N,-四甲基乙二胺(AP-TEMED)体系产生的氧自由基的清除效果。结果表明以水为溶剂提取仙人掌多糖的得率为2.821%,纯度为24.76±1.20%。提取物经乙醇沉淀后,得到纯度为77.52%±1.19%的粗多糖。仙人掌粗多糖清除自由基的能力与其浓度呈线性关系,1000mg/L的多糖溶液对.OH和O2-.自由基的清除率分别为63.00%和57.06%。     

红薯梗中清除自由基活性成分的研究

本实验将红薯梗以甲醇粗提后,再用有机溶剂梯度萃取,并测定了各组分清除DPPH•以及O2-•自由基的活性。实验结果表明,红薯梗各提取物对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH•)和O2-•自由基有程度不同的清除作用。对两种自由基的清除均以乙醚组分效果最好,其中清除DPPH•的活性为同浓度茶多酚的1.6倍。提纯后的乙酸乙酯的主要组分,经紫外、可见分光光度计法的测定推测,其结构类型应为二氢黄酮类。     

滑子菇多糖的免疫活性及抗肿瘤作用

本文选用豚鼠血清为补体的模型进行体外抗补体实验的检测、采用体外对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7的毒性试验、腹腔巨噬细胞吞噬中性红活性能以及刺激巨噬细胞产生NO和H2O2的能力来研究滑子菇多糖的免疫活性;通过对人体前列腺癌22Rv.1细胞和人体肝癌Hep 2B细胞增殖的抑制作用试验对滑子菇多糖的抗肿瘤活性进行研究。实验显示,滑子菇多糖具有较好的抗补体活性,并且活性随多糖浓度增大而增强,多糖浓度达到12.5 mg/mL活性变化不大,多糖浓度在0.005-0.5 mg/mL范围在一定程度上能够促进巨噬细胞的增殖,能增强腹腔巨噬细胞吞噬中性红活性能,并且促进巨噬细胞分泌NO和H2O2能力,表明滑子菇多糖具有较好的免疫活性;对人体前列腺癌细胞和人体肝癌细胞这两种癌细胞具有较强的抑制作用,并且活性与浓度呈现量效关系。     

3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力比较分析

目的：研究玉木耳、黑木耳与毛木耳3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力。方法：利用水提醇沉法获得了3 种木耳的多糖,并测定了其多糖含量;采用分光光度法分别测定了3 种木耳多糖的总抗氧化能力,羟自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和亚硝酸根离子清除能力;同时进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌实验。结果：相同提取条件下,玉木耳、黑木耳与毛木耳的粗多糖提取率分别为13.87%、11.26%、7.91%,其中3 种木耳多糖质量分数分别为49.22%、41.50%和37.97%;总抗氧化活性检测结果显示毛木耳多糖的总抗氧化能力最高,黑木耳多糖与玉木耳多糖抗氧化能力相当;其中玉木耳多糖对羟自由基清除能力略强于黑木耳多糖,且二者的超氧阴离子自由基清除能力相当,均强于毛木耳多糖;3 种木耳多糖对DPPH自由基的清除作用较明显,其中玉木耳多糖相对较优,可达80%;此外,黑木耳多糖对亚硝酸根离子的清除能力最好,略优于其他两种木耳多糖。对常见细菌的抑制作用而言,3 种木耳多糖均对大肠杆菌有一定的抑制作用,但黑木耳多糖和毛木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制作用较弱;仅玉木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有较好的抑制作用。结论：3 种木耳多糖具备各自不同的抗氧化活性与抑菌能力,且差异较为明显。     

扛板归多糖对HepG2 细胞增殖的体外抑制作用评价

为评价扛板归多糖体外抗肿瘤活性,通过细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）方法测定扛板归多糖对HepG2细胞的体外增殖抑制作用。运用5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2′-deoxyuridine,EdU）增殖试验、细胞Hoechst染色试验、线粒体膜电位检测试验、蛋白质免疫印迹试验探究扛板归多糖对肝癌HepG2细胞的抑制作用机制。结果表明：扛板归多糖可以显著抑制HepG2细胞增殖,并呈一定的剂量依赖性,半数抑制浓度为130.81μg/mL。在扛板归多糖作用下,HepG2细胞细胞核固缩、细胞核碎片增加,表现出凋亡特征。扛板归多糖使HepG2细胞线粒体膜电位显著下降;电压依赖性阴离子通道1(voltage-dependent anion channel l,VDAC1)、Bax、Caspase-3蛋白表达显著上调,而Bcl-2、Mitofusin2蛋白表达下调,均呈现量效相关性。综上,扛板归多糖能够抑制HepG2细胞增殖,可能与影响线粒体功能促进细胞凋亡有关。     

红凤菜中活性物质的提取及对超氧阴离子自由基的清除作用

本文研究了红凤菜不同溶剂提取物对超氧阴离子自由基的清除作用,发现水提取物有较好的清除作用,进一步采用正交实验设计确定水提取最佳工艺,并就其抗氧化性与VC、白菜、芹菜、青椒、紫甘蓝等进行了比较。实验结果表明:红凤菜提取物对超氧阴离子自由基O2·有较强的清除作用,在浓度为750μg/ml时,对O2·的清除率即可达到73.04%,水提取最佳工艺为:浸提温度30℃、固液比1:40、浸提时间为2h。--     

长白落叶松3种黄酮化合物定性、定量分析及其抗氧化活性研究

以我国东北地区长白落叶松锯末子为研究对象,通过HPLC-MS/MS方法定性定量分析长白落叶松中主要黄酮成分及含量,并测定其抗氧化活性。结果显示,长白落叶松主要含三种黄酮,分别为二氢槲皮素(92.07%)、香橙素(2.39%)和圣草酚(0.19%)。抗氧化活性实验结果表明,长白落叶松黄酮提取物和二氢槲皮素均表现出极强清除自由基与DPPH相结合的抗氧化活性,二者浓度分别在0.2 mg/mL时达到92.21%和93.45%,超过BHT;在ABTS实验中,落叶松提取物表现较强的活性,浓度在0.05 mg/mL清除率达到91.43%,二氢槲皮素在浓度为0.2 mg/mL时清除率升高到93.45%,均表现较强的抗氧化活性。而香橙素和圣草酚对DPPH自由基和ABTS自由基的清除活性都表现较弱,均低于50%,抗氧化能力较弱。     

不同提取方法对兰州百合多糖结构及抗氧化活性的影响

以兰州百合为原料,研究微波辅助、超声波辅助及超声波复合酶法三种不同提取工艺对百合多糖结构组成的影响,并对其抗氧化活性进行了比较分析。通过微波辅助、超声波辅助及超声波复合酶法分别从兰州百合鳞茎中提取多糖(LPS),经醇沉、脱蛋白、冷冻干燥后得到3种百合多糖为LPS-M、LPS-C和LPS-CE。红外光谱分析结果表明,LPS-M、LPS-C、LPS-CE在3378 cm~(-1)、2931 cm~(-1)、1640 cm~(-1)、1060 cm~(-1)都有吸收峰,此为多糖的典型红外光谱特征吸收峰;通过GC-MS测定单糖组成分析表明3种多糖的单糖组成类型成分相同,主要由甘露糖、葡萄糖组成,但单糖的摩尔比有所不同,分别为5.2:4.9、5.1:4.7和4.8:5.3。通过清除羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基及还原力测定试验表明,3种多糖具有不同程度的抗氧化活性,LPS-CE的体外抗氧化活性要显著高于LPS-C、LPS-M。因此,可将超声波复合酶法作为提取功能性兰州百合多糖的首选方法。