嗜盐古菌Halorussus sp.XZYJ18产胞外蛋白酶特点及其酶学性质

通过脱脂牛奶平板从分离自我国西藏芒康盐井古盐田的133株嗜盐古菌中筛选获得11株产胞外蛋白酶菌株,其中XZYJ18产蛋白酶能力最强。16SrRNA基因序列分析表明XZYJ18为Halorussus属的新种。XZYJ18在对数生长后期开始大量合成胞外蛋白酶,营养丰富的培养基抑制胞外蛋白酶合成。XZYJ18胞外蛋白酶在55℃,pH 8.0和0mol/L NaCl的条件下酶活最高,在酸性、碱性、低盐或高盐条件下均具有良好的稳定性,因而能够在不同的环境中催化蛋白质水解。     

醋醅中细菌菌株的分离鉴定及系统学分析

对取自陕西省的醋醅中分离得到的菌株进行16S rRNA基因序列的系统学分析.通过聚合酶链式反应(PCR)的扩增,结合16S rRNA基因序列的同源性分析,比较未成熟醋醅样品与已成熟醋醅样品中细菌组成的差异,并构建两者的系统发育树.结果表明,未成熟醋醅样品呈现较高的细菌多样性,并且在设定一个假定阈值后,2个醋醅样品中的优势种群均为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),仅在数量上存在差异.     

脉冲磁场对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭效果的验研究

通过试验,考察了脉冲磁场对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭效果的影响.试验结果表明,脉冲数(杀菌时间)和磁场强度对两株菌的杀菌效果影响显著,脉冲数增至20以后,杀菌效果趋于稳定;脉冲数对杀菌效果的影响大于磁场强度.     

脉冲磁场对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭效果的试验研究

通过试验,考察了脉冲磁场对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭效果的影响。试验结果表明,脉冲数(杀菌时间)和磁场强度对两株菌的杀菌效果影响显著,脉冲数增至20以后,杀菌效果趋于稳定;脉冲数对杀菌效果的影响大于磁场强度。     

猪肺血管紧张素转化酶的提取纯化及其性质研究

新鲜猪肺均浆离心后,经35%～55%饱和度的硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析、DEAESephadex A-50阴离子交换后,得到经SDS-PAGE显示为一条带的ACE纯品。200g猪肺可制备出ACE347.09U,比活力29.029U/mg,活力回收12.53%。用双倒数作图法得出ACE的酶反应动力学常数Km为3.168mmol/L,Vmax为6.165nmol/min。两个月的保藏后,试验证明所提酶活力保持稳定。     

一平浪盐矿产蛋白酶嗜盐古菌的鉴定及其酶学性质

从分离自一平浪盐矿的嗜盐古菌中筛选产胞外蛋白酶菌株,并对所产蛋白酶的酶学性质进行初步研究。结果表明,2株高产胞外蛋白酶嗜盐古菌YPL20和YPL26为盐矿盐古球菌（Halococcus salifodinae）。YPL20胞外蛋白酶最适反应条件为50℃,p H9.0和0 mol/L Na Cl。YPL26胞外蛋白酶最适反应条件为50℃,p H7.0⁹.0和2.5 mol/L Na Cl。它们具有良好的热稳定性、酸碱稳定性和盐度耐受性。Mn²⁺、Ca²⁺对YPL20和YPL26的蛋白酶活性均有促进作用,而Cu²⁺、Zn²⁺均有抑制作用。丝氨酸蛋白酶抑制剂完全抑制YPL20和YPL26的蛋白酶活性,说明YPL20和YPL26的胞外蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。      

腌制盐中可培养嗜盐古菌多样性研究

以我国不同产地的三种海盐(海湾、中盐、小伙子)和两种湖盐(雪天、茶卡)为研究对象,采用纯培养法分离其中的嗜盐古菌,结合16S rRNA基因序列分析、多样性指数和Bray-Curtis距离,探究腌制盐中可培养嗜盐古菌的多样性。结果发现,两种加碘盐(海湾和雪天)样品中嗜盐古菌总数最少,中盐样品中嗜盐古菌总数最多。腌制盐样品中含有大量嗜盐古菌新类群,中盐和小伙子样品中嗜盐古菌群落多样性较大。Bray-Curtis距离分析表明,雪天和茶卡两种湖盐的嗜盐古菌群落组成较相似。腌制盐含有较丰富的嗜盐古菌,且不同腌制盐的嗜盐古菌群落结构存在差异。     

柴达敏盐湖产胞外蛋白酶嗜盐古菌的筛选及其酶学性质

从分离自内蒙古柴达敏盐湖的嗜盐古菌中筛选高产胞外蛋白酶菌株,并对所产蛋白酶的酶学性质进行初步研究。结果表明,2株高产胞外蛋白酶嗜盐古菌CDM10和CDM12为新的分类单元。CDM10胞外蛋白酶最适反应条件为70~75℃,pH 8.0~9.0和1.5 mol/L NaCl。CDM12胞外蛋白酶最适反应条件为60~75℃,pH7.0~9.0和1.5~2.5 mol/L NaCl。它们具有良好的热稳定性和盐度容忍性。抑制剂实验表明CDM10和CDM12的胞外蛋白酶是丝氨酸蛋白酶,半胱氨酸和金属离子对于蛋白酶活性的发挥具有重要的作用。     

两株嗜盐古菌所产C_(50)类胡萝卜素的鉴定及抗氧化活性

采用紫外-可见光谱法、薄层层析和高效液相色谱-质谱联用技术对两株嗜盐古菌所产的类胡萝卜素进行组分鉴定、含量分析以及各组分的抗氧化能力研究。结果表明,解脂盐红菌的类胡萝卜素中菌红素占84.91%,单脱水菌红素占7.87%,双脱水菌红素占4.03%。海滨盐水红菌的类胡萝卜素中菌红素占94.86%,单脱水菌红素占1.17%。利用硅胶柱层析纯化得到菌红素、单脱水菌红素和双脱水菌红素组分,其对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力均呈浓度依赖性,并显著高于同浓度的β-胡萝卜素,提示嗜盐古菌C_(50)类胡萝卜素具有较高的抗氧化活性。本研究为天然类胡萝卜素资源的开发利用提供了理论基础。     

嗜盐古生菌Halogranum rubrum RO2-11胞外蛋白酶酶学特性研究

对嗜盐古菌Halogranum rubrum RO2-11所产胞外蛋白酶的特性进行初步研究,脱脂奶粉平板法验证其是否可以产生胞外蛋白酶,福林酚法测定胞外蛋白酶酶活。试验结果表明,嗜盐古菌Halogranum rubrum RO2-11可以产生胞外蛋白酶,此蛋白酶对高浓度的Na Cl有一定的耐受性;酶促反应的最佳温度为50℃,在温度超过60℃后,对温度的耐受性下降;最佳p H为8.0,在p H 8.0~11.0之间有较高的活性并保持相对稳定,表明该酶是一种碱性蛋白酶;金属离子Ca2+对该蛋白酶有激活作用,Mn2+、Cu2+对该蛋白酶有抑制作用;金属螯合剂EDTA对蛋白酶有强烈的抑制作用,有机溶剂异丙醇、巯基反应物DTNB和丝氨酸抑制剂PMSF对酶活力的影响很小,表明该蛋白酶是一类不含巯基的金属蛋白酶,并且能够耐受一定浓度的有机溶剂。