白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的提取纯化及活性测定条件优化

为开发一种简单、有效、低成本的α-淀粉酶抑制剂(α-AI)提取纯化工艺及探索其活性测试最佳条件,本研究以白芸豆为原料,采用水提法从中提取α-AI。首先对3,5-二硝基水杨酸(DNS)微孔法测定α-AI活性的条件进行了研究;随后在单因素基础上,通过正交试验确定了α-AI提取的最佳工艺条件,并通过酸沉-醇沉、超滤和透析对其进行了纯化。结果表明,DNS微孔法测定α-AI活性的最佳条件为:测定波长为482 nm、DNS用量为80μL、反应时间为15 min、静置时间为10 min;α-AI提取的最优工艺为:提取温度为45℃、提取时间为2.5 h、提取p H为6.6、液料比为7.5;经纯化后得到了较纯的、活性较高的α-AI,其IC50为0.89±0.04 mg/mL,提取率为(1.92±0.23)%。该提取纯化工艺可为α-AI的低成本工业化生产提供一定的指导意义。