桥面铺装病害问题试探

桥面铺装即行车道铺装（也就是桥面保护层），直接承受行车荷载，梁体变形和环境因素的作用。其变形和应力特征与主梁及桥面板结构型式密切相关。一方面可分散荷载并参与桥面板能受力，防止车辆轮胎或履带直接磨耗行车道板，保护主梁免受雨水侵蚀并对车辆集中荷载起分布作用，     

7度区八层砖混住宅的抗震设计体会

笔者最近在某7度区采用240砖墙设计了一些八层住宅,已经竣工。现将主要的设计思路、设计中遇到的问题及其解决措施予以初步总结,请专家同行不吝赐教,予以批评指正。     

酸奶中长双歧杆菌PCR计数方法的建立

根据细菌保守序列设计一对通用引物,扩增细菌16S rDNA序列,作为阳性标记;根据长双歧杆菌菌株的16S rRNA和23S rRNA之间的间区基因序列设计定性PCR引物。用BBL琼脂平板对长双歧杆菌混合发酵的酸奶进行培养计数,随机挑选部分长出的菌落,提取DNA做PCR鉴定。将PCR技术与传统平板计数技术结合起来,初步建立酸奶中长双歧杆活菌计数方法。抽提方法操作简便、高效、灵敏,决定着PCR计数方法的准确高效,本研究着重研究了菌体DNA抽提方法的影响因素,以及抽提方法通用性,同时也研究了PCR引物的特异性。将PCR技术与传统平板计数技术结合起来,初步建立酸奶中长双歧杆活菌计数方法。      

开菲尔粒中高产蛋白酶菌株的筛选及培养基优化

采用脱脂乳粉平板初筛法,从开菲尔粒中分离得到10株有明显水解圈的蛋白酶产生菌,对脱脂牛奶平板上透明圈/菌落直径比(HC)>2.00的KX-1、Kx-3、Kx-7三株菌通过时间-酶活曲线进行复筛,得到酶活最高(发酵30 h、酶活146.43 U/mL)的菌株Kx-7。利用单因素试验对培养基进行优化,在此基础上利用Plackett-Burman(PB)试验设计法对影响蛋白酶活性的重要因素进行筛选,结果表明果糖,酪蛋白和Triton X-100,3个因素对产酶影响显著。     

植物乳杆菌ST-Ⅲ活菌计数方法

根据植物乳杆菌ST-Ⅲ的基因序列设计多对菌株特异性引物,和细菌16S rRNA通用引物一起组合,筛选设计菌株特异性计数多重PCR。待测样品先用MRS琼脂平板进行培养计数,随机挑选一定数量的单菌落,提取DNA,做PCR鉴定。将传统平板计数技术与多重PCR技术有机地结合起来,初步建立了产品中植物乳杆菌ST-Ⅲ菌株特异性活菌计数方法。     

长双歧杆菌PCR快速定向筛选方法

传统筛种方法具有随机性、盲目性,而PCR筛菌,增加了目的性和效率.在基因序列数据库中查找益生双歧杆菌的16S rDNA共有序列,找出它们共有的特异性序列,设计了PCR引物.平板培养分离,初步筛选双歧杆菌菌落.根据细菌16S rDNA和23S rDNA两侧高度保守区域设计通用引物,提取菌落基因组DNA,扩增16S-23S rDNA间区序列,并送测序.通过序列同源性比对分析,鉴定、筛选到人体长双歧杆菌.     

响应面法优化嗜麦芽窄食单胞菌产蛋白酶发酵培养基

目的:通过对嗜麦芽窄食单胞菌（Kx-7）的发酵培养基进行优化来提高蛋白酶活力。方法:首先利用单因素实验确定影响Kx-7产蛋白酶的碳源、氮源及表面活性剂的种类和浓度范围;在此基础上,应用Box-Behnken实验设计对影响蛋白酶活力的显著因素进行优化,最终建立了以蛋白酶活力为响应值的二次回归方程模型,获得了最适的Kx-7产蛋白酶发酵培养基。结果:具有显著效应的三个因素分别为D-果糖,酪蛋白和Triton X-100,三者最佳浓度分别19.15g/L、4.05g/L和5.1mL/L。优化后嗜麦芽窄食单胞菌Kx-7产酶酶活提高到324.56U/mL,比初始酶活146.43U/mL提高了1.2倍。结论:响应面实验优化了Kx-7发酵培养基,大大提高蛋白酶的产量,有望用于大规模生产。