罗丹明6G流动注射荧光法测定蛋白质

以荧光染料单体和二聚体平衡转化为基础，提出了用罗丹明6G荧光染料作为生物探针测定蛋白质的方法，罗丹明6G在十二烷基磺酸钠存在下形成二聚体，蛋白质的定量加入可以使二聚体解聚，调节单体和二聚体的平衡转化，采用流动注射法进行分析，该法线性范围宽，灵敏度高，反应速度快，准确度高，抗干扰能力强。     

微流控实时荧光聚合酶链式反应成像非均匀性的校正

综合参考标样法和定标校正法的思想,提出了一种用于校正微流控实时荧光聚合酶链式反应(PCR)系统荧光成像非均匀性的”多目标像素区域定标线性校正”算法,以提高其检测结果的准确性.以与PCR荧光标记物SYBR Green光谱特性相似的荧光素钠溶液为样本,检测了11种不同浓度的均匀荧光素钠溶液受激发射荧光信号的强度,分析了各个目标像素区域荧光强度和荧光素钠溶液浓度之间的线性响应关系,采用两点定标校正方法计算了CCD各个目标像素区域的校正系数矩阵.实验表明,3种浓度荧光素钠溶液的成像均匀度分别从校正前的71.28％、72.01％、70.73％提高到校正后的77.49％、80.07％、90.64％;微流控四腔芯片中相同浓度的DNA样品在PCR扩增阶段的Ct值相对标准偏差由校正前的4.38％、1.94％、3.31％减小到校正后的2.44％、0.79％、1.31％,显著提高了微流控实时荧光PCR检测结果的准确性.     

用于荧光检测的现场聚焦电泳浓缩装置

应用聚焦电泳原理，设计了一种用于荧光检测的现场浓缩装置。本装置是一种改进型的比色池，可作为荧光计的标准配件。以检测溴酚蓝、荧光素钠为例，装置的浓缩效率达67％，使荧光强度增强32．5倍。     

催化荧光法测定环境水样中痕量对苯二酚

在H2SO4介质中,痕量对苯二酚对溴酸钾氧化二氯荧光素(DCF)的反应具有显著的催化作用,据此建立了催化荧光法测定水样中痕量对苯二酚的新方法。在最佳测试条件下,荧光强度降低值(△F)与对苯二酚浓度在0~1.0μg/mL范围内呈良好的线性关系,方法的检出限为0.037μg/mL。该方法可用于环境水样中痕量对苯二酚的测定,结果满意。     

基于相调制法的荧光寿命检测系统设计

文中分析了荧光寿命产生及检测原理。针对传统相位法荧光寿命检测系统结构复杂、成本高的问题,根据相调制法检测原理设计了荧光寿命检测系统,对系统整体结构和各部分电路模块原理进行了分析。调试系统后通过此系统对荧光素钠溶液的荧光寿命进行了检测,测量结果较准确。实验结果表明,此系统结构简单,降低了原有方案的成本。     

基于固定荧光素胺的PH计

研制一种基于荧光特性随PH值或金属离子浓度而变化的固定试剂的传感器,是当前人们很感兴趣的一个课题。为此,我们首先研究了基于固定荧光素胺的PH计。之所以作这种选择是因为它的操作简便,胺的化合物易于固定于固态载体上,而且,荧光素是一种有效荧光团。此外,酸碱反应很快,而其动态变化较慢,不会出现复杂的情况。这种基于固定荧光素试剂的PH计是具有生命力的,并且我们已经找到了它的某些特性。试验情况     

荧光法研究二氧化硫衍生物与牛血清白蛋白的相互作用

目的:研究二氧化硫衍生物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.方法:用荧光猝灭光谱法和紫外可见吸收光谱法分析BSA及BSA-二氧化硫衍生物相互作用后体系的光谱特征.结果:①在不同温度下,二氧化硫衍生物能使BSA的内源荧光发生有规律的猝灭,猝灭作用可能为静态猝灭.②得出了二氧化硫衍生物和BSA相互作用的热力学常数、结合常数和结合位点数;相互作用力主要为氢键和范德华力,且作用力较弱.③三维荧光光谱表明,二氧化硫衍生物对BSA的构象影响不明显.结论:二氧化硫衍生物与BSA可能的结合方式为二氧化硫衍生物与蛋白质的氨基酸残基发生结合反应,生成不发荧光或者荧光强度较弱的基态复合物,使BSA荧光发生部分猝灭,但对BSA构象影响不明显,具体作用机制还需进一步探讨.     

蛋白质／多肽的毛细管电泳-激光诱导荧光检测分析方法发展

毛细管电泳（CE）与激光诱导荧光检测器（LIF）联用为蛋白质／多肽类样品提供了一种快速、灵敏的分析方法。选择并开发合适的荧光衍生化试剂，建立并优化相应的衍生、分离过程，使用并发展高性能、低成本的激光诱导荧光检测器件是实现高效分离、高灵敏度检测的有效途径。本文将各荧光衍生化试剂以激发光源归类，在探讨常用荧光衍生化试剂特性的基础上，对近几年蛋白质／多肽类样品的毛细管电泳-激光诱导荧光分析方法发展加以系统综述。     

快速定量检测大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌方法

通过实验得到快速定量检测大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌的两种方法。在封闭体系中培养大肠埃希氏菌等微生物,用分光光度计和荧光光度计连续检测或定时检测培养液吸光强度和荧光强度随时间的变化,并建立微生物生长曲线,确定吸光强度和荧光强度检测阈值。据此测定达到阈值吸光强度和荧光强度所需时间,推导并验证了检测时间与菌初始浓度之间的线性关系,建立阈值检测曲线。利用定时培养检测方法建立定时检测曲线。采用上述两种定量方法所有微生物检测约10h可完成。     

应用流式细胞仪的常见问题及解决对策

针对流式细胞仪在生物样品检测中的常见问题,介绍从荧光素的选择、荧光补偿、设门及参数优化几个方面所采取的对策。