荧光PCR方法定量检测食品中香菇成分

摘要：【目的】为辨别出口商品和国内市场中谎报香菇成分、以次从好的菌菇产品，准确核定菌菇产品的价格，打击出口骗税等不法行为，特应急研究开发本方法。【方法】选取香菇基因组单拷贝核基因Hydrophobin Protein基因，设计香菇种属特异性引物，扩增107 bp的片段，用于荧光PCR定量检测。分别以3种香菇作为阳性对照和14种非香菇菌种、植物产品作为阴性对照，测试实时荧光PCR引物和探针的特异性。以香菇标准DNA进行8个浓度梯度稀释，测试本定量方法绝对定量限。制备12个梯度含量的香菇DNA样品，测试香菇相对含量的标准曲线。【结果】结果表明本研究建立的香菇荧光PCR定量检测方法对香菇物种的特异性好，与其他食物物种无交叉结果，荧光PCR扩增效率为0.90，绝对定量限LOQ为0.01 ng和含量检测LOQ为0.05％。【结论】本方法重复性和实用性好，可以满足食品和调味料中香菇含量定性定量检测要求。