实时定量PCR法对羊肉中鸡源性成分的量化检测

为实现羊肉中鸡源性成分的量化检测,本文利用实时荧光PCR技术,通过在单拷贝基因上设计引物,DNA标准曲线绘制以及确定羊肉,鸡肉质量与DNA数学换算参数等方法,对四种不同掺混比例的鸡肉、猪肉混合样本掺混的质量百分比进行分析。结果显示,检测百分比与理论混合百分比间的绝对误差控制在5%以内,量化研究结果准确,该法为食品安全检测工作提供了技术支撑。     

提升副溶血性弧菌检验前增菌速度

为有效缩短前增菌时间并打破副溶血性弧菌快检的技术瓶颈,研究通过优化培养基配方和培养条件,探索提升副溶血性弧菌前增菌速度的技术方法。通过单因素和响应面分析确定最适培养基配方为：大豆蛋白胨7.4 g/L、酵母浸粉9.8 g/L、牛心浸粉20.6 g/L,Na Cl 30.0 g/L,p H8.0。最佳培养条件为：温度36℃,转速180 r/min。应用优化的增菌培养方法,对副溶血性弧菌增菌培养6h后,即可获得满足荧光聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)检测灵敏度要求的增菌液。在添加食品基质的样本中,与GB 4789.7增菌方法相比,优化的增菌培养方法表现出了较高的增菌效率。研究结果表明,改良培养基配方和改善培养条件均可以有效缩短副溶血性弧菌检测的前增菌时间。大幅缩短增菌时间可以为实现食源性致病菌快检奠定基础。     

实时定量PCR法对牛肉中鸡源性成份的量化检测

目的实现样品中牛源性成份和鸡源性成份的量化分析。方法通过在基因组单拷贝基因上设计引物,绘制模板DNA扩增标准曲线以及确定牛肉、鸡肉质量与DNA浓度的比值常数,利用实时荧光定量PCR技术对四种不同掺混比例的牛鸡瘦肉混合样本中牛源性成份和鸡源性成份所占的质量百分比含量进行分析。结果通过荧光实时定量PCR反应的Ct值、模板DNA扩增标准曲线和质量与DNA的比值常数可以计算出样品中所含牛源性成份和鸡源性成份的质量百分比含量,检测值与理论值之间的绝对误差可控制在5%以内,量化研究结果基本准确。结论对于组织成份单一的样品,可以通过在基因组单拷贝基因上设计特异性的引物,利用PCR技术实现在质量水平上对食品中动物源性成份的量化分析,该技术方法的建立可以为肉类掺假监管工作提供有力的技术支撑。